Микробиология экзамен студфайл

Б01

1.
КЛАССИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ.

Микробы
(бактерии, грибы, простейшие, вирусы),
систематизиро­ваны по их сходству,
различиям и взаимоотношениям между
собой. Три части систематики:
классификация, таксономия, идентифика­ция.
В основу таксономии микроорганизмов
поло­жены их морфологические,
физиологические, биохимические и
молекулярно-биологические свойства.
Таксономи­ческие категории: царство,
подцарство, отдел, класс, порядок,
семейство, род, вид, подвид. В рамках
таксономичес­кой категории выделяют
таксоны — группы организмов, объединенные
по определенным однородным свойствам.

Доклеточные
формы (вирусы — царство Vira),
клеточные (бактерии, архебактерии,
грибы, простейшие). Различают 3 доме­на:

+
Bacteria
— прокариоты, пред­ставленные
настоящими бактериями (эубактериями);

+
Archaea
— прокариоты, пред­ставленные
архебактериями;

+
Eukarya
— эукариоты, клетки имеют ядро с ядерной
оболочкой и ядрышком, цитоплазма
состоит из — митохондрий, аппарата
Гольджи. Eukarya
вклю­чает: царство Fungi
(грибы); царство животных Animalia
(прстейшие — подцарство Protozoa);
царство растений Plante.
Домены включают царства, типы, классы,
порядки, семейства, роды, виды.

Вид
— совокупность особей, объединенных
по близким свойствам, но от­личающихся
от других представителей рода.

Чистая
культура — совокупность однородных
микроорганиз­мов, выделенных на
питательной среде, характеризующихся
сходными морфологичес­кими,
тинкториальными (отношение к
кра­сителям), культуральными,
биохимическими и антигенными свойствами.

Штамм
— чистая культура микроорганизмов,
выделен­ных из определенного
источника и отличаю­щихся от других
представителей вида. Штамм — более
узкое понятие, чем вид или подвид.

2.
ГНТ.

ГНТ
— ги­перчувствительность, обусловленная
АТ (IgE,
IgG,
IgM)
против аллергенов. Развивается сразу
после воздействия аллергена: рас­ширяются
сосуды, повышается их проницаемость,
зуд, бронхоспазм, сыпь, отеки. Поздняя
фаза ГНТ дополня­ется действием
продуктов эозинофилов и нейтрофилов.

К
ГНТ относятся типы реакций
гиперчувствительности (по Джеллу и
Кумбсу):

I
тип —
анафилактический,
действие IgE. При
первичном контакте с АГ образуются
IgE,
которые прикрепляются Fc-фрагментом
к тучным клеткам и базофилам. Повторно
вве­денный АГ перекрестно связывается
с IgE
на клетках, вызывая их дегрануляцию,
выброс гистамина. Первичное поступление
аллергена вызывает продук­цию
плазмацитами IgE,
IgG4.
При повторном поступ­лении аллергена
на тучных клетках и базофилах образуются
комплексы IgE
с аллергеном, вызывающие дегрануляцию
клеток.

Клиника:
Атопия
— наследственная предрасположенность
к развитию ГНТ, обусловленная повы­шенной
выработкой IgE-АТ
к аллергену, повышенным количеством
Fc-рецепторов
для этих АТ на тучных клет­ках,
особенностями распределения тучных
клеток и повы­шенной проницаемостью
тканевых барьеров.

Анафилактический
шок —
протекает остро с развитием коллапса,
отеков, спазма гладкой мускулатуры;
заканчи­вается смертью. Крапивница
—
увеличивается проницае­мость
сосудов, кожа краснеет, появляются
пузыри, зуд. Бронхиальная
астма —
воспаление, бронхоспазм, усиливается
секреция слизи в бронхах.

II
тип —
цитотоксический,
действие IgG, IgM. АГ,
расположенный на клетке узнается АТ
классов IgG,
IgM.
При взаимо­действии типа клетка-АГ-АТ
происходит актива­ция комплемента
и разрушение клетки по трем направлениям:
комплементзависимый цитолиз; фагоцитоз;
антителозависимая клеточная
цитотоксичность.

Ко
II
типу близки антирецепторные реакции
(IV
тип гиперчувствительности), основой
которых являются антирецепторные АТ
(АТ против рецепторов к гормонам).

Клиника:
Аутоиммунные
болезни (появление аутоантител к АГ
собственных тканей): злокачественная
миастения, аутоиммун­ная гемолитическая
анемия, инсулинозависимый диабет II
типа.

Аутоиммунную
гемолитическую анемию вызывают
АТ против Rh-АГ
эритроцитов; эритроциты разруша­ются
в результате активации комплемента
и фагоцитоза. Ле­карственно-индуцируемые
гемолитическая анемия, гранулоцитопения
и тромбоцитопения сопровождаются
появле­нием АТ против лекарства —
гаптена и цитолизом кле­ток, содержащих
этот АГ.

III
тип —
иммунокомплексный,
образование иммунного комплекса IgG,
IgM с АГ. АТ
классов IgG,
IgM
образуют с растворимыми АГ иммунные
комплексы, которые активируют
комплемент. При избытке АГ иммунные
комплексы откладывают­ся на стенке
сосудов, базальных мембранах (структурах,
имеющих Fc-рецепторы).

Первичные
компоненты III
типа — растворимые иммунные комплексы
АГ-АТ и комплемент (анафилатоксины
С4а, СЗа, С5а). Поврежде­ния обусловлены
тромбоцитами, нейтрофилами, иммунными
комплексами, комплементом. Привлекаются
воспалительные цитокины, включая
TNF—a
и хемокины. Макрофаги вовлекаются на
поздних стади­ях.

Развивается
через 3-10 ч после экспозиции АГ, как в
реакции Артюса. АГ может быть экзогенный
(хронические бактериальные, вирусные,
грибковые, протозойные инфекции) или
эндогенный (системная эритематозная
волчанка).

Клиника:
Сывороточная
болезнь —
введение высоких доз АГ (лошадиной
противостолбнячной сы­воротки).
Через 6-7 дней в крови появляются АТ
про­тив лошадиного белка, которые,
взаимодействуя с данным АГ, образуют
иммунные комплексы, откладывающие­ся
в стенках кровеносных сосудов и тканях.
Развиваются си­стемные васкулиты,
артриты (отложение комплексов в
суста­вах), нефрит (отложение
комплексов в почках).

Реакция
Артюса развивается
при повторном внутрикожном введении
АГ, который локально образует иммун­ные
комплексы с ранее накопившимися АТ.
Прояв­ляется отеком, геморрагическим
воспалением.

3.
СТАФИЛОКОККИ.

Таксономия:
от­дел Firmicutes,
семейство Мicrococcacae,
род Staphylococcus.
К этому роду относятся 3 вида: S.aureus,
S.epidermidis
и S.saprophyticus.

Морфологические
свойства:
Округлые клетки. В мазке располагаются
не­симметричными гроздьями. Клеточная
стенка содержит пептидогликаны,
связанные с ним тейхоевые кислоты,
протеин А. Грам+. Спор не образуют,
жгутиков нет. У некото­рых штаммов
можно обнаружить капсулу. Могут
образовывать L-формы.

Культуральные
свойства:
Факультативные анаэробы. Хорошо растут
на простых средах. На плотных средах
образуют гладкие, выпуклые колонии с
различным пигментом, не име­ющим
таксономического значения. Могут
расти на агаре с содержанием NaCl.
Обладают сахаролитическими и
протеолитическими ферментами.
Вырабатывают гемолизины, фибринолизин,
фосфатазу, лактамазу, бактериоцины,
энтеротоксины, коагулазу.

R-плазмиды
детерми­нируют устойчивость к
антибиотикам, за счет продукции
В-лактамазы.

АГ
структура.
Около 30 АГ (белки, полисахариды и
тейхоевые кислоты). В составе клет
стенки стафилококка содержится протеин
А, который может прочно связываться
с Fc-фрагментом
молекулы иммуноглобулина, при этом
Fab-фрагмент
оста­ется свободным и может соединяться
со специфическим АГ. Чувствительность
к бактериофагам (фаготип) обусловлена
повер­хностными рецепторами.

Факторы
патогенности: Условно
— патогенные. Микрокапсула защищает
от фагоцитоза, способствует адгезии
микробов; компоненты клеточной стенки
— стимулируют развитие воспалительных
процессов. Ферменты агрессии: каталаза
— защищает бактерии от действия
фагоцитов, В-лактамаза — разрушает
молекулы антибиотиков.

Резистентность.
Устойчивость в окружа­ющей среде и
чувствительность к дезинфектантам
обычная.

Патогенез.
Источник инфекции — человек и некоторые
виды животных (больные или носители).
Механизмы передачи — респираторный,
контактно-бы­товой, алиментарный.

Иммунитет:
Постинфекционный — клеточно-гуморальный,
нестойкий.

Клиника.
Около 120 клинических форм прояв­ления,
которые имеют местный, системный или
генерализованный характер. К ним
относятся гной­но-воспалительные
болезни кожи и мягких тканей (фурункулы,
абсцессы), поражения глаз, уха,
носоглот­ки, урогенитального тракта,
пищеварительной системы (инток­сикации).

Микробиологическая
диагностика.
Материал — гной, кровь, моча, мокрота,
испражнения.

Бактериоскопический
метод:
из исследуемого материала (кроме
крови) готовят мазки, окрашивают по
Граму. Наличие грам+ гроздевидных
кокков, располагающихся в виде
скоплений.

Бактериологический
метод:
Материал засевают петлей на чашки с
кровяным и желточно-солевым агаром
для получения изолированных колоний.
Посевы инкубируют при 37С в течение
суток. На следующий день исследуют
выросшие колонии на обеих средах. На
кровяном агаре отмечают наличие или
отсутствие гемолиза. На ЖСА S.
aureus
образует золотистые круглые выпуклые
непрозрачные колонии. Вокруг колоний,
обладающих лецитиназной активностью,
образуются зоны помутнения с
перламут­ровым оттенком.

Серологический
метод:
Определяют титр анти-а-токсина в
сыворотке крови больных. Определяют
титр АТ к риботейхоевой кислоте
(компонент клеточной стенки).

Лечение
и профилактика:
Антибиотики широкого спектра действия
(пенициллины, устойчивые к в-лактамазе).
Антитокси­ческая противостафилококковая
плазма или Ig,
иммунизированный адсорбированным
стафилококковым анатоксином. Проведение
планового обследования медперсонала,
вакцинация.

Стафилококковый
анатоксин:
Получают из нативного анатоксина
путем осаждения трихлоруксусной
кислотой и адсорбцией на гидрате
оксида алюминия.

Стафилококковая
вакцина:
Взвесь коагулазо+ стафилококков,
инактивированных нагреванием. Применяют
для лечения длительно текущих
заболеваний.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б04

1.
КЛАССИФИКАЦИЯ
ВИРУСОВ.

В
основу классификации вирусов положены
кате­гории:

• тип
нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК), ее
структура, ко­личество нитей (одна
или две), особенности воспроизводства
вирусного генома;

• размер
и морфология вирионов, количество
капсомеров и тип симметрии;

• наличие
суперкапсида;

• чувствительность
к эфиру и дезоксихолату;

• место
размножения в клетке;

•
антигенные
свойства.

Вирусы
имеют уникальный геном, так как содержат
либо ДНК, либо РНК. Поэтому различают
ДНК-содержащие и РНК-содержащие вирусы.
Они обычно гаплоидны, т.е. име­ют
один набор генов. Геном вирусов
представлен различными видами
нуклеиновых кислот: двунитчатыми,
однонитчатыми, линейными, кольцевыми,
фрагментированными. Среди РНК-
содержащих вирусов различают вирусы
с положительным (плюс-нить РНК) геномом
и отрицательным (минус-нить РНК).
Плюс-нить РНК этих вирусов выполняет
наследственную функцию и функцию
информационной РНК (иРНК), минус-нить
РНК этих виру­сов выполняет только
наследственную функцию.

Вирусы
(царство Vara)
—
мельчайшие микробы, не имеющие
клеточного строения, белоксинтезирующей
системы, содержащие только ДНК или
РНК. Являясь облигатными внутриклеточными
паразитами, вирусы размножаются в
ци­топлазме или ядре клетки. Они —
автономные генетические структуры.
Отличаются особым — разобщенным
способом размножения: в клетке от­дельно
синтезируются нуклеиновые кислоты
вирусов и их белки, затем происходит
их сборка в вирусные частицы.

Морфологию
вирусов изучают с помощью электронной
микроскопии, размеры малы (18-400 нм) и
сравнимы с толщиной оболочки бактерий.

Форма
вирионов: палочковидные (вирус табачной
мозаики), пулевидные (вирус бешенства),
сферические (вирусы полио­миелита,
ВИЧ), нитевидные (филовирусы), в виде
спермато­зоида (многие бактериофаги).
Различают просто устроенные и сложно
устроенные вирусы:

Простые,
или безоболочечные, вирусы состоят
из нуклеиновой кисло­ты и белковой
оболочки, называемой капсидом. Капсид
состоит из повторяющихся морфологических
субъединиц — капсомеров. Нуклеиновая
кислота и капсид взаимодействуют друг
с другом, образуя нуклеокапсид.

Сложные,
или оболочечные, вирусы снаружи
капсида окружены липопротеиновой
оболочкой (суперкапсидом). Эта оболоч­ка
является производной структурой от
мембран вирусинфицированной клетки.
На оболочке вируса расположены
гликопротеиновые
ши­пы.
Под оболочкой некоторых вирусов
нахо­дится матриксный М-белок.

Тип
симметрии.
Капсид
или
нуклеокапсид
могут
иметь спираль­ный, кубический или
слож­ный тип симметрии. Кубический
тип
сим­метрии обусловлен образованием
изометричес­ки полого тела из
капсида, содержащего вирус­ную
нуклеиновую кислоту (у вирусов гепатита
А, герпеса, полиомиелита). Спираль­ный
тип
симметрии обусловлен винтообразной
структурой нуклеокапсида (у вируса
гриппа).

2.
СОВРЕМЕННЫЕ ТЕОРИИ ИММУНОГЕНЕЗА.

Инструктивные
теории предусматривают образование
комплементарных антигенным структурам
АТ путем видоизменения синтезируемых
в рибосомах полипептидов в результате
непосредственного контакта с ними АГ
(теория прямой матрицы Гауровица-Полинга)
или путем стойкого изменения генотипа
клеток-предшественниц антителопродуцентов
(теория непрямой матрицы Берне-та-Феннера).
Селективные теории предусматривают
отбор комплементарных АГ молекул
нормальных АТ с последующей передачей
иммунного комплекса через фагоцитов
продуцентам АТ (теория естественной
селекции Иерне) или иммунокомпетентных
клеток, обладающих соответствующими
рецепторами, которые пролиферируют
в клоны плазматических клеток,
образующих гомологичные АТ
(клонально-селекционная теория
Бернета).

Иммуннопоэз
основан на функционировании Т- и
В-лимфоцитов, которые кооперативно
взаимодействуют между собой и с
макрофагами. Развитие иммунных реакций
начинается с распознавания АГ. Т-хелперы
и эффекторы гиперчувствительности
замедленного типа реагируют на комплекс
носителя АГ (а не гаптена) с белком 1а,
образование которого кодируется
генами иммунного ответа. Т-киллеры
лизируют измененные клетки организма
на поверхности которых АГ образуют
комплекс с белками, кодируемыми генами
гистосовместимости. При этом генотип
взаимодействующих клеток-мишеней,
Т-, В- и А-клеток должен быть идентичным.
В таком случае Т-лимфоциты при помощи
рецепторов для Fc-фрагментов Ig
воспринимают модифицированный АГ
макрофагов, дополнительно усиливают
его la-белком и передают В-лимфоцитам.
Последние, получив дополнительный
митогенный сигнал от иммунного
комплекса, присоединенного при помощи
рецептора для СЗ, начинают пролиферировать
и трансформироваться в клоны
плазматических клеток. Процессы
бласттрансформации начинаются в
результате активации аденилциклазы
и образования циклического
аденилмонофосфата (ц-АМФ).

3.
МЕНИНГОКОККИ.

Менингококковая
инфекция — острая инфекционная болезнь,
характеризующаяся поражением слизистой
оболочки носоглот­ки, оболочек
головного мозга и септицемией;
антропоноз.

Таксономия:
возбудитель Neisseria
meningitidis
(менингококк). Отдел
Gracilicutes, семейство
Neisseriaceae, род
Neisseria.

Морфологические
свойства:
Мелкие диплококки. Характерно
расположение в виде пары кофейных
зерен, обращенных вогнутыми поверхностями
друг к другу. Не­подвижны, спор не
образуют, грам-, имеют пили, капсула
непостоянна.

Культуральные
свойства:
Аэробы, культивируются на средах,
содержащих нормальную сыворотку или
дефибринированную кровь лошади, растут
на искусственных питательных средах,
содержащих спе­циальный набор
аминокислот. Элективная среда должна
содер­жать ристомицин. Повышенная
концентрация СО₂
в атмосфере стимулирует рост
менингококков.

Антигенная
структура:
Имеет несколько АГ: родовые,
общие
для рода нейссерии (белковые и
полисахаридные, которые представлены
по­лимерами аминосахаров и сиаловых
кислот); видовой
(протеиновый);
группоспецифические
(гликопротеидный
комплекс); типоспецифические
(белки
наружной мембраны), которые разграничивают
серотипы внутри серогрупп В и С. По
капсульным АГ выделяют девять серогрупп
(А, В, С, D,
X,
Y,
Z,
W₁₃₅
и Е). Капсульные АГ некоторых серогрупп
иммуногенны для человека. Штаммы
серогруппы А вызывают эпидемические
вспышки. В, С и Y
— спорадические случаи заболевания.

Биохимическая
активность:
Низкая. Разлагает мальтозу и глк. до
кислоты, не образует индол и сероводород.
Ферментация глк. и мальтозы —
дифференциально-диагностический
признак. Не образует крахмалоподобный
полисахарид из сахарозы. Обладает
цитохромоксидазой и каталазой.
Отсутствие β-галактозидазы, наличие
γ-глютаминтрансферазы.

Факторы
патогенности:
Капсула — защищает от фагоцитоза. AT,
образующиеся к полисахаридам капсулы,
проявляют бак­терицидные свойства.
Токсические проявле­ния менингококковой
инфекции обусловле­ны высокотоксичным
эндотоксином.
Для генерализованных форм менин­гококковой
инфекции характерны кожные высыпания,
выраженное пирогенное действие,
образование AT.
Пили,
белки наружной мембраны, наличие
гиалуронидазы
и
нейроминидазы.
Пили
явля­ются фактором адгезии к слизистой
оболоч­ке носоглотки и тканях
мозговой оболочки. Менингококки
выделяют IgA-протеазы,
расщепляющие молекулы IgA,
что защищает бактерии от действия Ig.

Резистентность:
Малоустойчив во внешней среде,
чувствителен к высушиванию и охлаждению.
В течение нескольких минут погибает
при повышении температуры более 50С и
ниже 22С. Чувствительны к пенициллинам,
тетрациклинам, эритромицину, устойчивы
к ристомицину и сульфамидам.

Эпидемиология,
патогенез и клиника:
Источник — чело­век. Носоглотка
служит входными воротами инфекции.
Механизм передачи — воз­душно-капельный.

Инкубационный
период 1-10 дней. Различают локализованные
(назофарингит) и генерализованные
(менингит, менингоэнцефалит) формы
инфекции. Из носоглотки бактерии
попадают в кровяное русло (менингококкемия)
и вызывают поражение мозговых и
слизи­стых оболочек с развитием
лихорадки, геморрагической сыпи,
воспаления мозговых оболочек.

Иммунитет:
Постинфекционный иммунитет при
генерали­зованных формах болезни
стойкий, напряженный.

Микробиологическая
диагностика.
Материал — кровь, спинномозговая
жидкость, носогло­точные смывы.

Бактериоскопический
метод:
Окраска мазков из ликвора и крови по
Граму для определения лейкоцитарной
формулы, выявления менингококков и
их количества. Наблюдают полинуклеарные
лейкоциты, эритроциты, нити фибрина.
Менингококки — грам-, окружены капсулой.

Бактериологический
метод:
Выделение чистой культуры. Посев на
плотные, полужидкие питательные среды,
содержащие сыворотку, кровь. Культуры
инкубируют 20 ч. При 37С с большим
содержанием СО2. Оксидазаположительные
колонии — принадлежат к данному виду.
Наличие N.meningitidis
подтверждают образованием уксусной
кислоты при ферментации глк. и мальтозы.
Принадлежность к серогруппам — РА.

Серологический
метод:
Используют для обнаружения растворимых
бактериальных АГ в ликворе, или АТ в
сыворотке крови. Для обнаружения АГ
применяют ИФА, РИА. У больных, перенесших
менингококк — в сыворотке специфические
АТ: бактерицидные, агглютинины,
гемагглютинины.

Лечение:
Ан­тибиотики — бензилпенициллин
(пенициллины, левомицетин, рифампицин),
сульфамиды.

Профилактика:
Специфическую профилактику проводят
менингококковой химической полисахаридной
вакциной серогруппы А и дивакциной
серогрупп А и С по эпидемическим
показаниям.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б07

1.
МЕЧНИКОВ.

Обосновал
учение о фагоцитозе и фагоцитах.
Доказал что фагоцитоз — явление
универсальное, наблюдается у всех
живот­ных, включая простейших, и
проявляется по отно­шению ко всем
чужеродным веществам (бактерии,
органические частицы). Теория фагоцитоза
обосновала клеточную теорию иммунитета
и процесса иммуногенеза в целом с
учетом клеточных и гуморальных
факторов. За разработку теорий
фагоцитоза Мечникову присуждена
Нобелевская премия.

Неспецифические
факторы защиты организма:

Механические
факторы. Кожа и слизистые оболочки
ме­ханически препятствуют проникновению
микробов и АГ в организм. АГ могут
попадать в организм при заболеваниях
и повреждениях кожи (травмы, ожоги,
воспалительные заболевания, укусы
насекомых, живот­ных), и через
нормальную кожу и слизистую оболочку,
проникая между клетками или через
клет­ки эпителия (вирусы). Механическую
защиту осуществляет реснитчатый
эпителий верхних дыхательных пу­тей,
т.к. движение ресничек постоянно
удаляет слизь вмес­те с попавшими
в дыхательные пути инородными частицами
и микробами.

Физико-химические
факторы. Антимикробные свой­ства:
уксусная, молочная, муравьиная кис­лоты,
выделяемые потовыми и сальными железами
кожи; соля­ная кислота желудочного
сока; протеолитические ферменты в
жидкостях и тканях организма.

Фермент
лизоцим
— протеолитический
фермент мурамидаза, разрушает клеточную
стенку бактерий и других клеток,
вызывая их гибель и способствуя
фагоцитозу. Лизоцим вырабатывают
макрофаги и нейтрофилы. Содержится
во всех секретах, жидко­стях и тканях
организма (кровь, слюна, слезы, молоко,
кишеч­ная слизь, мозг). Снижение
уровня фермента — возникновение
инфекционных воспалительных
заболе­ваний.

Иммунобиологические
факторы.

Гуморальные
факторы
неспецифической резистентности —
белки, содержащиеся в крови и жид­костях
организма. К ним относятся белки
системы комплемен­та, интерферон,
трансферрин, β-лизины, белок пропердин,
фибронектин.

Белки
системы комплемента неактивны, но
приоб­ретают активность в результате
последовательной активации и
взаимодействия компонентов комплемента.
Интерферон
оказы­вает иммуномодулирующий,
пролиферативный эффект и вызы­вает
в клетке, инфицированной вирусом,
состояние противови­русной
резистентности. β
-Лизины
вырабатываются тромбоцита­ми и
обладают бактерицидным действием.
Трансферрин
конку­рирует с микроорганизмами за
необходимые для них метаболи­ты,
без которых возбудители не могут
размножаться. Пропердин
участвует в активации комплемента и
других реакциях. Сывороточные
ингибиторы
крови (р-липопротеины) инактивируют
многие вирусы в результате неспецифической
блокады их поверхности.

Фибронектин
вместе с АТ взаимодей­ствуют с
поверхностью микроорганизмов,
способствуя их фаго­цитозу, играя
роль опсонинов.

NK-клетки
— популяция лимфоцитоподобных клеток
(большие гранулосодержащие лим­фоциты),
обладающие цитотоксическим действием
против чуже­родных клеток (раковых,
клеток простейших и клеток, поражен­ных
вирусом).

2.
ИММУННЫЙ
СТАТУС.

Иммунный
статус определяет эффективность и
согласованность работы всех систем
и звеньев иммунитета — макрофагов,
комплемента, интерферонов, Т- и В-
лимфоцитов, главной системы
гистосовместимости. Клинической
иммунологией
-изучает патологию человека в аспекте
нарушений функций иммунной системы.

Для
постановки диагноза проводят сбор
иммунологического анамнеза и постановку
иммунологических тестов. Могут также
осуществляться тесты in
vivo
(кожные тесты), рентгенологическое
исследование лимфоидных органов
(тимуса).

Иммунопатологические
синдромы:
инфекционный; аллергический;
аутоиммунный; иммунопролиферативный;
первичный иммунодефицит; вторичный
иммунодефицит.

Для
оценки общего
иммунного статуса
используют показатели, отражающие
суммарную эффективность работы всех
систем иммунитета, для изучения
уязвимого
звена
— специфичные для каждой системы
дифференциальные тесты. Изучение
иммунного статуса проводится в два
этапа:

На
первом этапе
с помощью простых ориентировочных
методов
выявляют грубые дефекты фагоцитоза,
клеточного и гуморального иммунитета.
К
тестам первого уровня относят:

—
опред. абсолютного и относительного
содержания лимфоцитов в периферической
крови;

—
опред. количества Т- и В- лимфоцитов;

—
опред. уровня иммуноглобулинов основных
классов (IgG,
IgM,
IgA);

—
опред. фагоцитарной активности
лейкоцитов;

—
опред. титра комплемента.

Методы
исследования главных компонентов
иммунной системы — скрининговые
и развернутые.

При
оценке В- системы иммунитета
к скрининговым тестам относятся :
определение количества CD19+
и CD20+
клеток, IgG,
IgM
и IgA,
а также IgG1,2,3,4,
к развернутым- бласттрансформацию на
митоген лаконоса и S.aureus,
пповерхностных маркеров В- лимфоцитов.

При
оценке Т- системы иммунитета
к скрининговым методам можно отнести
кожные тесты на бактериальные АГ,
определение поверхностных маркеров
Т- лимфоцитов CD3,
CD4,
CD8,
бласттрансформацию на фитогемагглютинин,
к развернутым — изучение продукции
цитокинов, активационных маркеров,
Т- клеточных рецепторов.

При
оценке фагоцитоза
к скрининговым тестам относят
определение количества нейтрофилов,
изучение их морфологии и образования
активных форм кислорода, к развернутым
— определение киллинга микробов,
лизосомальных ферментов, цитокинов.

Методы
исследования лимфоцитов
— изучение поверхностных маркеров и
функциональные тесты.

Изучение
поверхностных СД антигенов основывается
на: методах розеткообразования; РИФ;
ИФА.

3.
ФЛАВИВИРУСЫ.

Flaviviridae
— передаются членистоногими (клещами,
комарами).

Имеют
капсидный белок, шипы суперкапсида
состоят из 2х белков, один из которых
гликопротеид и обладает гемагглютинирующей
активностью. Гемагглютинирующие
свойства альфа — и флавивирусов лучше
выявлять в отношении птичьих эритроцитов.

Flavivirus
(вирус жёлтой лихорадки, клещевого
энцефалита) — включает 67 вирусов
человека и животных.

Hepacivirus
— состоит из одного вида, вируса гепатита
С.

Pestivirus
(вирус диареи скота, классической
лихорадки или чумы свиней) — содержит
вирусы, инфицирующие млекопитающих,
но не человека.

Возбудитель
клещевого энцефалита.
Се­мейство
Flaviviridae,
род Flavivirus.

Морфология:
Сложные, +РНК, структурные белки —
V2капсид,
V3суперкапсид,
V1
внутри от суперкапсида.

Имеет
пять генотипов, име­ющих некоторые
АГ различия, но только один структурный
гликопротеин V3
индуцирует образование вируснейтрализующих
АТ. Он обладает четкой АГ консервативностью.

Резистентность:
Высокая, к действию кислых значений
рН, что важно при алиментарном пути
зара­жения. Вирус обладает
висцеротропностью и нейротропностью.

Эпидемиология:
Переносчиком
и ос­новным резервуаром являются
иксодовые клещи. У клещей происходит
трансовариальная и трансфазовая
передача вируса. Поддержание циркуляции
осуществляется за счет прокормителей
клещей — грызунов, птиц, диких животных.
Характерна весенне-летняя сезонность.

Патогенез:
Человек
заражается трансмиссивно при укусе
инфицированными клещами, от кото­рых
в период кровососания вирус проника­ет
в макроорганизм. Проникновение вируса
в организм возможно также контактным
путем через мелкие повреждения кожи.
Алиментарный путь заражения при
употреблении сырого молока коз и овец.
Употребление молока ведет к ощелачиванию
желудочного сока, что препятствует
инактивации вируса. Инкубационный
период — от 8 до 23 дн.

Арбовирусы.
3 семейства: Flaviviridae,
Togaviridae
и
Bunyaviridae.

Морфология,
химический состав и антигенная
структура:
Вирионы сферической формы. Строение
сложное: они относятся к РНК-геномным
вирусам и состоят из РНК и белка-капсида,
окруженных суперкапсидом; на поверхности
суперкапсида находятся шипы —
гликопротеи­ны. Имеют родоспецифические
АГ, выявля­емые в РСК, группоспецифические
и типоспецифические АГ — гликопротеины,
обладающие протективной активностью
и выявляемые в РТГА и реакции
нейтрализации.

Культивирование:
Универсальной моделью для выделе­ниях
арбовирусов служат мыши, у которых
при заражении возникает энцефалит,
заканчивающий­ся летально. Арбовирусы
культивируют также в культурах кле­ток,
где они не вызывают цитопатического
эффекта. Для выделения некоторых
арбовирусов применяют за­ражение
куриных эмбрионов в желточный мешок.
Арбовирусы размножаются при двух
температурных режимах 36-40 и 22-25С, что
позволяет им репродуцироваться в
организме не только позвоночных, но
и кровососущих членистоногих
переносчиков.

Резистентность:
Чувствительны к эфиру, дезинфектантам,
УФ-облучению, форма­лину; инактивируются
при 60С в течение 30 мин. Длитель­но
сохраняются в замороженном и
лиофилизированном состо­янии.

Вирус
гепатита С.
Се­мейство
Flaviviridae
род
Hepacivirus.

Морфология:
Сложноорганизованный
РНК-содержащим вирус сфе­рической
формы. Геном представлен одной линейной
+ цепью РНК, обладает большой
вариабельностью.

Антигенная
структура:
Вирус обладает слож­ной АГ структурой.
АГ яв­ляются:
1.Гликопротеины
оболочки;
2.Сердцевинный
АГ НСс-АГ; 3.Неструктурные белки.

Культуральные
свойства:
ВГС не культиви­руется на куриных
эмбрионах, не облада­ет гемолитической
и гемагглютинирующей активностью.

Резистентность:
Чувствителен
к эфиру, УФ-лучам, нагреванию до 50С.

Эпидемиология:
Заражение ВГС аналогично заражению
ВГВ. Наиболее часто ВГС передается
при переливаниях крови, трансплацентарно,
половым путем.

Клиника:
Встречаются
безжелтушные формы, течение инфекции
в острой форме, в 50 % случаев процесс
переходит в хроническое те­чение с
развитием цирроза и первичного ра­ка
печени.

Микробиологическая
диагностика. Используются
ПЦР и серо­логическое исследование.
Подтверждением активного инфекционного
процесса является обнаружение в крои
вирусной РНК ПЦР. Серологическое
исследование направлено на определение
антител к NS3
методом ИФА.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б10

1.
ОТКРЫТИЕ ВИРУСОВ ИВАНОВСКИМ.

Вирус
— субклеточный инфекционный агент,
который может воспроизводиться только
внутри живых клеток организма. Они
поражают все типы организмов, от
растений и животных до бактерий и
архей. Вирусы бактерий -бактериофаги.

Со
времени опубликования в 1892 г статьи
Ивановского, описывающей небактериального
патогена растений табака, и открытия
в 1898 г Бейеринком вируса табачной
мозаики, более 5 тысяч вирусов были
детально описаны, хотя существуют ещё
миллионы вирусов различных типов.
Вирусы обнаружены почти в каждой
экосистеме на Земле, являясь одной из
наиболее многочисленных форм жизни.
Изучает вирусы — вирусология, раздел
микробиологии.

2.
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ. ИММУНОБЛОТИНГ.

ИФА
—
выявление АГ с помощью соответствующих
им АТ, конъюгированных с ферментом-меткой
(пероксидазой, бета-галактозидазой
или щелочной фосфатазой). После
соединения АГ с меченной ферментом
иммунной сывороткой в смесь добавляют
субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется
ферментом и изменяется цвет продукта
реакции — интен­сивность окраски
прямо пропорциональна количеству
свя­завшихся молекул АГ и АТ. ИФА
применяют для диагностики вирусных,
бактериальных и паразитарных бо­лезней,
в частности для диагностики ВИЧ-инфекций,
гепати­та В, а также определения
гормонов, ферментов, лекар­ственных
препаратов.

Твердофазный
ИФА
—
вариант теста, когда один из компо­нентов
иммунной реакции (АГ или АТ) сорбирован
на твердом носителе (в лунках планшеток
из полистирола). Компоненты выявляют
добавлением меченых АТ или АГ. При
положительном результате изменяется
цвет хромоге­на. Каждый раз после
добавления очередного компонента из
лунок удаляют несвязавшиеся реагенты
путем промывания.

I.
При определении АТ в лунки планшеток
с сорбированным АГ последовательно
добавляют сы­воротку крови больного,
антиглобулиновую сыворотку, ме­ченную
ферментом, и субстрат/хромоген для
фермента.

II.
При определении АГ в лунки с
сорби­рованными АТ вносят АГ
(сыворотку кро­ви с искомым АГ),
добавляют диагностическую сыво­ротку
против него и вторичные АТ (против
диагностиче­ской сыворотки), меченные
ферментом, а затем субстрат/хро­моген
для фермента.

Конкурентный
ИФА
для
определения АГ: Искомый АГ и меченный
ферментом АГ конкурируют друг с другом
за связывание ограниченного количества
АТ иммунной сыворотки.

Конкурентный
ИФА для определения АТ: Искомые АТ и
меченные ферментом АТ конкурируют
друг с другом за АГ, сорбированные на
твердой фазе.

Иммуноблоттинг
— высокочувстви­тельный метод
выявления белков, основанный на
сочетании электрофореза и ИФА или
РИА. Иммуноблоттинг ис­пользуют для
диагностики ВИЧ-инфекции.

АГ
возбудителя разделяют с помощью
электрофоре­за в полиакриламидном
геле, затем переносят их из геля на
активированную бумагу
или
нитроцеллюлозную мембрану и проявляют
с помощью ИФА. На полоски с блотами АГ
наносят сыворотку больного.
Затем,
после инкубации, отмывают от несвязавшихся
АТ боль­ного и наносят сыворотку
против Ig
челове­ка, меченную ферментом.
Образовавшийся
на полоске комплекс (АГ + АТ больного
+ АТ против Ig
человека) выявляют добавлением
хромогенного субстрата, изменяющего
окраску под действием фермента.

3.
БРУЦЕЛЛЁЗ.

Таксономия:
Возбудители B.melitensis,
B.abortus,
B.suis,
B.canis,
B.ovis.
Отдел Gracilicutes,
род Brucella.

Морфологические
и тинкториальные свойства:
Мелкие, грам- палочки овоидной формы.
Не имеют спор, жгутиков, иногда образуют
микрокапсулу.

Культуральные
свойства:
Облигатные аэробы. B.abortus
для своего роста нуждается в присутствии
5-10 % СО2. Оптимальная температура для
роста 37С. Требовательны к питатель­ным
средам и растут на специальных средах
(пече­ночных, кровяной агар).
Особенность — медленный (2 нед) рост. В
жидких средах — равномерное помутнение
с осадком. На плотных — мелкие, круглые
гладкие голубые колонии. Диссоциация
от S—
к R-формам
колоний.

Биохимическая
активность:
Очень низкая; содержат каталазу и
оксидазу, нитраты редуцируют в нитриты,
цитраты не утилизируют, продуцируют
Н2S.

АГ
структура:
O-АГ
— соматический, и капсульный АГ. Две
разновид­ности О-АГ— А(абортус) и
М(мелитензис).
Иногда
обнаруживают К-АГ.

Факторы
патогенности:
Образуют эндотоксин, обладающий
высокой инвазивной активностью.
Продуцируют один из ферментов агрессии
— гиалуронидазу. Их адгезивные свойства
связаны с белками наружной мембраны.

Резистентность:
Погибают при кипяче­нии, при действии
дезинфицирующих веществ, устойчивы
к низкой температуре.

Эпидемиология:
Зоонозная инфекция. Источник — мелкий
рогатый скот, овцы, выделяющие
B.melitensis.
Люди более восприимчивы к этому виду
возбудителя. Реже заражение происходит
от коров (B.abortus)
и свиней (B.suis).
Больные люди не являются источником
заболевания.

Патогенез.:
Проникают в организм через слизи­стые
оболочки или поврежденную кожу,
попадают сначала в регионарные
лимфатические узлы, затем в кровь,
разносятся по всему организму и
внедряются в органы ретикулоэндотелиальной
системы (печень, селезенку, костный
мозг). Там они могут длительное время
сохраняться и вновь попадать в кровь.
При гибели освобождается эндоток­син,
вызывающий интоксикацию.

Клиника:
Инкубационный период 1-3 нед. Длительная
лихорадка, озноб, потливость, боли в
суставах, радикулиты.

Иммунитет:
После перенесенного заболевания
формирует­ся непрочный иммунитет.
Клеточно-гуморальный, нестерильный,
относительный.

Микробиологическая
диагностика.
Проводится путем серологических
исследований (реакция Райта и Хеддлсона).

Бактериологическое
исследование:
Для получе­ния гемокультуры кровь
засевают в два флакона печеночного
бульона. Один из них (для выделения В.
melitensis)
инкубируют в обычных аэробных условиях,
другой (для выделения В. abortus)
— с СО2. В первых генерациях бруцеллы
растут очень медленно. На агаре бруцеллы
образуют бесцветные коло­нии, в
бульоне — помутнение и слизистый
осадок. В мазках, ок­рашенных по
Граму, обнаруживаются мелкие грам-
формы. Они неподвижны, спор не образуют,
в опре­деленных условиях появляется
видимая капсула.

Для
быстрой идентификации бруцелл ставят
реакцию агглю­тинации со специфическими
агглютинирующими сыворотками на
стекле и определяют чувствительность
к специфическому фагу. Все виды бруцелл
не ферментируют углеводы. Их
дифференци­руют по образованию H2S,
чувствительности к СO2,
действию анилиновых красителей
(основной фуксин).

Серодиагностика:
Реакция агглютина­ции Райта с
бруцеллезным диагностикумом.
Положительные результаты отмечаются
спустя 1 нед. после начала заболевания
и сохраняются у переболевших многие
годы. Диагностический титр реакции
1:200. Для ускоренной серодиагностики
применяется реакция агглю­тинации
Хеддлсона, которая ставится с
неразведенной сыворот­кой больного
и концентрированным АГ — диагностикумом,
окрашенным метиленовым синим. При
положительной реакции появляются
хлопья си­него цвета. Реакция
положительна при наличии агглютинации
на «++».

Для
серодиагностики используют РПГА, РИФ,
РСК, метод опреде­ления неполных
АТ. В поздние периоды заболевания
процент положительных серологических
реакций (агглютинации, РПГА и РСК)
начинает снижаться и большее
диагностическое значение приобретают
кожно-аллергическая проба и реакция
Кумбса.

Биопроба.
Применяется
для выделения чистой культуры из
материала, загрязненного посторонней
микрофлорой. Исследуемый материал
вводят морским свинкам подкожно в
паховую область. Кусочки органов и
лимфатических узлов засевают на
питательные среды для получения чистой
культуры и ее идентификации.

Кожно-аллергическая
проба (реакция Бюрне).
На
предплечье внутрикожно вводят 0,1 мл
бруцеллина. При наличии аллергии уже
через 6 ч могут появиться гипере­мия
кожи и болезненная отечность. Учет
реакции производят через 24 ч. Реакция
обладает высокой чувстви­тельностью.

Лечение:
Антибиотики широкого спектра действия.
Специфическая иммунотерапия убитой
лечебной бруцеллезной вакциной или
бруцеллина (фильтрат бульонных культур
В. melitensis,
B.abortus,
В.suis,
убитых нагреванием). При острых формах
— бруцеллезный Ig.

Профилактика:
Живая
бруцеллезная вакцина
полученная из В. abortus
создает перекрестный иммунитет против
других видов бруцелл.

Бруцеллезный
единый диагностикум. Взвесь
убитых бруцелл, окрашенных метиленовым
синим, применяется при серо­логической
диагностике бруцеллеза постановкой
реакции агглю­тинации Райта и
Хеддлсона.

Накожная
сухая живая бруцеллезная профилактическая
вак­цина. Взвесь
вакцинного штамма В. abortus
применяется для профилактики бруцеллеза.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б13

1.
ХИМИОТЕРАПИЯ.

Специфическое
антимикробное, антипаразитар­ное
лечение при помощи хим веществ. Свойства
этих веществ — избирательность действия
против болезнетворных микроорганизмов
в условиях макроорганизма.

Основоположник
химиотерапии — Эрлих, установил, что
хим вещества, содержащие мышьяк,
губительно действу­ют на спирохеты
и трипаносомы, и получил первый
химиотерапевтический препарат —
сальварсан (соединение мы­шьяка,
убивающее возбудителя, но безвредное
для микроорга­низма).

Домагк
обнаружил среди анилиновых красителей
вещество — пронтозил, спасавший
экспериментальных животных от
стрепто­кокковой инфекции, но не
действующий на эти бактерии вне
организма. В организме происхо­дит
распад пронтозила с образованием
сульфаниламида, обла­дающего
антибактериальной активностью.

Вудс
установил, что суль­фаниламиды
являются структурными аналогами
парааминобензойной кислоты (ПАБК),
участвующей в биосинтезе фолиевой
кислоты, необходимой для жизнедеятельности
бактерий. Бакте­рии, используя
сульфаниламид вместо ПАБК, погибают.

Противовирусные
препараты.

Вирулоцидные
препараты, действующие на внеклеточные
вирионы: Оксолин действующий на
риновирусы, герпесвирусы, миксовирусы;
тетрофеин действующий на аденовирусы,
герпесвирусы.

Препараты,
блокирующие адсорбцию вируса на
рецепторах клетки хозяина: На этой
стадии используют фальшивые рецепторы
— структурные аналоги вирусных
рецепторов, которые адсорбируясь на
рецепторах (лигандах) клеток, препятствуют
адсорбции вируса. Аналог рецептору
CD4, на котором адсорбируется ВИЧ.

Препараты,
нарушающие процесс раздевания вирусов:
Ремантадин, активный против вируса
гриппа А.

Препараты,
ингибирующие стадию сборки вирионов:
Производные тиосемикарбазона. Метисазон
(марборан) ингибитор вируса оспы.

Препараты
— ингибиторы репликации — аналоги
азотистых оснований, которые, встраиваясь
в молекулу ДНК или РНК, блокируют
работу полимераз: Видарабин — действует
на ДНК-зависимую ДНК-полимеразу вируса
герпеса. Препарат токсичен, используется
только при тяжелых формах заболеваний.
Ациклавир имеет тот же механизм
действия. Наиболее широко используется
при инфекциях, вызванных вирусом
герпеса Эпштейна-Барр и герпесвирусами
6 и 7 типов.

Азидотимидин
— аналог тимина, действует на обратную
транскриптазу ретровирусов, в частности
ВИЧ. Дидезоксицитадин — аналог
азидотимидина. Оба препарата токсичны.
К ингибиторам репликации относятся
также аналоги фосфоновой кислоты,
которые, необратимо связываясь с
пирофосфатом, блокируют функцию
ДНК-полимеразы.

2.
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ. ИММУНОБЛОТИНГ.

ИФА
—
выявление АГ с помощью соответствующих
им АТ, конъюгированных с ферментом-меткой
(пероксидазой, бета-галактозидазой
или щелочной фосфатазой). После
соединения АГ с меченной ферментом
иммунной сывороткой в смесь добавляют
субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется
ферментом и изменяется цвет продукта
реакции — интен­сивность окраски
прямо пропорциональна количеству
свя­завшихся молекул АГ и АТ. ИФА
применяют для диагностики вирусных,
бактериальных и паразитарных бо­лезней,
в частности для диагностики ВИЧ-инфекций,
гепати­та В, а также определения
гормонов, ферментов, лекар­ственных
препаратов.

Твердофазный
ИФА
—
вариант теста, когда один из компо­нентов
иммунной реакции (АГ или АТ) сорбирован
на твердом носителе (в лунках планшеток
из полистирола). Компоненты выявляют
добавлением меченых АТ или АГ. При
положительном результате изменяется
цвет хромоге­на. Каждый раз после
добавления очередного компонента из
лунок удаляют несвязавшиеся реагенты
путем промывания.

I.
При определении АТ в лунки планшеток
с сорбированным АГ последовательно
добавляют сы­воротку крови больного,
антиглобулиновую сыворотку, ме­ченную
ферментом, и субстрат/хромоген для
фермента.

II.
При определении АГ в лунки с
сорби­рованными АТ вносят АГ
(сыворотку кро­ви с искомым АГ),
добавляют диагностическую сыво­ротку
против него и вторичные АТ (против
диагностиче­ской сыворотки), меченные
ферментом, а затем субстрат/хро­моген
для фермента.

Конкурентный
ИФА
для
определения АГ: Искомый АГ и меченный
ферментом АГ конкурируют друг с другом
за связывание ограниченного количества
АТ иммунной сыворотки.

Конкурентный
ИФА для определения АТ: Искомые АТ и
меченные ферментом АТ конкурируют
друг с другом за АГ, сорбированные на
твердой фазе.

Иммуноблоттинг
— высокочувстви­тельный метод
выявления белков, основанный на
сочетании электрофореза и ИФА или
РИА. Иммуноблоттинг ис­пользуют для
диагностики ВИЧ-инфекции.

АГ
возбудителя разделяют с помощью
электрофоре­за в полиакриламидном
геле, затем переносят их из геля на
активированную бумагу
или
нитроцеллюлозную мембрану и проявляют
с помощью ИФА. На полоски с блотами АГ
наносят сыворотку больного.
Затем,
после инкубации, отмывают от несвязавшихся
АТ боль­ного и наносят сыворотку
против Ig
челове­ка, меченную ферментом.
Образовавшийся
на полоске комплекс (АГ + АТ больного
+ АТ против Ig
человека) выявляют добавлением
хромогенного субстрата, изменяющего
окраску под действием фермента.

3.
ДИФТЕРИЯ.

Острая
инфекционная болезнь, харак­теризующаяся
фибринозным воспалением в зеве, гортани
и явлениями ин­токсикации. Возбудитель
Corynebacterium
diphtheria.

Таксономия:
Отдел Firmicutes
род Corynebacterium.

Морфологические
и тинкториальные свойства:
Полиморфизм: тонкие, слегка изогнутые
палочки, кокковидные и вет­вящиеся
формы. Бактерии располагаются под
углом друг к другу. Не образуют спор,
нет жгутиков, выявляют микрокапсулу.
Характерная особенность — наличие на
концах палочки зерен волютина
(булавовидная форма). Грам+.

Культуральные
свойства:
Факульта­тивный анаэроб. Растет на
специальных питатель­ных средах,
(среда Клауберга (кровяно-теллуритовый
агар)), на которой даёт колонии 3 типов:
а) крупные, серые, с неровными краями,
радиальной исчерченностью; б) мелкие,
чер­ные, выпуклые, с ровными краями;
в) похожие на первые и вторые.

В
зависимости от культуральных и
ферментативных свойств различают 3
биологических варианта C.diphtheriae:
gravis,
mitis
и промежуточный intermedius.

Ферментативная
ак­тивность:
Высокая. Ферментируют глк и мальтозу
с образованием кислоты, не разлагают
сахарозу, лактозу и маннит. Не продуцируют
уреазу и не образуют индол. Продуцирует
фермент цистиназу, расщепляющую
цистеин до H2S.
Образует каталазу, сукцинатдегидрогеназу.

АГ
свой­ства:
О-АГ — термостабильные полисахаридные,
расположены в глубине клет стенки.
К-АГ — поверхностные, термолабильные,
сероватоспецифические. С помощью
сывороток к К-АГ С.diph.
разделяют на серовары (58).

Факторы
патогенности:
Экзотоксин, нарушающий синтез белка
и пора­жающий клетки миокарда,
надпочечников, почек, нервных ганглиев.
Способность вырабатывать экзотоксин
обус­ловлена наличием в клетке
профага, несущего tох-ген,
ответ­ственный за образование
токсина. Фер­менты агрессии —
гиалуронидаза, нейраминидаза. К
фак­торам патогенности относится
микрокапсула.

Резистентность:
Устойчив к высушиванию, действию
низких t.

Эпидемиология:
Источник — больные. Путь передачи
воздушно-капельный, контактный путь
— через белье, посуду.

Патогенез:
Входные ворота — слизистые обо­лочки
зева, носа, дыхательных путей, глаз,
половых органов, раневая поверхность.
На месте входных ворот наблюдается
фибринозное воспаление, образуется
характерная пленка, кото­рая с трудом
отделяется от подлежащих тканей.
Бактерии вы­деляют экзотоксин,
попадающий в кровь — развивается
токсинемия.

Клиника:
Формы по локализации: дифтерия зева
(85-90 % случаев), дифтерия носа, гортани,
глаз, наружных половых ор­ганов,
кожи, ран. Инкубационный период от 2
до 10 дней. Заболевание начинается с
повышения температуры тела, боли при
глотании, появления пленки на миндалинах,
увеличения лимфатических узлов, отека
гортани, разви­вается дифтерийный
круп, который может привести к асфик­сии
и смерти.

Иммунитет:
После заболевания — стойкий, напряженный
антитоксичный. Особое значение —
образование АТ к фрагменту В. Они
нейтрализуют дифтерийный гистотоксин,
предупреждая прикрепление последнего
к клетке. Антибактериальный иммунитет
— сероватоспецифичен.

Микробиологическая
диагностика.
С помощью тампона у больного берут
пленку и слизь из зева и носа. Для
постановки предварительного диагноз
применяют бактериоскопический метода.
Основной метод — бактериологический:
посев на среду Клаубера II
(кровяно-теллуритовый агар), на плотную
сывороточную среду для выявления
продукции цистиназы, на среды Гисса,
на среду для определения токсигенности
возбудителя. Внутривидовая идентификация
— определение био- и серовара. Для
ускоренного обнаружения дифтерийного
токсина применяют: РНГА с антительным
эритроцитарным диагностикумом, реакцию
нейтрализации АТ (о наличии токсина
судят по эффекту предотвращения
гемаггютинации); РИА и ИФА.

Лечение:
Введение специфической антитоксической
противодифтерийной лошадиной жидкой
сыворотки. Ig
человека противодифтерийный для в/в
введения.

Ассоциированные
вакцины: АКДС (абсорбированная
коклюшно-столбнячная вакцина), АДС
(абсорбированный дифтерийно-столбнячный
анатоксин).

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б16

1.
РИКЕТСИИ И ХЛАМИДИИ. МИКОПЛАЗМЫ.

Риккетсии
и хламидии относятся к классу Rickettsia
облигатных внутриклеточных паразитов,
который делится на два порядка:
Rickettsiales и Chlamidiales.

Риккетсии
— мелкие грам-. Полиморфизм — кокковидные,
палочковидные и нитевидные формы.
Размеры от 0,5 до 3-4 мкм, длина нитевидных
форм 10-40 мкм. Спор и капсул не образуют,
окрашиваются по Здродовскому в красный
цвет.

Хламидии
— шаровидной, овоидной, палочковидной
формы. Размеры 0,2-1,5 мкм. Морфология и
размеры хламидии зависят от стадии
внутриклеточного цикла развития, для
которого характерно превращение
небольшого шаровидного элементарного
образования в крупное инициальное
тельце с бинарным делением. Перед
делением частицы хламидии обволакиваются
образованием (бактериальная капсула).
Окрашиваются по Романовскому-Гимзе,
грам-, видны при фазово-контрастной
микроскопии.

Микоплазмы
— антропонозные бактериальные инфекции
человека, поражающие органы дыхания,
мочеполовой тракт.

Клас­с
Mollicutes,
включает
3 порядка:
Acholeplasmatales,
Mycoplasmatales, Anaeroplasmatales.

Морфология:
Отсутствие ригидной клет стен­ки,
полиморфизм, пластичность, осмотическая
чувствительность, резистентность к
различным агентам, подавляющим синтез
клет стенки (пенициллин). Грам-
окрашиваются по Романовскому-Гимзе;
различают подвижные и неподвижные
виды. Клеточная мембрана находится в
жидкокристаллическом состоянии;
включает белки, погруженные в два
липидных слоя, их компонент — холестерин.

Культуральные
свойства:
Хемоорганотрофы,
источник энергии — глк или аргинин.
Растут при температуре 30С. Факультативные
анаэ­робы; требовательны к пит средам
и условиям культивирования. Пит среды
— экстракт говяжьего сердца, дрожжевой
экстракт, пептон, ДНК, глк, аргини).
Культивируют на жидких, полужидких и
плотных пит средах.

Биохимическая
активность:
Низкая.
2 группы: 1. разлагающие с образованием
кислоты глк, мальтозу, маннозу,
фруктозу, крахмал и гликоген; 2.
окисляющие глутамат и лактат, но не
ферментирующие углеводы.

АГ
структура:
Основные АГ представлены фосфо- и
гликолипидами, полисахаридами и
белками; наиболее иммунногенны
поверх­ностные АГ, включающие
углеводы в составе сложных гликолипидных,
липогликановых и гликопротеиновых
комплексов.

Факторы
патогенности:
Адгезины, токсины, ферменты агрессии
и продукты метаболизма. Адгезины
входят в состав поверхностных АГ и
обуславливают ад­гезию на клетках
хозяина. Нейротоксин, эндотоксин,
гемолизин. Ферменты агрес­сии —
фосфолипаза А и аминопептидазы,
гидролизующие фосфолипиды мембраны
клетки. Протеазы, вызывающие дегрануляцию
клеток, расщепле­ние молекул AT
и незаменимых аминокислот.

Эпидемиология:
М.
pneumoniae
колонизирует
слизистую оболочку респираторного
тракта; M.
hominis,
M.
genitalium
и
U.
urealyticum
—
обитают в урогенитальном тракте.

Источник
— больной. Механизм передачи — аэрогенный,
основной путь — воздушно-капельный.

Патогенез:
Проникают в организм, мигрируют через
слизистые оболочки, прикрепляются к
эпителию через гликопротеиновые
рецепторы. Микробы не проявляют
выраженного цитопатогенного действия,
но вызывают нарушения свойств клеток
с развитием местных воспалительных
реакций.

Клиника:
Респираторный микоплазмоз — в форме
инфекции верхних дыха­тельных путей,
бронхита, пневмонии. Ге­молитическая
анемия, неврологические расстройства,
осложнения со стороны ССС.

Иммунитет:
Случаи
повторного заражения.

Микробиологическая
диагностика.
Мазки из носоглотки, мокрота, бронхиальные
смывы. При урогенитальных инфекциях
— моча, соскобы с уретры, влагалища.

При
серодиагностике материал для
иссле­дования — мазки, в которых
можно обнаружить АГ микоплазм в прямой
и непрямой РИФ. Микоплазмы и уреаплазмы
выяв­ляются в виде зеленых гранул.

АГ
микоплазм может обнаруживаться в
сыворотке крови больных. Для этого
ис­пользуют ИФА.

Для
серодиагностики респираторного
микоплазмоза определяют специфические
AT
в парных сыворотках больного. При
урогенитальных микоплазмозах в ряде
случаев проводят серодиагностику, AT
определяют чаше всего в РПГА и ИФА.

Лечение:
Антибиотики.
Этиотропная химиотерапия.

Профилактика:
Неспецифическая.

2.
СЕРОТЕРАПИЯ.

Серотерапия
— лечение сыворотками иммунизированных
животных или иммунных людей. Применяется
при инфекционных болезнях. Антитоксические
сыворотки
готовят путем иммунизации животных
(лошадей) соответствующим токсином
или анатоксином и применяют при лечении
больных дифтерией, столбняком, газовой
гангреной, ботулизмом. 
Действующим
началом этих сывороток является
специфический антитоксин. Активность
антитоксических сывороток определяется
в антитоксических единицах.
Антитоксические сыворотки, введенные
в раннем периоде болезни, обладают
высокой эффективностью.
При дифтерии
серотерапия — основной метод
лечения.
Антибактериальные
сыворотки
приготавливают путем иммунизации
животных бактериальными вакцинами.
Содержат антибактериальные иммунные
тела. Используются против сибирской
язвы, чумы. Лечебные сыворотки вводят
внутримышечно.
Для быстрого лечебного
действия вводят внутривенно.
АТ,
введенные непосредственно в кровь,
быстро выводятся из организма. Побочные
явления серотерапии — сывороточная
болезнь. Частота побочных явлений при
серотерапии зависит от качества
сыворотки, а именно от степени
освобождения ее от балластных
сывороточных протеинов.
К серотерапии
относится лечебное применение
гамма-глобулинов. Гамма-глобулины,
приготовленные из сыворотки
гипериммунизированных лошадей,
используются в терапии сибирской язвы
и клещевого энцефалита.
Лечение
гипериммунными человеческими
гамма-глобулинами — при коклюше, гриппе
у детей раннего возраста, стафилококковой
инфекции.

Антитоксические
сыворотки содержат специфические АТ
против токсинов — антитоксины и
дозируются антитоксическими единицами.
Действие их сводится к нейтрализации
токсинов, вырабатываемых возбудителями.
Антитоксическими являются
противодифтерийная, противостолбнячная,
противоботулиническая, противогангренозная,
противосибиреязвенная сыворотки.

Антибактериальные
сыворотки содержат АТ против бактерий
(агглютинины, бактериолизины, опсонины).
Сыворотки вводят внутримышечно и лишь
в особых случаях внутривенно.

Эффект
от применения сыворотки зависит от
дозы и сроков ее введения. Чем раньше
от начала заболевания введена сыворотка,
тем лучше результат. Сыворотка хорошо
инактивирует свободно циркулирующий
в крови токсин. Продолжительность
циркуляции его ограничена 1-3 днями, в
дальнейшем он связывается клетками
и тканями.

Ig
и гамма-глобулины (против натуральной
оспы, гриппа, кори, клещевого энцефалита,
стафилококковой инфекции, сибирской
язвы, лептоспироза, коклюша, герпетической
инфекции). Имеют высокую концентрацию
АТ, лишены балластных белков, лучше
проникают в ткани. Гомологичные Ig
можно вводить без предварительной
гипосенсибилизации больного к
чужеродным белкам, гетерологичные
гамма-глобулины — только после
соответствующей подготовки больного.

Осложнения
при серотерапии: анафилактический
шок и сывороточная болезнь.

Шок
развивается сразу после введения
сыворотки или гамма-глобулина.

Сывороточная
болезнь развивается спустя 5-12 дней
после введения препарата.

Клинически
она проявляется лихорадкой, отеком
слизистых оболочек, лимфаденитом,
пятнисто-папулезной сыпью и зудом в
местах экзантемы; возможны радикулиты,
невриты, синовиты. Заболевание длится
около 6-12 дней, прогноз обычно
благоприятный.

3.
ВОЗБУДИТЕЛИ
ОРВИ. АДЕНОВИРУСЫ.

Adenoviridae
— семейство ДНК-содержащих вирусов
позвоночных, лишённых липопротеиновой
оболочки. Диаметр 70-90 нм.

В
патологии человека значение имеют 3,
4, 7, 8, 14 и 21 серотипы. Они устойчивы во
внешней среде, инактивируются при
прогревании до 56С и обработке растворами
хлорамина и фенола. Хорошо размножаются
на культуре ткани человека и животных.

Таксономия
и классификация:

ДНК-содержащие
вирусы.
V
семейство — Adenoviridae.
Поражают глаза, кишечник, мочевой
пузырь, 3 типа вызывают ОРВИ.

Структура:
Среднего размера, сфери­ческие,
палочковидные или нитевидной формы.
Возбудителми ОРВИ содержат однонитчатую
РНК, кроме реовирусов, обладающих
двунитчатой РНК, и ДНК-содержащих
аденовирусов. Некоторые окружены
суперкапсидом.

АГ
структура:
Слож­ная. У вирусов каждого рода
есть общие АГ; имеют типоспецифические
АГ, по которым можно проводить
идентификацию возбудителей с
определением серотипа. Вирусы ОРВИ
обладют гемагглютинируюшей способностью.
РТГА основана на блоки­ровании
активности гемагглютининов вируса
специфическими АТ.

Культивирование:
Культуры клеток. Для каждой группы
вирусов подобраны чувс­твительные
клетки (аденовирусы — эмбриональные
клетки почек; коронавирусы — эмбриональные
клетки и клетки трахеи). В зараженных
клетках вирусы вызывают цитопатический
эффект. Культуры клеток исполь­зуют
также при идентификации возбудителей
с цитолитической активностью. Для
этого применяют РН вирусов в культуре
клеток (нейтрализация цитолитического
действия вирусов типоспецифическми
АТ).

Иммунитет:
Вируснейтрализующие специфические
IgA
(обеспечивают мес­тный иммунитет)
и клеточный иммунитет. Местная выработка
а-интерферона, появление которого в
но­совом отделяемом приводит к
значительно­му снижению количества
вирусов. Особенность ОРВИ — формирование
вторичного иммунодефицита.
Постинфекционный иммунитет — нестойкий,
непродолжительный, типоспецифический.

Микробиологическая
диагностика.
Материал
— носоглоточная слизь, мазки-отпечатки
и смывы из зева и носа.

Экспресс-диагностика.
Обнаруживают
ви­русные АГ в инфицированных
клетках. Применяют РИФ (прямой и
непрямой мето­ды) с использованием
меченных флюорохромами специфических
АТ, а также ИФА. Для труднокультивируемых
вирусов исполь­зуют генетический
метод (ПЦР).

Вирусологический
метод.
Индикацию
вирусов в зараженных лабораторных
моделях проводят по ЦПЭ, а также РГА
и гемадсорбции (для ви­русов с
гемагглютинирующей активностью), по
образованию включений (внутриядерные
включения при аденовирусной инфекции,
цитоплазматические включения в
околоядер­ной зоне при реовирусной
инфекции), а также по образованию
бляшек, и цветной пробе. Идентифицируют
вирусы по АГ структуре в РСК, РПГА,
ИФА, РТГА, РН вирусов.

Серологический
метод.
Противовирусные
АТ исследуют в парных сыворотках
больного, полученных с интервалом в
10 дней. Диагноз ставят при увеличении
тит­ра АТ как минимум в 4 раза. При
этом определяется уровень IgG
в таких реакциях, как РН вирусов, РСК,
РПГА, РТГА.

Лечение:
Неспецифическое — а-интерферон, оксолин
(глазные капли), при вторичной
бактериальной инфекции — антибиотики.
Основное лечение —
симптоматическое/патогенетическое.
Антигистаминные препараты.

Профилактика:
Неспецифическая — противоэпидемич.
мероприятия. Для профилактики
аденовирусов — пероральные живые
тривалентные вакцины.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б19

1.
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ВИРУСА С КЛЕТКОЙ.
РЕПРОДУКЦИЯ
ВИРУСОВ.

Типы
взаимодействия вируса с клеткой:

Продуктивный
тип
—
завершается обра­зованием нового
поколения вирионов и ги­белью
зараженных клеток (цитолитическая
форма). Некоторые вирусы выходят из
клеток, не разрушая их (нецитолитическая
форма).

Абортивный
тип
—
не завершается обра­зованием новых
вирионов, т.к. инфек­ционный процесс
в клетке прерывается на одном из
этапов.

Интегративный
тип (вирогения)
— характеризуется встраиванием вирусной
ДНК в виде провируса в хромосому клетки
и их совместным сосуществованием.

Репродукция
вирусов:

Адсорбция.
Прикрепление
вирусов к поверхности клетки.
Адсорбирует­ся на участках клет
мембраны (рецепторах). Природа клет
рецепторов — белки, углеводные
ком­поненты белков и липидов, липиды.

Проникновение
в клетку. Виропексис
или слияние вирусной оболочки с
клеточной мембраной. При виропексисе
после адсорб­ции вирусов происходят
впячивание участка кле­т мембраны
и образование внутриклеточной вакуоли,
ко­торая содержит вирусную частицу.
Вакуоль с вирусом может транспортироваться
в разные участки цитоплаз­мы или
ядро клетки.

Раздевание.
Удаление
защитных вирусных оболочек и освобождение
внутреннего ком­понента вируса,
способного вызвать инфекционный
процесс. Происходит в определенных
участках цитоплазмы или ядра клетки,
для чего клетка использует набор
специальных ферментов. В случае
проникновения вируса путем слияния
вирусной оболочки с кле­точной
мембраной процесс проникновения
вируса в клетку со­четается с первым
этапом его раздевания. Конечные
продук­ты раздевания — нуклеокапсид
или нуклеиновая кислота вируса.

Биосинтез
компонентов вируса. Проникшая
в клетку вирусная нуклеиновая кислота
несет генетическую информацию, которая
конкурирует с генетической информацией
клетки. Дезорганизует работу клеточных
систем, подавляет собственный метаболизм
клетки и заставляет ее синтезировать
новые вирус­ные белки и нуклеиновые
кислоты, идущие на построение ви­русного
потомства.

Формирование
вирусов. Синтезированные
вирусные нуклеиновые кислоты и белки
обладают способностью специфи­чески
узнавать друг друга и при достаточной
их концентра­ции самопроизвольно
соединяются в результате гидрофобных,
со­левых и водородных связей.

Выход
вирусов из клетки. Взрывной
тип
— одновременный выход большого
количества вирусов. Клетка быстро
погибает. Присущ вирусам, не имеющих
суперкапсидной оболочки. Тип
почкование
— присущ вирусам, имеющим суперкапсидную
оболочку. На заключительном этапе
сборки нук­леокапсиды сложно
устроенных вирусов фиксируются на
клеточ­ной плазматической мембране,
модифицированной вирусными белками,
и постепенно выпячивают ее.

Вирусная
ДНК
проникает в ядро клетки, транскрибируется
клеточной ДНК-зависимой РНК-полимеразой.
Считываетеся, а затем транслируется
часть вирусного генома (paнние гены).
В результате синтезируются ранние
белки (регуляторные и матричные белки
вирусные полимеразы).

-РНК-вирусы
проникают в клетку путём слияния
(парамиксовирусы) либо виропексиса
(рабдо- и ортомиксовирусы). Для
эффективной репродукции вирусная
-РНК должна быть преобразована в +РНК
— аналог клеточной мРНК.

2.
АНТИТЕЛА.

Особые
специфические глобулины, которые
образуются в организме под влиянием
АГ. Основным свойством АТ является
способность специфически соединяться
с АГ, который вызвал их образование,
и защищать организм от действия
инфекционных агентов. АТ либо
нейтрализуют, обезвреживают возбудителей
инфекционных заболеваний, либо делают
их чувствительными к действию других
факторов, например фагоцитов или
комплемента. Различают полные, или
преципитирующие АТ, которые при
взаимодействии с АГ дают видимые
иммунологические реакции (агглютинации,
преципитации), и неполные, непреципитирующие,
или блокирующие АТ, не дающие видимых
реакций при соединении с АГ.

По
характеру действия на микроорганизмы
АТ:

Антимикробные
АТ
могут склеивать микробы — агглютинины,
осаждать белковые молекулы или частички
микробов — преципитины, растворять
бактерии — лизины, убивать бактерии
без заметного изменения их формы —
бактерицидные АТ. АТ, усиливающие
фагоцитоз, называют опсонинами, или
бактериотропинами. Существуют также
вирус-нейтрализующие АТ и иммобилизующие
АТ, обездвиживающие спирохет.
Антитоксические
АТ
обезвреживают экзотоксины бактерий.

Антиклеточные
АТ
дифференцируют на гемагглютинины
(склеивают эритроциты), гемолизины
(растворяют эритроциты) и цитотоксины
(умертвляют клетки животных).

Аутоантитела
вырабатываются организмом против
собственных белков и клеток тканей и
органов при изменении химической
структуры последних или при освобождении
АГ из разрушившихся органов и тканей. 

Циркулирующие
АТ обнаруживают в сыворотке крови и
различных жидкостях организма с
помощью иммунологических реакций:
агглютинации, преципитации, связывания
комплемента, иммунофлюоресценции.

Механизма
образования АТ: 1. Наличие естественных
АТ в организме является генетически
обусловленным, без всякого антигенного
раздражения. 2. Нормальные АТ являются
обычными иммунными АТ, образовавшимися
в ответ на попадание незначительных
доз микроорганизма, которые не в
состоянии были вызвать заболевание.
3. Выработка нормальных АТ происходит
в ответ на имеющиеся общие групповые
АГ пищи и микроорганизма.

Химическая
природа АТ. АТ связаны с глобулиновой
фракцией сывороточных белков. В
альбуминах их нет. Нормальные глобулины
сыворотки по степени подвижности в
геле при прохождении электрического
тока делятся на три фракции: а, в, у. АТ
в значительной части связаны с
у-глобулиновой фракцией, которая
увеличивается при заболевании или
иммунизации. При отсутствии у человека
у-глобулинов (агаммаглобулинемия) АТ
не вырабатываются. Активность АТ
выявляется также в а- и в-глобулиновых
фракциях. В настоящее время иммуноглобулины
делят на 5 классов: М, G, А, Е, D, отличающихся
между собой по химической структуре
и биологической функции.

IgG
— самый активный и наиболее важный в
развитии иммунитета при заболевании.
Он имеет молекулярную массу 160 000,
скорость осаждения 7S и содержит до 3%
углеводов. В начале заболевания IgG
мало, но по мере его развития количество
их значительно увеличивается и они
выполняют основную защитную функцию.

IgM
— макроглобулинами — первыми появляются
при развитии плода и после начала
заболевания. Молекулярная масса их
900 000. Они содержат до 10% углеводов,
имеют скорость осаждения 19S. Естественные,
или нормальные АТ являются
макроглобулинами.

IgA
— важны в защите слизистых оболочек
дыхательного и пищеварительного
трактов от проникновения микробов.
Они вырабатываются в плазматических
клетках, расположенных преимущественно
в подслизистом слое этих органов. IgA
легко прикрепляются к клеткам и
выделяются на поверхность слизистых
оболочек.

IgE
— реагиновые АТ. Реагины являются
причиной возникновения многих
аллергических заболеваний, в том числе
сенной лихорадки и астмы.

Динамика
образования АТ. Количество и длительность
сохранения АТ в организме зависят от
дозы, кратности и способа введения
АГ. При первичном попадании АГ в
организм различают две фазы: индуктивную
— от момента введения АГ до появления
антителообразующих клеток, и
продуктивную, которая наступает к
концу 1х суток и характеризуется
появлением АТ. Количество АТ быстро
нарастает к 4му дню и достигает
максимального уровня в крови на 7-8й
день. Это количество обычно сохраняется
в течение 10-15 дней, а затем, к 2-3 мес,
уменьшается.

При
повторном введении в организм того
же АГ индуктивная фаза бывает короче,
а продукция АТ — интенсивнее.

3.
АНАЭРОБНАЯ ИНФЕКЦИЯ.

Анаэробы
поражают любые органы и ткани. Облигатные
анаэробы: 1. Бактерии, образующие споры
(клостридии) — вызывают клостридиозы;
2. Неспорообразующие (неклостридиальные
анаэробы) — вызывают гнойное воспаление.
Условно-патогенные микробы.

Газовая
гангрена.
Бы­стро наступающий некро­з
мышечной ткани, тяжелая интоксикация
и отсутствие выраженных воспа­лительных
явлений.

Таксономия:
Возбудитель — род Clostridium,
отдел Firmicutes.
Представители — C.perfringens,
C.novii,
C.ramosum,
C.septicum.

Морфологические
и культуральные свойства:
Палочковидные, грам+, образующие споры.
В пораженных тканях формируют капсулы,
облада­ющие антифагоцитарной
активностью, в окру­жающей среде
образуют споры.

Биохимические
свойства:
Вы­сокая ферментативная активность,
расщепляют углеводы с образованием
кислоты и газа; гистолитическая
ак­тивность.

АГ
свойства и токсинообразование:
С. perfringens
6 сероваров: А, F
(человек), В, С, D,
Е (животные). С. novii
4 серовара: А, В, С, D.
Некоторые токсины обладают свойствами
ферментов.

Факторы
патогенности:
Экзотоксин (специфичный для каждого
вида) — а-токсин (лецитиназа); гемолизин,
коллагеназа, гиалуронидаза, ДНКаза.

Резистентность:
Чувствительны к кислороду, солнечному
свету, высокой температуре, дезинфектантам.

Эпидемиология:
При тяжелых травмах и несвоевременной
хирургичес­кой обработке ран.

Патогенез:
Образуемые токсины и ферменты приводят
к повреждению здоровых тканей и
интоксикации организма; а-токсин,
лецитиназа, расщепляет лецитин —
компонент клеточных мембран. Выделяемые
гиалуронидаза и коллагеназа увеличивают
проницаемость тканей.

Клиника:
Инкубационный период 1-3 дня. Отеки, с
газо­образованием в ране, выраженной
интоксикацией организма.

Иммунитет:
Нет имму­нитета. Защите от токсина
принадлежит анти­токсинам.

Микробиологическая
диагностика.
Материал — кусочки пораженных тканей,
раневое отделяемое. Диагноз подтверждается
при обнаружении грам+ палочек в
материале в отсутствии лейкоцитов.
Бактериологическое исследование —
обнаружение С.perfringens
в факалиях — пищевая токсикоинфекция.

Лечение:
Удаление
некротических тканей. Вводят
антитоксические сыворотки, применяют
антибиотики и гипербарическую
оксигенацию.

Антитоксические
сыворотки —
в жидком и сухом виде после очистки
методом ферментативного гидролиза
анатоксических сывороток, полученных
при иммунизации лошадей анатоксинами.
Применяют для экстренной профилактики
и специфич. терапии.

Профилактика:
Хирур­гическая обработка ран,
соблюдение асептики и антисептики
при операциях. Для специфической
активной иммунизации применяют
анатоксин в составе секстанатоксина
, создающий приобретенный, искусственный,
активный, антитоксический иммунитет.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б22

1.
РОСТ И РАЗМНОЖЕНИЕ БАКТЕРИЙ.

Бактерии
размножаются путем бинарного деления
пополам, реже путем почкования.
Актиномицеты, являясь ветвящимися
бактериями, размножаются путем
фрагментации нитевидных клеток. Грам+
бактерии делятся путем врастания
синтезирующихся перегородок деления
внутрь клетки, а грам- — путем перетяжки,
в результате образования гантелевидных
фигур, из которых образуются две
одинаковые клетки.

Делению
клеток предшествует репликация
бактериальной хромосомы по
полуконсервативному типу (двуспиральная
цепь ДНК раскрывается и каждая нить
достраивается комплементарной нитью),
приводящая к удвоению молекул ДНК
бактериального ядра — нуклеоида.

Репликация
ДНК:
инициация, элонгация (рост цепи),
терминация.

Рост
бактерий на жидкой питательной среде:

Лаг-фаза
— период между посевом бактерий и
началом размножения. Продолжительность
4-5 ч. Бактерии увеличиваются в размерах
и готовятся к делению; нарастает
количество нуклеиновых кислот, белка.

Фаза
логарифмического (экспоненциального)
роста — период интенсивного деления
бактерий. Продолжительность 5-6 ч.
Бактерии ранимы, что объясняется
высокой чувствительностью компонентов
метаболизма интенсивно растущей
клетки к ингибиторам синтеза белка,
нуклеиновых кислот.

Фаза
стационарного роста — количество
жизнеспособных клеток остается без
изменений, составляя максимальный
уровень (М-концентрация).

Фаза
гибели — отмирание бактерий в условиях
истощения источников питат среды и
накопление в ней продуктов метаболизма
бактерий. Продолжительность от 10 ч до
недели. Интенсивность роста и размножения
бактерий зависит от многих факторов,
в том числе оптимального состава
питательной среды, окислительно-восстановительного
потенциала, рН, t.

Размножение
бактерий на плотной питательной среде:
Образуют изолированные колонии
округлой формы с ровными или неровными
краями (S- и R-формы), различной консистенции
и цвета, зависящего от пигмента
бактерий.

Пигменты,
растворимые в воде, диффундируют в
питательную среду и окрашивают её.
Другая группа пигментов нерастворима
в воде, но растворима в органических
растворителях. Пигменты, не растворимые
ни в воде, ни в органических соединениях.

Пигменты
—
каротины, ксантофиллы, меланины.
Меланины — нерастворимые пигменты
черного, коричневого, красного цвета,
синтезирующиеся из фенольных соединений.
Меланины наряду с каталазой,
супероксидцисмутазой и пероксидазами
защищают микроорганизмы от воздействия
токсичных перекисных радикалов
кислорода.

2.
РОЛЬ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ В ИНФЕКЦИОННОМ
ПРОЦЕССЕ.

Карантинная
(конвенционная) болезнь — болезнь,
система информации и меры профилактики
которой обусловлены международными
соглашениями (чума, холера, желтая
лихорадка, натуральная оспа;
вирусные
геморрагические лихорадки Ласса,
Эбола; малярия, энцефалиты).

Контроль
за международным распространением
инфекционных болезней — система
глобального эпидемиологического
надзора, направленная на выявление и
уменьшение размеров пораженных
болезнью территорий, на совершенствование
противоэпидемических мероприятий,
снижающих риск распространения
заболевания в случае его завоза из
вне.

Контроль
возду­ха
проводится с помощью методов
естест­венного или принудительного
оседания микробов. Естественное
оседание
(по методу Коха) проводится в течение
5-10 мин путем осаждения микробов на
поверхность твердой питательной среды
в чашке Петри. Принудительное
оседание
микробов осуществляется путем посева
проб воздуха на питательные среды с
помощью специаль­ных приборов:
Импактор
—
при­нудительное осаждение микробов
из воздуха на поверхность питательной
среды (прибор Кротова); Импшджер
—
воздух проходит через жидкую питательную
среду или изотоничес­кий раствор
NaCl.

Санитарно-гигиеническое
состояние воз­духа:

1.
Общее количество микроорганизмов в
1 м³
воздуха
— коли­чество колоний микроорганизмов,
выросших при посеве воздуха на
питательном агаре в чашке Петри в
течение 24 ч при 37С, выра­женное в
колониеобразующих еденицах;

2.
Индекс санитарно-показательных
микро­бов — количество
золотистого стафилококка и гемолитических
стрептококков в 1 м³
воздуха. Эти бактерии представители
мик­рофлоры верхних дыхательных
путей. Появление в воздухе спорообразующих
бактерий — показатель загрязненности
воздуха микроорганизмами почвы, а
появление грам- бактерий — показатель
антисанитарного состояния.

3.
СИБИРСКАЯ ЯЗВА —

Острая
антропонозная инфекционная болезнь.
Возбудитель Bacillus anthracis. Характеризуется
тяжелой интоксикацией, поражением
кожи, лимфатических узлов.

Таксономия:
Отдел Firmicutes род Bacillus.

Морфология:
Крупные грам+ палочки с обрубленными
концами, в мазке из чистой культуры
располагаются короткими цепочками
(стрептобациллы). Неподвижны. Образуют
расположенные центрально споры,
капсулу.

Культуральные
свойства:
Аэробы. Хорошо растут на простых
питательных средах, t
оптимум роста 35С. На жидких средах
дают придонный рост; на плотных средах
образуют крупные, с неровными краями,
шероховатые матовые колонии (R-форма).
На средах, содержащих пенициллин,
через 3ч роста образуют сферопласты,
расположенные цепочкой (жемчужное
ожерелье).

Биохимические
свойства:
Ферментируют до кислоты глк, сахарозу,
мальтозу, крахмал, инулин; обладают
протеолитической и липолитической
активностью. Выделяют желатиназу,
обладают слабой гемолитической,
лецитиназной, фосфатазной активностью.

АГ
и факторы патогенности:
Родовой соматический полисахаридный
и видовой белковый капсульный АГ.
Образуют белковый экзотоксин, обладающий
АГ свойствами и состоящий из нескольких
компонентов (летальный, протективный,
вызывающий отеки). Вирулентные штаммы
в восприимчивом организме синтезируют
сложный экзотоксин и большое количество
капсульного вещества с выраженной
антифагоцитарной активностью.

Резистентность:
Вегетативная форма неустойчива к
факторам окружающей среды, споры
чрезвычайно устойчивы и сохраняются
в окружающей среде, выдерживают
кипячение. Чувствительны к пенициллину
и другим антибиотикам; споры устойчивы
к антисептикам.

Эпидемиология
и патогенез:
Источник — КРС, овцы, свиньи. Пути —
контактный, алиментарно. Входные
ворота — поврежденная кожа, слизистые
оболочки дыхательных путей и ЖКТ.
Экзотоксин вызывает коагуляцию белков,
отек тканей, приводит к развитию
токсико-инфекционного шока.

Клиника:
При кожной (локализованной) форме на
месте внедрения возбудителя появляется
характерный сибиреязвенный карбункул,
сопровождается отеком. Легочная и
кишечная (генерализованные) формы
выражаются геморрагическим и
некротическим поражением соответствующих
органов.

Иммунитет:
Стойкий клеточно-гуморальный иммунитет.

Диагностика:
Используются реакции термопреципитации
по Асколи и кожно-аллергическая проба.
Бактериоскопическое —
изучение окрашенных по Граму мазков
из патологического материала позволяет
обнаружить возбудителя, представляющего
грам+ крупную неподвижную стрептобациллу.
Бактериологическое
— материал засевают на чашки с питательным
и кровяным агаром, и в пробирку с
питательным бульоном. Посевы инкубируют
при 37С в течение 18ч. В бульоне В.anthracis
растет в виде хлопьевидного осадка;
на агаре вирулентные штаммы образуют
колонии R-формы. Авирулентные или
слабовирулентные бактерии образуют
S-формы колоний.

Биопроба
— материал вводят подкожно морским
свинкам кроликам. Готовят мазки из
крови и внутренних органов, делают
посевы для выделения чистой культуры
возбудителя.

Реакция
Асколи
— материал измельчают и кипятят в
пробирке с изотоническим раствором
хлорида натрия в течение 10 мин, после
чего фильтруют до полной прозрачности.

РИФ
позволяет выявить капсульные формы
В. anthracis в экссудате. Мазки из экссудата
через 5-18 ч после заражения животного
обрабатывают капсульной сибиреязвенной
антисывороткой, а затем флюоресцирующей
антикроличьей сывороткой. В препаратах,
содержащих капсульные бациллы,
наблюдается желто-зеленое свечение
возбудителя.

Кожно-аллергическая
проба
— ставится на внутренней поверхности
предплечья — внутрикожно вводят 0,1 мл
антраксина. При положительной реакции
через 24 ч появляются гиперемия и
инфильтрат.

Лечение:
Антибиотики, сибиреязвенный Ig,
пенициллин.

Профилактика:
Преципитирующая сибиреязвенная
сыворотка. Получена из крови кролика,
гипериммунизированного культурой
В.anthracis. Применяется для постановки
реакции термопреципитации по Асколи.

Сибиреязвенная
живая вакцина СТИ. Высушенную взвесь
живых спор В.anthracis авирулентного
бескапсульного штамма. Применяется
для профилактики сибирской язвы.

Противосибиреязвенный
Ig.
Гамма-глобулиновая фракция сыворотки
крови лошади, гипериммунизированной
живой сибиреязвенной вакциной и
вирулентным штаммом В.anthracis, используется
с профилактической и лечебной целью.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б25

1.
ХИМИОТЕРАПИЯ.

Специфическое
антимикробное, антипаразитар­ное
лечение при помощи хим веществ. Свойства
этих веществ — избирательность действия
против болезнетворных микроорганизмов
в условиях макроорганизма.

Основоположник
химиотерапии — Эрлих, установил, что
хим вещества, содержащие мышьяк,
губительно действу­ют на спирохеты
и трипаносомы, и получил первый
химиотерапевтический препарат —
сальварсан (соединение мы­шьяка,
убивающее возбудителя, но безвредное
для микроорга­низма).

Домагк
обнаружил среди анилиновых красителей
вещество — пронтозил, спасавший
экспериментальных животных от
стрепто­кокковой инфекции, но не
действующий на эти бактерии вне
организма. В организме происхо­дит
распад пронтозила с образованием
сульфаниламида, обла­дающего
антибактериальной активностью.

Вудс
установил, что суль­фаниламиды
являются структурными аналогами
парааминобензойной кислоты (ПАБК),
участвующей в биосинтезе фолиевой
кислоты, необходимой для жизнедеятельности
бактерий. Бакте­рии, используя
сульфаниламид вместо ПАБК, погибают.

Противовирусные
препараты.

Вирулоцидные
препараты, действующие на внеклеточные
вирионы: Оксолин действующий на
риновирусы, герпесвирусы, миксовирусы;
тетрофеин действующий на аденовирусы,
герпесвирусы.

Препараты,
блокирующие адсорбцию вируса на
рецепторах клетки хозяина: На этой
стадии используют фальшивые рецепторы
— структурные аналоги вирусных
рецепторов, которые адсорбируясь на
рецепторах (лигандах) клеток, препятствуют
адсорбции вируса. Аналог рецептору
CD4, на котором адсорбируется ВИЧ.

Препараты,
нарушающие процесс раздевания вирусов:
Ремантадин, активный против вируса
гриппа А.

Препараты,
ингибирующие стадию сборки вирионов:
Производные тиосемикарбазона. Метисазон
(марборан) ингибитор вируса оспы.

Препараты
— ингибиторы репликации — аналоги
азотистых оснований, которые, встраиваясь
в молекулу ДНК или РНК, блокируют
работу полимераз: Видарабин — действует
на ДНК-зависимую ДНК-полимеразу вируса
герпеса. Препарат токсичен, используется
только при тяжелых формах заболеваний.
Ациклавир имеет тот же механизм
действия. Наиболее широко используется
при инфекциях, вызванных вирусом
герпеса Эпштейна-Барр и герпесвирусами
6 и 7 типов.

Азидотимидин
— аналог тимина, действует на обратную
транскриптазу ретровирусов, в частности
ВИЧ. Дидезоксицитадин — аналог
азидотимидина. Оба препарата токсичны.
К ингибиторам репликации относятся
также аналоги фосфоновой кислоты,
которые, необратимо связываясь с
пирофосфатом, блокируют функцию
ДНК-полимеразы.

2.
КЛЕТКИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ.

Лимфоциты.
В организме лимфоциты постоянно
рециркулируют между зонами скопления
лимфоидной ткани. Расположение
лимфоцитов в лимфоидных органах и их
миграция по кровеносному и лимфатическому
руслу строго упорядочены и связаны с
функциями различных субпопуляций.

По
наличию поверхностных CD маркеров
лимфоциты разделяют на функционально
различные популяции и субпопуляции,
прежде всего на Т- (тимусзависимые,
прошедшие первичную дифференцировку
в тимусе) лимфоциты и В — лимфоциты.

Т-
лимфоциты. распознают процессированный
и представленный на поверхности
антиген представляющих клеток АГ.
Отвечают за клеточный иммунитет,
иммунные реакции клеточного типа.
Отдельные субпопуляции помогают В-
лимфоцитам реагировать на Т- зависимые
антигены выработкой антител.

Т-
лимфоциты- Помощники (активаторы):1.
Т- хелперы1 несут рецепторы CD4 (как и
Т- хелперы2) и CD44, отвечают за созревание
Т- цитотоксических лимфоцитов (Т-
киллеров), активируют Т- хелперы2 и
цитотоксическую функцию макрофагов,
секретируют ИЛ-2, ИЛ-3 и другие цитокины.

2.
Т- хелперы2 имеют общий для хелперов
CD4 и специфический CD28 рецепторы,
обеспечивают пролиферацию и
дифференцировку В- лимфоцитов в
антителпродуцирующие (плазматические)
клетки, синтез антител, тормозят
функцию Т- хелперов1, секретируют ИЛ-4,
ИЛ-5 и ИЛ-6.

3.
Индукторы Т- хелперов несут CD29, отвечают
за экспрессию антигенов HLA класса 2 на
макрофагах и других А- клетках.

4.
Индукторы Т- супрессоров несут CD45
специфический рецептор, отвечают за
секрецию ИЛ-1 макрофагами, активацию
дифференцировки предшественников Т-
супрессоров.

Вторая
группа- Т- эффекторы:

5.
Т- цитотоксические лимфоциты (Т-
киллеры). Имеют специфический рецептор
CD8, лизируют клетки- мишени, несущие
чужеродные антигены или измененные
аутоантигены (трансплантант, опухоль,
вирус и др.). ЦТЛ распознают чужеродный
эпитоп вирусного или опухолевого
антигена в комплексе с молекулой
класса 1 HLA в плазматической мембране
клетки- мишени.

Третья
группа- Т-клетки- регуляторы:

6.
Т- супрессоры имеют важное значение
в регуляции иммунитета, обеспечивая
подавление функций Т- хелперов 1 и 2,
В- лимфоцитов. Имеют рецепторы CD11, CD8.
Их активация происходит в результате
непосредственной стимуляции антигеном
без существенного участия главной
системы гистосовместимости.

7.
Т- контсупрессоры. Имеют рецептор к
особому лейкину. Способствуют подавлению
функций Т- супрессоров, вырабатывают
резистентность Т- хелперов к эффекту
Т- супрессоров.

В-
лимфоциты. Функция
В-
клеток- эффекторное участие в гуморальных
иммунных реакциях, дифференциация в
результате антигенной стимуляции в
плазматические клетки, продуцирующие
антитела.

Образование
В- клеток у плода происходит в печени,
в дальнейшем- в костном мозге. Процесс
созревания В- клеток осуществляется
в две стадии:Антиген -независимая
фаза. В- лимфоцит в процессе созревания
проходит стадию пре- В- лимфоцита-
активно пролиферирующей клетки.
Следующая стадия- незрелый В- лимфоцит
характеризуется появлением рецепторного
IgM на поверхности. Конечная стадия —
образование зрелого В- лимфоцита,
который может иметь два мембранных
рецептора с одинаковой антигенной
специфичностью — IgM и IgD.

Активация
В- лимфоцитов может осуществляться:-
Т- зависимым антигеном при участии
белков МНС класса 2 Т- хелпера;- Т-
независимым антигеном, имеющим в
составе митогенные компоненты;

—
поликлональным активатором (ЛПС);-
анти- мю иммуноглобулинами;- Т-
независимым антигеном, не имеющим
митогенного компонента.

Кооперация
клеток в иммунном ответе:
1. Поглощение и процессинг антигена
макрофагом.2. Представление
процессированного антигена макрофагом
с помощью белка главной системы
гистосовместимости класса 2 Т-
хелперам.3. Узнавание антигена Т-
хелперами и их активация.4. Узнавание
антигена и активация В- лимфоцитов.5.
Дифференциация В- лимфоцитов в
плазматические клетки, синтез антител.6.
Взаимодействие антител с антигеном,
активация систем комплемента и
макрофагов, интерферонов.7. Представление
при участии белков МНС класса 1
чужеродных антигенов Т- киллерам,
разрушение инфицированных чужеродными
антигенами клеток Т- киллерами.8.
Индукция Т- и В- клеток иммунной памяти,
способных специфически распознавать
антиген и участвовать во вторичном
иммунном ответе ( антигенстимулированные
лимфоциты).

Клетки
иммунной памяти. Поддержание долгоживущих
и метаболически малоактивных клеток
памяти, рециркулирующих в организме,
является основой длительного сохранения
приобретенного иммунитета. Состояние
иммунной памяти обусловлено не только
длительностью жизни Т- и В- клеток
памяти, но и их антигенной стимуляцией.
Длительное сохранение антигенов в
организме обеспечивается дендритными
клетками (депо антигенов), сохраняющими
их на своей поверхности.

Дендритные
клетки — популяции отросчатых клеток
лимфоидной ткани костномозгового
(моноцитарного) генеза, представляющая
антигенные пептиды Т- лимфоцитам и
сохраняющая антигены на своей
поверхности. К ним относятся фолликулярные
отросчатые клетки лимфоузлов и
селезенки, клетки Лангерханса кожи и
дыхательных путей, М- клетки лимфатических
фолликулов пищеварительного тракта,
дендритные эпителиальные клетки
тимуса.

3.
ЛЕГИОНЕЛЫ —

Возбудитель
Legionella pneumophila. Характеризуются поражением
респираторного тракта, развитием
тяжелых пневмоний и сопровождающихеся
нарушениями со стороны ЦНС и почек.

Морфологическия:
семейство Legionellaceae род Legionella. Грам-
палочки. Спор не образуют. Наличие
внутренней и внешней мембран;
полисахаридной капсулы нет; имеют
внутриклеточные жировые вакуоли,
множество рибосом. Нуклеоид диффузно
распределен в цитоплазме. Геномная
ДНК. Аэробы.

Культуральные
свойства:
Требовательны к условиям культивирования.
Растут при определенном наборе
аминокислот, ростовых факторов, рН
среды и температуры на искусственных
питательных средах. Являются
факультативными внутриклеточными
паразитами, поэтому растут в желточном
мешке куриных эмбрионов, в культуре
клеток животных. На плотной среде
образуют характерные колонии с
коричневым пигментом.

Ферментативная
активность:
сложная система: набор протеолитических
ферментов, эстераз, гликолитических
ферментов.

АГ
структура:
Типо- и группоспецифические АГ. По
антигенам выделяют не менее 8 серогрупп.

Факторами
патогенности
являются термостабильный
белково-полисахаридный эндотоксин,
проявляющийся гемолитической
активностью, и цитолизин, обладающий
цитотоксическим, а также протеолитическим
действием.

Резистентность:
устойчивы к действию физических и
химических факторов. Чувствительны
к антибиотикам (рифампицин, эритромицин).

Патогенез
и клиника.
Входные ворота инфекции — дыхательные
пути. Возбудитель вызывает пневмонию.
При гибели бактерий высвобождается
эндотоксин, который вызывает
интоксикацию, обуславливает системное
поражение с дыхательной и почечной
недостаточностью.

Выделяют
три клинические формы: 1) болезнь
легионеров, протекающую с тяжелой
пневмонией; 2) лихорадка Понтиак —
респираторное заболевание без
пневмонии; 3) лихорадка Форт-Брагг —
острое лихорадочное заболевание с
экзантемой.

Эпидемиология:
обитают в водоемах, системах
водоснабжения.

Иммунитет:
выраженный клеточный характер,
штаммоспецифичен.

Микробиологическая
диагностика:
микробиологические и серологические
исследования: обнаружение на 2е сутки
антигенов в крови и в моче (в ИФА, РИА
с помошью моноклональных антител),
обнаружение через 1-3 недели антител
в крови (ИФА). Применяют генодиагностику
(ПЦР), а также выявление возбудителя
в мокроте, слизи, биоптатах.

Лечение:
Антибиотики: (эритромицин +
рифампицин).Фторхинолоны.

Профилактика.
Специфической нет. Неспецифическая
– сан.-гиг. профилактика.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б28

1.
БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОКИСЛЕНИЕ.

Дыхание
микроорганизмов — биологический
процесс переноса электронов через
дыхательную цепь от доноров к акцепторам
с образованием АТФ. В зависимости от
конечного
акцептора электронов
дыхание — аэробное — молекулярный
кислород (О2), анаэробное — связанный
кислород (NO3,
SO4,
SO3).

Микроорганизмы
по типу дыхания:

1.
Облигатные (строгие) аэробы — необходим
молекулярный О2 для дыхания.

2.
Микроаэрофилы нуждаются в уменьшенной
концентрации (низком парциальном
давлении) свободного О2. Для создания
этих условий в газовую смесь для
культивирования добавляют CO2
(до 10% концентрации).

3.
Факультативные анаэробы — потребляют
глк и размножаются в аэробных и
анаэробных условиях. Среди них
микроорганизмы, толерантные к высоким
концентрациям молекулярного О2
(аэротолерантные), и микроорганизмы
которые способны в определенных
условиях переключаться с анаэробного
на аэробное дыхание.

4.
Строгие анаэробы — размножаются при
низких концентрациях молекулярного
О2, который в больших концентрациях
для них губителен. Биохимически
анаэробное дыхание протекает по типу
бродильных процессов, молекулярный
О2 при этом не используется.

Аэробное
дыхание энергетически более эффективно
(синтезируется большее количество
АТФ).

В
процессе аэробного дыхания образуются
токсические продукты окисления
(перекись водорода, свободные О2
радикалы), от которых защищают
специфические ферменты, прежде всего
каталаза, пероксидаза, пероксиддисмутаза.
У анаэробов эти ферменты отсутствуют,
также как и система регуляции
окислительно-восстановительного
потенциала (rH2).

2.
ИНФЕКЦИЯ —

Совокупность
всех биологических явлений и процессов,
возникающих в организме при внедрении
и размножении в нем микроорганизмов.

Инфекционный
процесс — взаимоотношения между макро-
и микроорганизмами в виде адаптационных
и патологических процессов в организме.

Инфекционная
болезнь
—
выраженная форма инфекционного
процесса.

Симбиоз
(сожительство) — взаимоотношения микро-
и макроорганизмов.

Формы
симбиоза:

Мутуализм
—
взаимовыгодные
отношения (нормальная микрофлора).

Комменсализм
—
выгоду извлекает один партнер (микроб),
не причиняя вреда другому. При любом
типе взаимоотношений микроорганизм
может проявить свои патогенные свойства
(условно-патогенные микробы — комменсалы
в иммунодефицитном хозяине).

Паразитизм
— микроорганизм питается за счет
хозяина, т.е. извлекает выгоду, нанося
вред хозяину. В процессе перехода от
свободноживущего к паразитическому
типу жизнедеятельности микроорганизмы
теряют ряд ферментных систем, необходимых
для существования во внешней среде,
но приобретают ряд свойств, обеспечивающих
возможность паразитизма.

Этапы
инфекционного процесса:

1.
Адгезия — прикрепление микроорганизма
к соответствующим клеткам хозяина.

2.
Колонизация — закрепление микроорганизмов
в соответствующем участке.

3.
Размножение — увеличение количества,
мультипликация.

4.
Пенетрация — проникновение в нижележащие
слои и распространение инфекта.

5.
Повреждение клеток и тканей (связано
с размножением, пенетрацией и
распространением инфекта).

Инфекционный
процесс:

По
длительности:

Острая
циклическая
инфекция заканчивается удалением
возбудителя или смертью больного. При
хронической
инфекции
возбудитель сохраняется в организме
(персистенция). Механизмы для
персистенции: Внутриклеточная
локализация (укрываются в клетке);
переход в не имеющие клеточной стенки
L—
формы; АГ мимикрия (совпадение по
химическому составу АГ детерминант
микроба и клеток хозяина ); укрытие в
локальных очагах и забарьерных органах
(головной мозг). Факторы персистенции
для вирусов: Интеграция генома вируса
с хромосомой клетки-мишени; недоступность
действию АТ; наличие дефектных вирусных
частиц; слабая индукция иммунного
ответа. Персистенция
в организме и периодическая смена
хозяина
— механизмы поддержания микробных
популяций.

По
степени распространения:

Локальный
—
возбудитель сосредоточен в определенном
очаге, не выходя за его пределы, что
сдерживает механизмы защиты. Если
микроорганизм способен распространяться
по организму, возникает генерализованный
процесс.
Пути распространения — лимфогенный
(по лимфатической системе) и гематогенный
(по кровяным сосудам).

По
выраженности:

Манифестный
(ярко выраженный) — инфекционная болезнь
— типичная, атипичная, хроническая.
Инаппарантный
(бессимптомный)
— характерен для латентной инфекции.
Размножение возбудителя в организме
не сопровождается клиническими
проявлениями, а только иммунными
реакциями.

Инфекционные
заболевания отличаются от соматических:
Наличием возбудителя, заразностью,
цикличностью течения.

3.
CAMPYLOBACTER
и HELICOBACTER.

Грам-
микроаэрофилы, мелкие, подвижные, не
образующие спор, изогнутые (S- образные)
палочковидные бактерии. Виды,
составляющие род Helicobacter, в том числе
H.pylori — возбудитель язвенной болезни,
выделены из рода Campylobacter.

Род
Campylobacter
— включает 13 видов спиральных бактерий,
имеющих один и более завитков. Подвижные,
обладают полярными жгутиками и
винтообразным движением. Не ферментируют
и не окисляют углеводы, капрофилы и
микроаэрофилы (требуют повышенной
концентрации СО2 и пониженной О2).

Кампилобактериозы
— острые кишечные заболевания,
протекающие с поражением желудочно-кишечного
тракта. Кампилобактеры выделяют из
кишечника, ротовой полости и органов
мочеполовой системы.

Группа
C.jejuni (C.coli, C.lari) — термофильные
кампилобактерии, отличаются высокой
температурой для роста (42С).

Мезофильные
кампилобактерии (37С) — C.fetus (артриты,
менингиты, васкулиты, аборты);
условно-патогенные — C.concisus и C.sputorum — в
ротовой полости, C.fennelliae, C.cinaedi и
C.hyointestinalis — в толстом кишечнике.

Культуральные
свойства:
Нужны специальные газовые смеси для
создания микроаэрофильных условий,
рН — 7,0-7,2, мезофильные условия (42С — для
термофилов, 37С — для остальных).
Используют питательные среды (мясные,
печеночные, кровяные) с добавлением
селективных антибиотиков. Для получения
чистых проб для посевов (исследуют
копрофильтраты) используют фильтрацию
через мембранные фильтры с диаметром
пор 0,65 мкм. На плотных средах образуют
мелкие колонии — расползающиеся с
неровными краями или блестящие выпуклые
с ровными краями.

Биохимические
свойства:
Инертны к углеводам, редуцируют
нитраты, оксидаза-положительны, энергию
получают за счет аминокислот и
трикарбоновых кислот. Дифференциация
видов по биохимическим свойствам
основана на гидролизе гиппурата
(C.jejuni и C.coli), чувствительности к
налидиксовой кислоте (C.jejuni и C.lari),
образовании сероводорода.

АГ
структура:
Имеют О-, Н- и К-АГ. Основное значение
для серотипирования имеют термостабильные
О-АГ.

Эпидемиология:
Путь передачи — пищевой. Характерна
летняя сезонность.

Патогенетические
факторы:
Характеризуются высокой адгезивной
и инвазивной активностью, быстрой
колонизацией верхних отделов тонкого
кишечника. Факторы адгезии — жгутики
и специфические поверхностные адгезины.
Имеется эндотоксин, термолабильный
энтеротоксин.

Клинические
проявления:
Энтероколит.

Лабораторная
диагностика.
Микроскопический метод — окраска 1%
водным раствором основного фуксина
10-20 секунд — выявляют S-образные короткие
цепочки, крылья чайки. Основной метод
— бактериологический — посев испражнений.
Культуры идентифицируют по совокупности
признаков.

Helicobacter
pylori.
Язвенная болезнь — заболевание,
характеризующееся язвенным дефектом
в слизистой желудка или 12персной
кишке.

Морфологические
и культуральные свойства:
Аналогичны Campylobacter. Предпочитает
шоколадный агар.

Биохимические
свойства:
Имеет уреазу, оксидаза- и
каталаза-положителен.

АГ
свойства:
Имеет О- и Н-АГ.

Патогенез
поражений:
Проникают через слой слизи (в антральной
части желудка и 12персной кишке),
прикрепляются к эпителиальным клеткам,
проникают в крипты и железы слизистой
оболочки. АГ бактерий стимулируют
миграцию нейтрофилов и вызывают острое
воспаление. Хеликобактеры локализуются
в области межклеточных ходов, что
обусловлено хемотаксисом на мочевину
и гемин (разрушение гемоглобина
эритроцитов в микроциркуляторном
русле). Под действием уреазы хеликобактеров
мочевина расщепляется до аммиака,
возникает повреждение слизистой.

Факторы
патогенности:
Факторы колонизации (адгезия,
подвижность), факторы персистенции,
факторы вызывающие заболевание.

Лабораторная
диагностика.

Инвазивные
методы выявления:

1.
Микроскопический (окраска
гематоксилином-эозином, акридиновым
оранжевым, по Граму, водным фуксином,
инпрегнация серебром; фазово-контрастная
микроскопия с определением подвижности).

2.
Определение уреазной активности.

3.
Выделение и идентификация возбудителя
на кровяном агаре, кровяном агаре с
амфотеррицином, эритрите (агар с
амфотеррицином). Культивируют 5-7 суток
при 37С в микроаэрофильных, аэробных
и анаэробных условиях. Принадлежность
определяют по морфологии микроорганизмов
и их колоний, винтообразной подвижности,
росту в микроаэрофильных условиях и
отсутствию роста в аэробных и анаэробных
условиях и при температурах 25 и 42С, по
наличию оксидазной, каталазной и
уреазной активности.

4.
Выявление АГ возбудителя в ИФА.

5.
ПЦР-диагностика — чувствительный и
специфичный тест.

Неинвазивные
методы:
Дыхательный тест, ИФА для выявления
IgG и IgA-АТ.

Лечение:
Комплексное, с применением методов
санации (эррадиации возбудителя).
Применяют коллоидный субцитрат
висмута, ампициллин, трихопол
(метронидазол).

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б31

1.
РАСПРОСТРАНЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ.
МИКРОБИОЦЕНОЗ.

Микробиоценоз
— совокупность популяций разных видов
микроорганизмов, обитающих в определенном
биотопе (в полости рта, в водоеме).

Симбиоз
— совместное существование микроорганизмов
в долгоживущих сообществах. Эктосимбиоз
— микроорганизм располагается вне
клеток хозяина; Эндосимбиоз
—
при локализации внутри клеток.

Эктосимбиотические
микробы
— E.coli, бактерии родов Bacteroides и
Bifidobacterium, Proteus vulgaris. Пример эндосимбиоза
— плазмиды, обеспечивающие, резистентность
бактерий к ЛС.

Мутуализм
— взаимовыгодные отношения. Микроорганизмы
вырабатывают бета-адреноблокаторы,
необходимые организму хозяина (витамины
группы В). При этом обитающие в
макроорганизмах эндо- и эктосимбионты
защищены от неблагоприятных условий
среды и имеют постоянный доступ к
питательным веществам.

Комменсализм
— выгоду извлекает только один партнёр
(не принося вреда другому). Комменсалы
колонизируют кожные покровы и полости
организма человека (ЖКТ), не причиняя
вреда; их совокупность — нормальная
микробная флора (естественная
микрофлора). Эктосимбиотические
комменсалы
— кишечная палочка, бифидобактерии,
стафилококки, лактобациллы. Комменсалы
принадлежат к условно-патогенной
микрофлоре и способны при определённых
обстоятельствах вызывать заболевания
макроорганизма (при внесении их в
кровоток во время медицинских
манипуляций).

Паразитизм
— извлечение выгоды с нанесением вреда
другому организму.

2.
ТОКСИНЫ, АНАТОКСИНЫ, АНТИГЕНЫ
МИКРООРГАНИЗМОВ.

Бактериальные
токсины.

Эндотоксины
— вещества, выделяемые бактериями в
среду обитания при их разрушении.
Образование токсинов контролируется
генами хромосом или плазмидами (Col, F,
R), которые включают в себя fox-транспозоны
или фаги.

Эндотоксины
— ЛПС. Относятся к структурным компонентам
внешней мембраны всех грам- бактерий.
Биологическая активность эндотоксина
определяется его гидрофобным компонентом
— липидом А.

Экзотоксины
— вещества, секретируемые микроорганизмами
в процессе их жизнедеятельности. В
зависимости от объекта воздействия
в эукариотических клетках экзотоксины
подразделяют на мембранотоксины и
токсины, влияющие на внутриклеточные
структуры.

Мембранотоксины
действующие на цитолемму, обеспечивают
повышение её проницаемости и деструкцию:

—
порообразующие неферментные вещества
(приводят к апоптозу Т-лимфоцитов);

—
соединения, вызывающие прямое
ферментативное повреждение мембран
(нейраминидаза, гиалуронидаза,
фосфолипазы, сфингомиелиназы);

—
токсины, оказывающие детергентное
воздействие на липидный слой мембран
(содержат амфифильные соединения типа
лизофосфолипидов).

Взаимодействие
экзотоксинов с клетками:
1. Связывание с рецептором; 2.
Интернализации; 3. Перемещение в
цитозоле; 4. Внутриклеточные эффекты.

Анатоксины
используют для активной иммунопрофилактики
токсинемических инфекций (дифтерии,
столбняка, ботулизма, газовой гангрены,
стафилококковых инфекций).

Цель
применения
— индукция иммунных реакций, направленных
на нейтрализацию токсинов; в результате
иммунизации синтезируются нейтрализующие
антитоксины. Источник токсинов —
промышленно культивируемые естественные
штаммы-продуценты (возбудители
дифтерии, ботулизма, столбняка).
Полученные токсины инактивируют
термической обработкой либо формалином,
в результате чего образуются анатоксины,
лишённые токсических свойств, но
сохранившие иммуногенность.

АГ
бактерий.
По расположению в бактериальной
клетке:

• Капсульный
АГ — К-АГ

• Жгутиковый
АГ — H-АГ

• Соматический
АГ — O-АГ

О-АГ
— термостабильный липополисахаридно-полипептидный
комплекс; у грам- бактерий О-АГ —
эндотоксин.

Н-АГ
— термолабильный белк флагеллин.

К-АГ
имеет полисахаридную природу. По
чувствительности к t
подразделяются на А-, В-, L-АГ. Самые
термостабильные — А-АГ, выдерживающие
кипячение 2 ч. В-АГ выдерживают
нагревание при t
60С в течение часа, а L-АГ разрушаются
при нагревании до 60С.

Для
идентификации применяют внутривидовую
или внутриродовую дифференциацию
микроорганизмов, основанную на
различиях в АГ структуре. Например,
АГ формулу одного из сероваров E.coli,
вызывающую колиэнтериты у детей
обозначают как О55:К5:Н21 (серовар,
относящийся к серогруппе О55).

АГ
вирусов.
Одни из АГ — вирусспецифический. В
состав других АГ входят компоненты
клетки хозяина (липиды, углеводы),
которые включаются в его внешнюю
оболочку. АГ простых вирионов связаны
с их нуклеокапсидами. По своему хим
составу они принадлежат к
рибонуклеопротеидам или
дезоксирибонуклеопротеидам (растворимые
соединения, обозначаются как S-АГ). У
сложноорганизованных вирионов одни
АГ компоненты связаны с нуклеокапсидами,
другие — с гликопротеидами внешней
оболочки. Простые и сложные вирионы
содержат особые поверхностные V-АГ —
гемагглютинин и фермент нейраминидазу.

3.
ЭШЕРИХИОЗ.

Энтеральные
эшерихиозы
— острые инфек­ционные болезни,
характеризующиеся пора­жением ЖКТ.
Они протекают в виде вспышек, возбудители
— диареегенные штаммы E.coli.
Парентеральные
эшерихи­озы
— болезни, вызываемые условно-патогенными
штаммами E.coli
(представителями нормальной микрофлоры
толстой киш­ки).

Таксономия:
Возбудитель — кишеч­ная палочка. Род
Escherichia,
семей­ство Enterobacteriaceae,
отдел Gracilicutes.

Морфологические
и тинкториальные свойства:
Мелкие грам- палочки с закругленными
концами. В мазках располагаются
беспорядочно, не образуют спор,
перитрихи. Штаммы имеют микрокапсулу,
пили.

Культуральные
свойства:
Факультативный анаэроб, оптим. t
роста 37С. Не
требовательна к питательным средам
и хоро­шо растет на простых средах,
давая диффузное помутнение на жидких
и образуя колонии на плотных сре­дах.
Для диагностики эшерихиозов используют
дифференциально-диагности­ческие
среды с лактозой — Эндо, Левина.

Ферментативная
ак­тивность:
Способность ферментировать лактозу.

АГ
структура:
О-АГ (соматический) имеет 170 вариантов,
К-АГ (поверхностный) — 100, Н-антиген
(жгутиковый) — 50. Строение О-АГ определяет
принадлежность к серогруппе. Штаммы,
имеющие
набор АГ — серовары.

По
АГ, токсигенным, свойствам:
1.
Условно-патоген­ные; 2. Безусловно
патогенные, диареегенные.

Факторы
патогенности:
Образует эндотоксин (энтеротропное,
нейротропное, пирогенное действие).
Диареегенные эшерихии продуцируют
эк­зотоксин вызывающий на­рушение
водно-солевого обмена. Патогенность
— возникновение геморрагии,
нефро-токсическое действие. К факторам
патогенности относятся пили и белки
наружной мембраны, способствующие
адгезии; микрокапсула, препятству­ющая
фагоцитозу.

Резистентность:
От­личается
высокой устойчивостью к действию
факторов внешней среды; чувствительна
к дезинфектантам, погибает при
кипячении.

Роль
E.coli:
Представитель
нормаль­ной микрофлоры толстой
кишки. Является антагонистом патогенных
кишечных бак­терий, гнилостных
бактерий, грибов рода Candida.
Синтез
витаминов группы В,
Е,
К.

Эпидемиология:
Источник — больные люди. Механизм
заражения — фекально-оральный, пути
передачи
— алиментарный,
контактно-бытовой.

Патогенез:
Попадает в тонкую кишку, адсорбируется
в клетках эпителия с помощью пилей и
белков наружной мембраны. Бактерии
размножаются, погибают, осво­бождая
эндотоксин, который усиливает
перистальтику кишеч­ника, вызывает
диарею, повышение t
тела. Выделяет экзотоксин — тяжелая
диарея, рвота и нарушение водно-солевого
обмена.

Клиника:
Инкубационный период 4 дн. Бо­лезнь
начинается остро, с повышения t
тела, боли в животе, понос, рвота.

Иммунитет:
Иммунитет не­прочный, непродолжительный.

Микробиологическая
диагностика.
Основной метод — бак­териологический.
Определяют
вид чистой культуры (грам- палочки,
оксидазоотрицательные, ферментирующие
глк и лактозу до кислоты и газа,
образующие индол, не образую­щие
сероводород) и принадлежность к
серогруппе, что позволяет, отличить
условно-патогенные кишечные палочки
от диареегенных. Внутривидовая
идентификация, имеющая эпидемиологичес­кое
значение, заключается в определении
серовара с помощью диагностических
адсорбированных иммунных сывороток.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б34

1.
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ВИРУСА С КЛЕТКОЙ.
РЕПРОДУКЦИЯ
ВИРУСОВ.

Типы
взаимодействия вируса с клеткой:

Продуктивный
тип
—
завершается обра­зованием нового
поколения вирионов и ги­белью
зараженных клеток (цитолитическая
форма). Некоторые вирусы выходят из
клеток, не разрушая их (нецитолитическая
форма).

Абортивный
тип
—
не завершается обра­зованием новых
вирионов, т.к. инфек­ционный процесс
в клетке прерывается на одном из
этапов.

Интегративный
тип (вирогения)
— характеризуется встраиванием вирусной
ДНК в виде провируса в хромосому клетки
и их совместным сосуществованием.

Репродукция
вирусов:

Адсорбция.
Прикрепление
вирусов к поверхности клетки.
Адсорбирует­ся на участках клет
мембраны (рецепторах). Природа клет
рецепторов — белки, углеводные
ком­поненты белков и липидов, липиды.

Проникновение
в клетку. Виропексис
или слияние вирусной оболочки с
клеточной мембраной. При виропексисе
после адсорб­ции вирусов происходят
впячивание участка кле­т мембраны
и образование внутриклеточной вакуоли,
ко­торая содержит вирусную частицу.
Вакуоль с вирусом может транспортироваться
в разные участки цитоплаз­мы или
ядро клетки.

Раздевание.
Удаление
защитных вирусных оболочек и освобождение
внутреннего ком­понента вируса,
способного вызвать инфекционный
процесс. Происходит в определенных
участках цитоплазмы или ядра клетки,
для чего клетка использует набор
специальных ферментов. В случае
проникновения вируса путем слияния
вирусной оболочки с кле­точной
мембраной процесс проникновения
вируса в клетку со­четается с первым
этапом его раздевания. Конечные
продук­ты раздевания — нуклеокапсид
или нуклеиновая кислота вируса.

Биосинтез
компонентов вируса. Проникшая
в клетку вирусная нуклеиновая кислота
несет генетическую информацию, которая
конкурирует с генетической информацией
клетки. Дезорганизует работу клеточных
систем, подавляет собственный метаболизм
клетки и заставляет ее синтезировать
новые вирус­ные белки и нуклеиновые
кислоты, идущие на построение ви­русного
потомства.

Формирование
вирусов. Синтезированные
вирусные нуклеиновые кислоты и белки
обладают способностью специфи­чески
узнавать друг друга и при достаточной
их концентра­ции самопроизвольно
соединяются в результате гидрофобных,
со­левых и водородных связей.

Выход
вирусов из клетки. Взрывной
тип
— одновременный выход большого
количества вирусов. Клетка быстро
погибает. Присущ вирусам, не имеющих
суперкапсидной оболочки. Тип
почкование
— присущ вирусам, имеющим суперкапсидную
оболочку. На заключительном этапе
сборки нук­леокапсиды сложно
устроенных вирусов фиксируются на
клеточ­ной плазматической мембране,
модифицированной вирусными белками,
и постепенно выпячивают ее.

Вирусная
ДНК
проникает в ядро клетки, транскрибируется
клеточной ДНК-зависимой РНК-полимеразой.
Считываетеся, а затем транслируется
часть вирусного генома (paнние гены).
В результате синтезируются ранние
белки (регуляторные и матричные белки
вирусные полимеразы).

-РНК-вирусы
проникают в клетку путём слияния
(парамиксовирусы) либо виропексиса
(рабдо- и ортомиксовирусы). Для
эффективной репродукции вирусная
-РНК должна быть преобразована в +РНК
— аналог клеточной мРНК.

2.
РЕАКЦИЯ
СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА (РСК) —

За­ключается
в том, что при соответствии друг другу
АГ и АТ образуют иммун­ный комплекс,
к которому через Fc-фрагмент
АТ присоединяется комплемент (С), т.е.
происходит связывание комплемента
комп­лексом АГ-АТ. Если комплекс
АГ-АТ не образуется, то комп­лемент
остается свободным.

Специфическое
взаимодействие АГ и AT
сопровождается адсорб­цией
(связыванием) комплемента. Процесс
связыва­ния комплемента не проявляется
визуально, Борде и Жангу предложили
использовать в качестве индикатора
гемолитическую систему (эритроциты
барана + гемолитическая сыворотка),
кото­рая показывает, фиксирован ли
комплемент комплексом АГ-АТ. Если АГ
и AT
соответствуют друг другу, т.е. образовался
иммунный комплекс, то комплемент
связывается этим комплексом и гемоли­за
не происходит. Если AT
не соответствует АГ, то комплекс не
образуется и комплемент, оставаясь
свободным, соединяется со второй
системой и вызывает гемолиз.

Компоненты.
РСК — слож­ная серологическая реакция.
Для проведения необходимы 5 ингредиентов:
АГ, AT
и комплемент (первая система), эритроциты
барана и гемолитическая сыворотка
(вторая система).

АГ
для РСК — культуры убитых микроорганизмов,
их лизаты, компоненты бактерий,
патологи­чески измененные и нормальные
органы, тканевые липиды, ви­русы и
вирусосодержащие материалы.

Комплемент
для РСК — свежая или сухая сыво­ротка
морской свинки.

Механизм.
1 фаза — инкубация смеси, содержащей
три компонента АГ+АТ+комплемент; 2 фаза
(индикаторная) — выявление в смеси
свободного комплемента путем добавления
к ней гемоли­тической системы,
состоящей из эритроцитов барана, и
гемолитической сыворотки, содер­жащей
АТ к ним. В 1 фазе реакции при образовании
комплекса АГ-АТ происходит связывание
им комплемента, и тогда во 2 фазе гемолиз
сенсибилизирован­ных АТ эритроцитов
не произойдет; реакция положительная.
Если АГ и АТ не соответствуют друг
другу (в иссле­дуемом образце нет
АГ или АТ), комплемент остается свободным
и во 2 фазе присоединится к комплексу
эритроцит — антиэритроцитарное АТ,
вызывая гемо­лиз; реакция отрицательная.

Применение.
РСК применяют для диагностики
инфекционных болезней (сифи­лиса —
реакция Вассермана).

3.
САЛЬМОНЕЛЛЫ.

Группа
энтеробактерий. Серотипы — возбудители
брюшного тифа, паратифов А, В, С,
сальмонеллезов. Патогенные для человека
— антропонозы (брюшной тиф, паратифы
А,В); патогенные для человека и животных
— зоонозы (сальмонеллезы). Два вида —
S.bongori и S.enteritica. Последний разделен на
подвиды choleraesuis и salamae. Подвид choleraesuis
включает 1400 сероваров сальмонелл из
2400.

Морфология:
Прямые грам- палочки размером 2-4 x 0,5
мкм. Подвижны благодаря перитрихиально
расположенным жгутикам.

Культуральные
и биохимические свойства:
Факультативные анаэробы, хорошо растут
на простых питательных средах. Оптимум
рН — 7,2-7,4, t
— 37C.
Метаболизм — окислительный и бродильный.
Ферментируют глк с образованием
кислоты и газа (серотип S.typhi
газообразования не вызывает). Не
ферментируют лактозу (на средах с этим
углеводом — безцветные колонии),
сахарозу. Оксидаза-отрицательны,
каталаза-положительны. Реакция
Фогеса-Проскауэра отрицательна.

АГ
структура:
К группе К-АГ относят Vi-АГ (вирулентности).
Благодаря более поверхностному
расположению (чем О-АГ) Vi-АГ может
препятствовать агглютинации культур
сальмонелл О-специфической сывороткой
(экранирование). Для дифференциации
сальмонелл применяют серологическую
классификацию Кауфманна-Уайта.

В
соответствии со структурой О-АГ
подразделяют на О-группы (67 серогрупп),
в каждую из которых входят серологические
типы, отличающиеся строением Н-АГ.
Принадлежность сальмонелл к определенному
серовару устанавливают при изучении
АГ структуры в соответствии со схемой
Кауфманна-Уайта. Примеры: серотип
S.paratyphi A относится к серогруппе А,
S.paratyphi В — к серогруппе В, S.paratyphi С — к
группе С, S.typhi — к серогруппе D.

Факторы
патогенности:
1.Факторы адгезии и колонизации; 2.
Способность к внутриклеточному
паразитированию, препятствовать
фагоцитозу, размножаться в клетках
лимфоидной ткани выражены у возбудителей
брюшного тифа, паратифов А, В, способствуя
хроническому носительству; 3. Эндотоксин
(ЛПС); 4. Термолабильные и термостабильные
энтеротоксины; 5. Цитотоксины; 6. Плазмиды
вирулентности и R- плазмиды; 7. Vi-АГ
ингибирует действие сывороточных и
фагоцитарных бактериоцидных факторов.

Патогенез
поражений:
Доза, вызывающая клинические проявления
— 106 -109 бактерий, меньшая доза достаточна
при иммунодефицитах, гипохлоргидрии
(ЖКТ).

Формы
сальмонеллезной инфекции:
Гастроинтестинальная;
генерализованная
(тифоподобный и септикопиемический
варианты);
бактерионосительство
(острое, хроническое, транзиторное).

Эпидемиология:
Носитель — человек (возбудители брюшного
тифа, паратифа А) и животные (остальные
серотипы). Источник — мясные и молочные
продукты, яйца, птице- и рыбопродукты.
Пути передачи — пищевой, водный,
контактный.

Лабораторная
диагностика.
Основной метод — бактериологический.
Материал — испражнения, кровь, моча,
желчь, рвотные массы, пищевые остатки.
Наибольшая частота положительных
результатов при исследовании
испражнений, для возбудителя брюшного
тифа и паратифов — крови (гемокультура).

Материал
засевают на плотные
дифференциально-диагностические
среды — высокоселективные (висмут-сульфит
агар, агар с бриллиантовым зеленым),
среднеселективные (среда Плоскирева,
слабощелочной агар), низкоселективные
(агары Эндо и Левина) и в среды обогащения.

Для
идентификации культур в РА используют
поливалентные и моновалентные О-, Н-,
Vi-антисыворотки.

Лечение:
Антибиотики (левомицетин). Необходимо
определять антибиотикорезистентность
выделенных культур.

Специфическая
профилактика
применяется в отношении брюшного
тифа. Применяют химическую сорбированную
брюшнотифозную моновакцину.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б37

1.
ФЕРМЕНТЫ БАКТЕРИЙ.

1.Оксидоредуктазы
— катализируют окислительно-восстановительные
реакции.

2.Трансферазы
— осуществляют реакции переноса групп
атомов.

3.Гидролазы
— осущесвляют гидролитическое
расщепление различных соединений.

4.Лиазы
— катализируют реакции отщепления от
субстрата хим группы негидролитическим
путем с образованием двойной связи
или присоединения химической группы
к двойным связям.

5.Лигазы
или синтетазы — обеспечивают соединение
двух молекул, сопряженное с расщеплением
пирофосфатной связи в молекуле АТФ
или аналогичного трифосфата.

6.Изомеразы
— определяют пространственное
расположение групп элементов.

Ферменты,
в соответствии с механизмами
генетического контроля: Конститутивные
(синтез происходит постоянно);
индуцибельные (синтез индуцируется
наличием субстрата); репрессибельные
(синтез подавляется избытком продукта
реакции).

Экзоферменты
выделяются во внешнюю среду, осуществляют
процессы расщепления высокомолекулярных
органических соединений. Способность
к образованию экзоферментов определяет
инвазивность бактерий — способность
проникать через слизистые,
соединительнотканные барьеры.

Пример:
Гиалуронидаза расщепляет гиалуроновую
кислоту, входящую в состав межклеточного
вещества, что повышает проницаемость
тканей (клостридии, стрептококки,
стафилококки); нейраминидаза облегчает
преодоление слоя слизи, проникновение
внутрь клеток и распространение в
межклеточном пространстве (холерный
вибрион, дифтерийная палочка, вирус
гриппа; энзимы, разлагающие антибиотики).

По
биохимическим свойствам: 1.Сахаролитические.
2.Протеолитические. 3.Аутолитические.
4.Окислительно-восстановительные.
5.Ферменты патогенности (вирулентности).

Знание
биохимических свойств позволяет
идентифицировать их по набору ферментов.
Продукты ферментирования углеводов
и белков — кислота, газ, индол, сероводород.

Основные
ферменты вирулентности
— гиалуронидаза, плазмокоагулаза,
лецитиназа, нейраминидаза, ДНК-аза.

Ферменты
микроорганизмов используется в
медицине и биологии для получения
различных веществ (аутолитические,
протеолитические), в генной инженерии
(рестриктазы, лигазы).

2.
ИНФЕКЦИЯ —

Совокупность
всех биологических явлений и процессов,
возникающих в организме при внедрении
и размножении в нем микроорганизмов.

Инфекционный
процесс — взаимоотношения между макро-
и микроорганизмами в виде адаптационных
и патологических процессов в организме.

Инфекционная
болезнь
—
выраженная форма инфекционного
процесса.

Симбиоз
(сожительство) — взаимоотношения микро-
и макроорганизмов.

Формы
симбиоза:

Мутуализм
—
взаимовыгодные
отношения (нормальная микрофлора).

Комменсализм
—
выгоду извлекает один партнер (микроб),
не причиняя вреда другому. При любом
типе взаимоотношений микроорганизм
может проявить свои патогенные свойства
(условно-патогенные микробы — комменсалы
в иммунодефицитном хозяине).

Паразитизм
— микроорганизм питается за счет
хозяина, т.е. извлекает выгоду, нанося
вред хозяину. В процессе перехода от
свободноживущего к паразитическому
типу жизнедеятельности микроорганизмы
теряют ряд ферментных систем, необходимых
для существования во внешней среде,
но приобретают ряд свойств, обеспечивающих
возможность паразитизма.

Этапы
инфекционного процесса:

1.
Адгезия — прикрепление микроорганизма
к соответствующим клеткам хозяина.

2.
Колонизация — закрепление микроорганизмов
в соответствующем участке.

3.
Размножение — увеличение количества,
мультипликация.

4.
Пенетрация — проникновение в нижележащие
слои и распространение инфекта.

5.
Повреждение клеток и тканей (связано
с размножением, пенетрацией и
распространением инфекта).

Инфекционный
процесс:

По
длительности:

Острая
циклическая
инфекция заканчивается удалением
возбудителя или смертью больного. При
хронической
инфекции
возбудитель сохраняется в организме
(персистенция). Механизмы для
персистенции: Внутриклеточная
локализация (укрываются в клетке);
переход в не имеющие клеточной стенки
L—
формы; АГ мимикрия (совпадение по
химическому составу АГ детерминант
микроба и клеток хозяина ); укрытие в
локальных очагах и забарьерных органах
(головной мозг). Факторы персистенции
для вирусов: Интеграция генома вируса
с хромосомой клетки-мишени; недоступность
действию АТ; наличие дефектных вирусных
частиц; слабая индукция иммунного
ответа. Персистенция
в организме и периодическая смена
хозяина
— механизмы поддержания микробных
популяций.

По
степени распространения:

Локальный
—
возбудитель сосредоточен в определенном
очаге, не выходя за его пределы, что
сдерживает механизмы защиты. Если
микроорганизм способен распространяться
по организму, возникает генерализованный
процесс.
Пути распространения — лимфогенный
(по лимфатической системе) и гематогенный
(по кровяным сосудам).

По
выраженности:

Манифестный
(ярко выраженный) — инфекционная болезнь
— типичная, атипичная, хроническая.
Инаппарантный
(бессимптомный)
— характерен для латентной инфекции.
Размножение возбудителя в организме
не сопровождается клиническими
проявлениями, а только иммунными
реакциями.

Инфекционные
заболевания отличаются от соматических:
Наличием возбудителя, заразностью,
цикличностью течения.

3.
ХЛАМИДИОЗ —

Возбудитель
C.trachomatis
и
C.pneumoniae
(антропонозы).
Орнитоз,
возбудитель С.psittaci
(зооантропоноз).

Таксономия:
Порядок Chlamydiales,
семейство Chlamydaceae,
род Chlamydia.
Род представлен видами С.trachomatis,
C.psittaci,C.pneumoniae.

Морфология:
Мелкие грам- бактерии, шаровидной
формы. Не образуют спор, нет жгутиков
и капсулы. Клеточная стенка: 2х слойная
мембрана. Имеют гликолипиды. По Граму
— красный цвет. Окраска — по
Романовскому-Гимзе.

Культивирование:
Можно
размножать только в живых клетках. В
желточном мешке развивающихся куриных
эмбрионов, организ­ме чувствительных
животных и в культуре кле­ток

Ферментативная
активность:
Ферментируют пировиноградную кис­лоту,
синтезируют липиды. Не способны
синтезировать высокоэнергетические
соединения.

АГ
структура:
АГ 3х типов: родоспецифический
термостабильный липополисахарид (в
клеточной стенке) -выявля­ют с помощью
РСК; видоспецифический АГ белковой
природы (в наружной мембране) —
обнаруживают с помощью РИФ;
вариантоспецифический АГ белко­вой
природы.

Факторы
патогенности:
Адгезивные
свойства на наружной мембране. Образуют
эндотоксин. У некоторых обна­ружен
белок теплового шока,
способный
вызывать аутоиммунные реакции.

Резистентность:
Высокая
к
факторам внешней среды. Устойчивы к
низким t,
высушиванию. Чувствительны к нагреванию.

Трахома
— возбудитель C.trachomatis.
Хроническое инфекционное заболевание,
характеризующееся поражением
конъюнктивы и роговицы глаз,
мочеполовой
системы, респираторного тракта.
Антропоноз. Путь — контактно-бытовой.

Патогенез:
Проникает в эпителий конъюнктивы и
роговицы, где размножается, разрушая
клетки. Развивается фолликулярный
кератоконъюнктивит.

Диагностика:
Исследование соскоба с конъюнкти­вы.
В пораженных клетках при окраске по
Романовскому-Гимзе обнаруживают
цитоплазматические включения
фиолетового цвета, расположенные
около ядра (тельца Провачека). Для
выявления специфического хламидийного
АГ в пораженных клетках применяют РИФ
и ИФА.

Лечение:
Антибиотики (тетра­циклин) и
иммуностимуляторы (интерферон).

Профилактика:
Неспецифическая.

Урогенитальный
хламидиоз
—
острое/хро­ническое инфекционное
заболевание, характеризуется поражением
мочеполового тракта.

Заражение
происходит через слизистые оболочки
половых путей. Основной механизм
зараже­ния — контактный, путь передачи
— по­ловой.

Иммунитет:
Клеточный, в сыворотке инфицированных
— специфические АТ. После перенесенного
заболевания — не формируется.

Диагностика:
Биологический метод, основанный на
заражении ис­следуемым материалом
(соскобы эпителия из уретры, влагалища)
культуры клеток.

Постановка
РИФ, ИФА позволяют обнаружить АГ
хламидии в исследуемом материале.
Серологический метод — для обнаружения
IgM
против С.trachomatis
при
диагностике пневмонии новорожденных.

Лечение:
Антибиоти­ки
(азитромицин из группы макролидов),
иммуномодуляторы, эубиотики.

Профилактика:
Только
неспецифическая (лечение больных),
соблюдение личной гигиены.

Венерическая
лимфогранулема
—
характеризуется поражением половых
органов и регионарных лимфоузлов.
Механизм заражения — контакт­ный,
путь передачи — половой.

Иммунитет:
Стойкий, клеточный и гуморальный
иммунитет.

Диагностика:
Материал
— гной, биоптат из пораженных лимфоузлов,
сыворот­ка крови. Бактериоскопический,
биологический (культивирование в
желточном мешке куриного эмбриона),
серологический (РСК с парными сыворотками
положительна) и аллергологический
(внутрикожная проба с аллергеном
хламидии) методы.

Лечение:
Антибиотики
— макролиды и тетрациклины.

Профилактика:
Неспецифическая.

С.pneumoniae
—
возбудитель респира­торного
хламидиоза, вызывает острые и хронические
бронхиты и пневмонии. Антропоноз. Путь
— воздушно-капельный.

Диагностика:
Постановка РСК для обнаружения
специ­фических АТ (серологический
метод). При первичном заражении
учитывают обнаружение IgM.
Применяют РИФ для обнаружения
хламидийного АГ и ПЦР.

Лечение:
Антибиоти­ки — тетрациклины и
макролиды.

Профилактика:
Неспецифическая.

С.psittaci
— возбудитель
орнитоза — острого инфекционного
заболевания, которое характеризуется
поражением легких, нервной системы и
паренхиматозных органов (печени,
селе­зенки) и интоксикацией.

Зооантропоноз.
Источник — птицы. Механизм заражения
— аэрогенный, путь — воздушно- капельный.

Диагностика:
Материа­л
— кровь, мокрота больного, сыворотка
крови для серологического исследования.

Биологический
метод — куль­тивирование хламидий
в желточном мешке куриного эмбриона,
в культуре клеток. Серологический
метод. Применяют РСК, РПГА, ИФА,
ис­пользуя парные сыворотки крови
больного. Внутрикожная аллергическая
проба с орнитином.

Лечение:
Антибиотики — тетрациклины, макролиды.

—

—

—

—

—

—

—

—

Б40

1.
САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОИЕ
ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ, ВОЗДУХА.

Загрязненность
воды
определяется по обнаружению
санитарно-показательных
микроорганизмов —
индикаторов наличия выделений человека
или животных. В воде регистрируют
кишечную
палочку, БГКП (бактерии группы кишечной
палочки — колиформные палочки),
энте­рококк, стафилококки.

На
основании количественного выявле­ния
санитарно-показательных бак­терий
вычисляются индекс
БГКП (число
БГКП в 1 л воды), перфрингенс-титр,
титр энтерококка.
Титр энтерококка воды — наименьшее
количество воды, в котором определяется
энтерококк.

К
БГКП относят грам- палочки, сбра­живающие
с образованием кислоты и газа лактозу
или глюкозу при температуре 37С в
течение 24-48 ч и не обладающие оксидазной
активностью. Этот показатель применяют
как индикатор фекального за­грязнения
воды. Другой показатель фекального
загрязнения — общие колиформные
бактерии (enterobacteriaceae):
грам-, оксида-заотрицательные палочки,
ферментирующие лактозу или маннит
(глюкозу) с образованием альдегида,
кислоты и газа при температуре 37С в
течение 24 ч. Расту­т на лактозосодержащих
средах (среда Эндо).

При
бактериальном загрязнении воды свыше
допустимых норм следует провести
дополни­тельное исследование на
наличие бактерий — показателей свежего
фекального загрязнения. К таким
бактериям относят термотолерантные
колиформные бактерии, фекальные
кишечные палочки, ферментирующие
лактозу до кислоты и газа при температуре
44С в течение 24 ч и не растущие на
нитратной среде. О свежем фекальном
загрязнении свидетельствует также
выявление энтерококка.
На
давнее фекальное загрязнение указывают
отсутствие БГКП и на­личие определенного
количества клостридии
перфрингенс (устойчивых
споро-образующих бактерий).

Нормати­вы
микробиологических показателей
питьевой воды при централизованном
водоснабжении:

1.
Общее микробное число воды — не
больше 100 микробов в 1 мл воды;

2.
Общие колиформные бактерии —
нет в 100 мл воды;

3.
Термотолерантные колиформные бактерии
—
нет в 100 мл воды;

4.
Колифаги — нет
в 100 мл воды (учет по бляшкообразующим
единицам);

5.
Споры сульфитредуцирующих клостридий
— нет в 20 мл воды;

6.
Цисты лямблий — нет
в 50 мл воды.

Загрязненность
воды оценива­ется по обнаружению
патогенных микробов с фекально-оральным
механизмом переда­чи (энтеровирусы,
энтеробактерии, холерные вибрионы).

Контроль
возду­ха
проводится с помощью методов
естест­венного или принудительного
оседания микробов. Естественное
оседание
(по методу Коха) проводится в течение
5-10 мин путем осаждения микробов на
поверхность твердой питательной среды
в чашке Петри. Принудительное
оседание
микробов осуществляется путем посева
проб воздуха на питательные среды с
помощью специаль­ных приборов:
Импактор
—
при­нудительное осаждение микробов
из воздуха на поверхность питательной
среды (прибор Кротова); Импшджер
—
воздух проходит через жидкую питательную
среду или изотоничес­кий раствор
NaCl.

Санитарно-гигиеническое
состояние воз­духа:

1.
Общее количество микроорганизмов в
1 м³
воздуха
— коли­чество колоний микроорганизмов,
выросших при посеве воздуха на
питательном агаре в чашке Петри в
течение 24 ч при 37С, выра­женное в
колониеобразующих еденицах;

2.
Индекс санитарно-показательных
микро­бов — количество
золотистого стафилококка и гемолитических
стрептококков в 1 м³
воздуха. Эти бактерии представители
мик­рофлоры верхних дыхательных
путей. Появление в воздухе спорообразующих
бактерий — показатель загрязненности
воздуха микроорганизмами почвы, а
появление грам- бактерий — показатель
антисанитарного состояния.

2.
КЛЕТКИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ.

Лимфоциты.
В организме лимфоциты постоянно
рециркулируют между зонами скопления
лимфоидной ткани. Расположение
лимфоцитов в лимфоидных органах и их
миграция по кровеносному и лимфатическому
руслу строго упорядочены и связаны с
функциями различных субпопуляций.

По
наличию поверхностных CD маркеров
лимфоциты разделяют на функционально
различные популяции и субпопуляции,
прежде всего на Т- (тимусзависимые,
прошедшие первичную дифференцировку
в тимусе) лимфоциты и В — лимфоциты.

Т-
лимфоциты. распознают процессированный
и представленный на поверхности
антиген представляющих клеток АГ.
Отвечают за клеточный иммунитет,
иммунные реакции клеточного типа.
Отдельные субпопуляции помогают В-
лимфоцитам реагировать на Т- зависимые
антигены выработкой антител.

Т-
лимфоциты- Помощники (активаторы):1.
Т- хелперы1 несут рецепторы CD4 (как и
Т- хелперы2) и CD44, отвечают за созревание
Т- цитотоксических лимфоцитов (Т-
киллеров), активируют Т- хелперы2 и
цитотоксическую функцию макрофагов,
секретируют ИЛ-2, ИЛ-3 и другие цитокины.

2.
Т- хелперы2 имеют общий для хелперов
CD4 и специфический CD28 рецепторы,
обеспечивают пролиферацию и
дифференцировку В- лимфоцитов в
антителпродуцирующие (плазматические)
клетки, синтез антител, тормозят
функцию Т- хелперов1, секретируют ИЛ-4,
ИЛ-5 и ИЛ-6.

3.
Индукторы Т- хелперов несут CD29, отвечают
за экспрессию антигенов HLA класса 2 на
макрофагах и других А- клетках.

4.
Индукторы Т- супрессоров несут CD45
специфический рецептор, отвечают за
секрецию ИЛ-1 макрофагами, активацию
дифференцировки предшественников Т-
супрессоров.

Вторая
группа- Т- эффекторы:

5.
Т- цитотоксические лимфоциты (Т-
киллеры). Имеют специфический рецептор
CD8, лизируют клетки- мишени, несущие
чужеродные антигены или измененные
аутоантигены (трансплантант, опухоль,
вирус и др.). ЦТЛ распознают чужеродный
эпитоп вирусного или опухолевого
антигена в комплексе с молекулой
класса 1 HLA в плазматической мембране
клетки- мишени.

Третья
группа- Т-клетки- регуляторы:

6.
Т- супрессоры имеют важное значение
в регуляции иммунитета, обеспечивая
подавление функций Т- хелперов 1 и 2,
В- лимфоцитов. Имеют рецепторы CD11, CD8.
Их активация происходит в результате
непосредственной стимуляции антигеном
без существенного участия главной
системы гистосовместимости.

7.
Т- контсупрессоры. Имеют рецептор к
особому лейкину. Способствуют подавлению
функций Т- супрессоров, вырабатывают
резистентность Т- хелперов к эффекту
Т- супрессоров.

В-
лимфоциты. Функция
В-
клеток- эффекторное участие в гуморальных
иммунных реакциях, дифференциация в
результате антигенной стимуляции в
плазматические клетки, продуцирующие
антитела.

Образование
В- клеток у плода происходит в печени,
в дальнейшем- в костном мозге. Процесс
созревания В- клеток осуществляется
в две стадии:Антиген -независимая
фаза. В- лимфоцит в процессе созревания
проходит стадию пре- В- лимфоцита-
активно пролиферирующей клетки.
Следующая стадия- незрелый В- лимфоцит
характеризуется появлением рецепторного
IgM на поверхности. Конечная стадия —
образование зрелого В- лимфоцита,
который может иметь два мембранных
рецептора с одинаковой антигенной
специфичностью — IgM и IgD.

Активация
В- лимфоцитов может осуществляться:-
Т- зависимым антигеном при участии
белков МНС класса 2 Т- хелпера;- Т-
независимым антигеном, имеющим в
составе митогенные компоненты;

—
поликлональным активатором (ЛПС);-
анти- мю иммуноглобулинами;- Т-
независимым антигеном, не имеющим
митогенного компонента.

Кооперация
клеток в иммунном ответе:
1. Поглощение и процессинг антигена
макрофагом.2. Представление
процессированного антигена макрофагом
с помощью белка главной системы
гистосовместимости класса 2 Т-
хелперам.3. Узнавание антигена Т-
хелперами и их активация.4. Узнавание
антигена и активация В- лимфоцитов.5.
Дифференциация В- лимфоцитов в
плазматические клетки, синтез антител.6.
Взаимодействие антител с антигеном,
активация систем комплемента и
макрофагов, интерферонов.7. Представление
при участии белков МНС класса 1
чужеродных антигенов Т- киллерам,
разрушение инфицированных чужеродными
антигенами клеток Т- киллерами.8.
Индукция Т- и В- клеток иммунной памяти,
способных специфически распознавать
антиген и участвовать во вторичном
иммунном ответе ( антигенстимулированные
лимфоциты).

Клетки
иммунной памяти. Поддержание долгоживущих
и метаболически малоактивных клеток
памяти, рециркулирующих в организме,
является основой длительного сохранения
приобретенного иммунитета. Состояние
иммунной памяти обусловлено не только
длительностью жизни Т- и В- клеток
памяти, но и их антигенной стимуляцией.
Длительное сохранение антигенов в
организме обеспечивается дендритными
клетками (депо антигенов), сохраняющими
их на своей поверхности.

Дендритные
клетки — популяции отросчатых клеток
лимфоидной ткани костномозгового
(моноцитарного) генеза, представляющая
антигенные пептиды Т- лимфоцитам и
сохраняющая антигены на своей
поверхности. К ним относятся фолликулярные
отросчатые клетки лимфоузлов и
селезенки, клетки Лангерханса кожи и
дыхательных путей, М- клетки лимфатических
фолликулов пищеварительного тракта,
дендритные эпителиальные клетки
тимуса.

3.
БУНЬЯВИРУСЫ.

Семейство
Bunyaviridae считается крупнейшим по
количеству входящих в него вирусов
(около 250). Своё название семейство
получило от района Буньямвера (Уганда),
где были выделены первые представители.

Большинство
членов семейства составляют арбовирусы
родов Bunyavirus, Phlebovirus, Nairovims. Вирусы рода
Hantavirus относятся к робовирусам и
передаются контактным, воздушно-пылевым
и алиментарным путями.

Вирионы
буньявирусов имеют сферическую форму
и диаметр 90-100 нм. Геном образован
молекулой -РНК, состоящей из трёх (L, М
и S) сегментов.

Нуклеокапсид
буньявирусов организован по типу
спиральной симметрии. Снаружи
нуклеокапсид покрыт двухслойным
липидным суперкапсидом, на котором
располагаются белковые структуры с
гемагглютинирующей активностью,
объединённые в форме поверхностной
решётки.

У
различных буньявирусов состав белков
вариабелен, но все содержат поверхностные
гликопротеины G1 и G2 и внутренний
гликопротеин, ассоциированный с РНК
N-белок. Большинство вирусов содержит
РНК-зависимую РНК-полимеразу.
Репликативный цикл буньявирусов
осуществляется в цитоплазме.

Возбудители
арбовирусных инфекций

Основные
возбудители энцефалитов входят в род
Bunyavirus (вирус калифорнийского энцефалита,
вирусы энцефалитов Ла Кросс,
зайцев-беляков, Джеймстаун Каньон,
Буньямвера и Тенсав). Вирусы рода
Phlebovirus вызывают различные москитные
лихорадки (например, лихорадку
паппатачи, неаполитанскую и сицилийскую
лихорадки, лихорадки долины Рифт,
Пунта Торо и др.).

Род
Nairovirus включает вирус конго-крымской
геморрагической лихорадки, вызывающий
заболевания в России, Молдавии, Украине,
на Балканах и в Африке.

Круг
природных хозяев буньявирусов широк:
природным резервуаром более половины
видов являются грызуны, 1/4 птицы и 1/4
различные парнокопытные животные.

Переносчики
большинства буньявирусов — комары
семейства Culicinae; свыше 20 видов вирусов
передают клещи семейств Ixodidae и
Argasidae; несколько вирусов переносят
мокрецы и москиты.

—

—

—

—

Б43

1.
РИКЕТСИИ И ХЛАМИДИИ. МИКОПЛАЗМЫ.

Риккетсии
и хламидии относятся к классу Rickettsia
облигатных внутриклеточных паразитов,
который делится на два порядка:
Rickettsiales и Chlamidiales.

Риккетсии
— мелкие грам-. Полиморфизм — кокковидные,
палочковидные и нитевидные формы.
Размеры от 0,5 до 3-4 мкм, длина нитевидных
форм 10-40 мкм. Спор и капсул не образуют,
окрашиваются по Здродовскому в красный
цвет.

Хламидии
— шаровидной, овоидной, палочковидной
формы. Размеры 0,2-1,5 мкм. Морфология и
размеры хламидии зависят от стадии
внутриклеточного цикла развития, для
которого характерно превращение
небольшого шаровидного элементарного
образования в крупное инициальное
тельце с бинарным делением. Перед
делением частицы хламидии обволакиваются
образованием (бактериальная капсула).
Окрашиваются по Романовскому-Гимзе,
грам-, видны при фазово-контрастной
микроскопии.

Микоплазмы
— антропонозные бактериальные инфекции
человека, поражающие органы дыхания,
мочеполовой тракт.

Клас­с
Mollicutes,
включает
3 порядка:
Acholeplasmatales,
Mycoplasmatales, Anaeroplasmatales.

Морфология:
Отсутствие ригидной клет стен­ки,
полиморфизм, пластичность, осмотическая
чувствительность, резистентность к
различным агентам, подавляющим синтез
клет стенки (пенициллин). Грам-
окрашиваются по Романовскому-Гимзе;
различают подвижные и неподвижные
виды. Клеточная мембрана находится в
жидкокристаллическом состоянии;
включает белки, погруженные в два
липидных слоя, их компонент — холестерин.

Культуральные
свойства:
Хемоорганотрофы,
источник энергии — глк или аргинин.
Растут при температуре 30С. Факультативные
анаэ­робы; требовательны к пит средам
и условиям культивирования. Пит среды
— экстракт говяжьего сердца, дрожжевой
экстракт, пептон, ДНК, глк, аргини).
Культивируют на жидких, полужидких и
плотных пит средах.

Биохимическая
активность:
Низкая.
2 группы: 1. разлагающие с образованием
кислоты глк, мальтозу, маннозу,
фруктозу, крахмал и гликоген; 2.
окисляющие глутамат и лактат, но не
ферментирующие углеводы.

АГ
структура:
Основные АГ представлены фосфо- и
гликолипидами, полисахаридами и
белками; наиболее иммунногенны
поверх­ностные АГ, включающие
углеводы в составе сложных гликолипидных,
липогликановых и гликопротеиновых
комплексов.

Факторы
патогенности:
Адгезины, токсины, ферменты агрессии
и продукты метаболизма. Адгезины
входят в состав поверхностных АГ и
обуславливают ад­гезию на клетках
хозяина. Нейротоксин, эндотоксин,
гемолизин. Ферменты агрес­сии —
фосфолипаза А и аминопептидазы,
гидролизующие фосфолипиды мембраны
клетки. Протеазы, вызывающие дегрануляцию
клеток, расщепле­ние молекул AT
и незаменимых аминокислот.

Эпидемиология:
М.
pneumoniae
колонизирует
слизистую оболочку респираторного
тракта; M.
hominis,
M.
genitalium
и
U.
urealyticum
—
обитают в урогенитальном тракте.

Источник
— больной. Механизм передачи — аэрогенный,
основной путь — воздушно-капельный.

Патогенез:
Проникают в организм, мигрируют через
слизистые оболочки, прикрепляются к
эпителию через гликопротеиновые
рецепторы. Микробы не проявляют
выраженного цитопатогенного действия,
но вызывают нарушения свойств клеток
с развитием местных воспалительных
реакций.

Клиника:
Респираторный микоплазмоз — в форме
инфекции верхних дыха­тельных путей,
бронхита, пневмонии. Ге­молитическая
анемия, неврологические расстройства,
осложнения со стороны ССС.

Иммунитет:
Случаи
повторного заражения.

Микробиологическая
диагностика.
Мазки из носоглотки, мокрота, бронхиальные
смывы. При урогенитальных инфекциях
— моча, соскобы с уретры, влагалища.

При
серодиагностике материал для
иссле­дования — мазки, в которых
можно обнаружить АГ микоплазм в прямой
и непрямой РИФ. Микоплазмы и уреаплазмы
выяв­ляются в виде зеленых гранул.

АГ
микоплазм может обнаруживаться в
сыворотке крови больных. Для этого
ис­пользуют ИФА.

Для
серодиагностики респираторного
микоплазмоза определяют специфические
AT
в парных сыворотках больного. При
урогенитальных микоплазмозах в ряде
случаев проводят серодиагностику, AT
определяют чаше всего в РПГА и ИФА.

Культуральная
диагностика:

1.Взятый
от пациента материал должен быть
доставлен в лабораторию в особой
транспортной среде.

2.Затем
микоплазмы подращивают на жидких
селективных средах.

3.После
этого делается посев на плотные
селективные среды, что делается для
подтверждения положительных результатов
микоплазмоза.

4.И
последний этап. При помощи жидких
селективных сред с антибиотиками
определяется чувствительность
выделенных штаммов к тем или иным
антибиотикам.

ПЦР
— базируется на обнаружении фрагментов
генетического материала микоплазмы.

РИФ
— основан на обнаружении специфических
антител. Их помечают специальным
флуоресцирующим красителем, который
нанесен на препарат, позволяет
определить его фрагменты, содержащие
антиген.

ИФА
— основанный на специфических реакциях
АГ-АТ.

Лечение:
Антибиотики.
Этиотропная химиотерапия.

Профилактика:
Неспецифическая.

2.
ИММУНИТЕТ.

Невосприимчивость,
сопротивляемость организма к инфекциям
и инвазиям чужеродных организмов, а
также воздействию чужеродных веществ,
обладающих АГ свойствами. Иммунные
реакции возникают и на собственные
клетки организма, измененные в АГ
отношении.

Обеспечивает
гомеостаз организма на клеточном и
молекулярном уровне. Реализуется
иммунной системой.

Биологический
смысл иммунитета — обеспечение
генетической целостности организма
на протяжении его индивидуальной
жизни.

Врождённый
иммунитет (неспецифический,
конституционный) обусловлен
анатомическими, физиологическими,
клеточными или молекулярными
особенностями, закрепленными
наследственно. Не имеет строгой
специфичности к антигенам, и не обладает
памятью о первичном контакте с
чужеродным агентом.

Приобретенный
активный иммунитет возникает после
перенесенного заболевания или после
введения вакцины.

Приобретенный
пассивный иммунитет развивается при
введении в организм готовых АТ в виде
сыворотки или передаче их новорожденному
с молозивом матери или внутриутробным
способом.

Естественный
иммунитет включает врожденный иммунитет
и приобретенный активный (после
перенесенного заболевания). А также
пассивный при передаче АТ ребёнку от
матери.

Искусственный
иммунитет включает приобретенный
активный после прививки (введение
вакцины) и приобретенный пассивный
(введение сыворотки).

Местный
иммунитет
(обеспечивают IgA) — комплекс приспособлений,
который защищает поверхности,
соприкасающиеся с внешней средой, от
чужеродных биологических агентов.
Местный иммунитет участвует в
поддержании постоянства внутренней
среды организма, его целостности и
является частью общего иммунитета.

3.
ЛЕПРА
(ПРОКАЗА) —

Хроническое
гранулематозное заболевание, поражаются
слизистые оболочки, верхние дыхат.
пути, периферическая нервная система,
глаза.

Таксономия:
Семейство
Mycobacteriaceae
род Mycobocterium
вид M.leprae.

Морфологические
и культуральные свойства:
Прямая/изогнутая па­лочка с
закруглен­ными концами. Грам+, спор
и капсул не образуют, имеют микрокапсулу,
жгутиков не имеют. Кислото- и
спиртоустойчивость, что обуславливает
окраску по Цилю-Нельсену.
Не
культивиру­ется на искусственных
питательных средах.
Размножается
только в цитоплазме клетки путем
деления и образуют шаровидные скопления.
Нали­чие бледного ядра и пенистой
цитоплаз­мы. Токсинов не образует.

Биохимические
свойства:
Утили­зируют
глицерин и глк и имеют специфический
фермент О-дифенолоксидазу. Аэробы по
выявлению на мембранных структурах
микроорганизма ОВ фермен­тов:
пероксидазы, цитохромоксидазы.

АГ
структура:
АГ
М.leprae
общие для всех микобактерий, в том
числе с вакцинным штаммом BCG,
что используется для профилактики
лепры. Из М.leprae
выделен видоспецифический гликолипид
с наличием трисахарида.

Патогенез,
клиника:
Антропоноз.
Резервуар, источник — больной. Механизм
заражения
—
аэроген­ный, путь — воздушно-капельный.
Входные ворота — сли­зистая оболочка
верхних дыхательных путей и поврежденные
кожные покровы. Возбудитель
распространяется лимфогематогенным
путем, поражая клетки кожи и периферической
не­рвной системы. Инкубационный
период 3-5 лет.

Иммунитет:
В зонах с массивным инфицированием
лепра может быть вызвана на фоне
существующего естественного или
приобретенного иммунитета.

Микробиологическая
диагностика:
Материал — соскобы с кожи и слизистых
оболочек носа, мокрота, пунктаты
лимфатических узлов. Мазки окрашивают
по Цилю-Нельсену.

Серологическая
диагностика
основана на об­наружении АТ к
фенольному гликолипиду в ИФА.

Вспомогательное
значение имеет изучение иммунного
статуса больного, в том числе постановка
лепроминовой пробы (лепромин А). У
больных LL-формой
проба
отрица­тельная, а у больных ТТ-формой
она
положи­тельная.

Лечение:
Пре­параты сульфонового ряда: дапсон,
солюсульфон. Рифампицин, клофазимин,
фторхинолоны.

Профилактика:
Для усиления иммунитета используется
вакцина BCG
(лепромин А).

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б46

1.
МИКРОФЛОРА.

Нормальная
микрофлора — микроорганизмы находится
в равновесии (эубиоз)
друг
с другом и организмом человека.
Микрофлора — стабильное сообщество
микроорганизмов (микробиоценоз).
Место
обитания сообщества микроорга­низмов
— биотоп.
В
норме микроорганизмы отсутству­ют
в легких и матке.

Резидентная
(постоянная) облигатная микрофлора
— микроорганизмы, постоянно присутствующие
в организме.

Транзиторная
(непостоянная) микрофлора
не способна к длительному существованию
в организме.

В
тонкой кишке микроорганизмов больше,
чем в желуд­ке; обнаруживаются
бифидобактерии, клостридии, эубактерии,
лактобациллы, анаэробные кокки.

Наибольшее
количество микроорганизмов накапливается
в толстой кишке. В 1 г фе­калий
содержится до 250 млрд микробных клеток.
95 % всех видов микроорганизмов —
анаэробы. Представители микрофлоры
толстой кишки: грам+ анаэробные палочки
(бифидобактерии, лактобацил­лы,
эубактерии); грам+ спорообразующие
анаэроб­ные палочки (клостридии,
перфрингенс); энтерококки; грам-
анаэробные палочки (бактероиды); грам-
факультативно-анаэробные палочки
(кишечные палоч­ки).

Микро­флора
толстой кишки. Антагонистгнилостной
микрофлоры, т.к. продуцирует молочную,
уксусную кислоты, антибиоти­ки.
Участвует в водно-солевом обмене,
регуляции газового состава кишечника,
обмене белков, углеводов, жирных
кислот, холестерина и нуклеиновых
кислот, продукции биологически активных
соединений — антибиотиков, витаминов,
токсинов.

Морфокинетическая
роль микрофлоры — участие в развитии
органов и систем организма; участие
в физиологическом воспалении сли­зистой
оболочки и смене эпителия, переваривании
и детоксикации экзогенных субстратов
и метаболитов. Нормальная микрофлора
выполняет антимутагенную роль, разрушая
канцерогенные вещества.

Пристеночная
микрофлора кишечника колонизирует
слизис­тую оболочку в виде микроколоний,
образуя био­логическую пленку,
состоящую из микробных тел и
экзополисахаридного матрикса.
Экзополисахариды микроорганизмов
(гликокаликс) защищают микробные
клетки от физико-химических и
биологических воздействий. Слизистая
оболочка кишечника находится под
защитой биологической пленки.

2.
ПРЕПАРАТЫ ИЗ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ (Ig).

Применение
комплексной терапии, включающей
препараты, стимулирующие выработку
АТ, и Ig
препараты, содержащие готовые АТ (к
кишечной палочке, стафилококкам,
вирусу простого герпеса).

Природа
Ig.
В
ответ на введение АГ иммунная систе­ма
вырабатывает АТ — белки, способные
специфически со­единяться с АГ,
вызвавшим их образование, и таким
образом участвовать в иммунологических
реакциях.

Первичная
функция — взаимодсйствие их активных
центров с комплементарными им
детерминантами АГ. Вторичная функция
способность:

• связывать
АГ с целью его нейтрализации и элиминации
из организма;

• участвовать
в распознавании чужого АГ;

• обеспечивать
кооперацию иммунокомпетентных клеток
(мак­рофагов, Т- и В-лимфоцитов);

• участвовать
в формах иммунного ответа (фагоци­тоз,
киллерная функция, ГНТ, ГЗТ,
иммунологическая толерантность,
иммунологическая память).

Структура
АТ. Белки
Ig
по хим составу — гликопротеиды (состоят
из проте­ина и сахаров); построены
из 18 аминокислот. Молекулы имеют
цилиндрическую форму. 80 %
Ig
имеют константу седиментации 7S;
устойчивы к слабым кисло­там, щелочам,
нагреванию до 60С.

Препараты
иммуноглобулинов. Получение, показания
к применению.

Нативные
иммунные сыворотки содержат ненужные
белки (альбумин), из этих сывороток
выделяют и подвергают очистке
специфические белки-Ig.

Ig,
иммунные сыворотки подразделяют на:

1.Антитоксические
— содержащие в качестве АТ антитоксины,
которые нейтрализуют специфические
токсины (против дифтерии, столбняка,
ботулизма, газовой гангрены);

2.Антибактериальные
— содержащие агглютинины, преципитины,
комплементсвязывающие АТ к возбудителям
брюшного тифа, дизентерии, чумы,
коклюша.

3.Противовирусные
— содержащие вируснейтрализующие,
комплементсвязывающие противовирусные
АТ
(коревая,
гриппозная, антирабическая).

Методы
очистки: Осаждение спиртом, ацетоном
на холоде, обработка ферментами,
аффинная хроматография, ультрафильтрация.
Эти методы используют в производстве
иммунобиологических препаратов.

Активность
Ig
выражают в антитоксических единицах,
в титрах вируснейтрализующей,
гемагглютинирующей, агглютинирующей
активности, т.е. тем наименьшим
количеством АТ, которое вызывает
видимую реакцию с определенным
количеством специфического АГ.

Ig
создают пассивный специфический
иммунитет сразу после введения.
Применяют для лечения токсинемических
инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия,
газовая гангрена), и для лечения
бактериальных и вирусных инфекций
(корь, краснуха, чума, сибирская язва).

Профилактически:
в/м лицам, имевшим контакт с больным,
для создания пассивного иммунитета.

3.
МЕДЛЕННЫЕ
ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ (МВИ) —

Характери­зуются
признаками: 1.Необычно длительным
инкубационным периодом (месяцы, годы);
2.Своеобразным поражением органов и
тканей, преимущественно ЦНС; 3.Медленным
неуклонным прогрессированием
заболевания; 4.Неизбежным летальным
исходом.

МВИ
вы­зывают:
Ви­рус кори вызывает подострый
склерозирующий панэнцефалит, вирус
краснухи — прогрессирую­щую врожденную
краснуху и краснушный панэнцефалит.

Типичную
МВИ животных вызывает вирус Мэди/Висна
(ретровирус). Воз­будитель МВИ и
прогрессирующей пневмонии овец.

Прионы
—
возбудители конформационных болезней,
вызывающих диспротеиноз.

Патогенез
и клиника:
Прионные инфекции характеризуются
губкообразными измене­ниями мозга
(трансмиссивные губкообразные
энцефалопатии). При этом развивают­ся
церебральный амилоидоз (внеклеточный
диспротеиноз, характеризующийся
отло­жением амилоида с развитием
атрофии и склероза ткани) и астроцитоз
(разрастание астроцитарной нейроглии,
гиперпродукция глиальных волокон).
Образуются фибриллы, агрегаты белка
или амилоида. Иммунитета к прионам
нет.

Куру
— прионная
болезнь, в результате ритуального
канни­бализма — поедания недостаточно
терми­чески обработанного
инфицированного прионами мозга
погибших сородичей. В результате
поражения ЦНС нарушаются координация
движений, появля­ются озноб, эйфория.

Болезнь
Крейтцфельдта-Якоба
—
прион­ная
болезнь (инкубационный период до 20
лет), протекающая в виде деменции,
зри­тельных и мозжечковых нарушений
и дви­гательных расстройств со
смертельным ис­ходом через 9 месяцев
от начала болезни. Возможны различные
пути инфицирования и причины развития
болезни: 1.При упот­реблении
недостаточно термически обрабо­танных
продуктов животного происхождения
(мяса, мозга коров, больных губкообразной
энцефалопатией КРС); 2.При транспланта­ции
тканей (роговицы глаза), при применении
гормонов, при использовании недостаточно
простерилизованных хирургических
инструментов.

Синдром
Герстманна-Штреусслера-Шейнкера
—
прионная
болезнь с наследс­твенной патологией,
протекающая с деменцией, гипотонией,
на­рушением глотания, дизартрией.
Инкубационный период от 5 до 30 лет.

Фатальная
семейная бессонница
—
аутосомно-доминантное заболевание с
прогрес­сирующей бессонницей,
симпатической ги­перреактивностью

Скрепи
— прионная
болезнь овец и коз, характери­зующаяся
сильным кожным зудом, пораже­нием
ЦНС, прогрессирующим нарушением
координации движений и гибе­лью
животного.

Губкообразная
энцефалопатия КРС
—
прионная
болезнь КРС, характеризующаяся
поражением ЦНС, нарушением координации
движений и гибелью животного.

Микробиологическая
диагностика.
При
прионной патологии характерны
губкообразные изменения мозга,
астроцитоз (глиоз), отсутс­твие
инфильтратов воспаления; окраска.
Мозг окрашивают на амилоид. В
цереброспиналь­ной жидкости выявляют
белковые маркеры прионных мозговых
нарушений (с помощью ИФА, ИБ с
моноклональными АТ). Проводят
генетический анализ прионного ге­на;
ПЦР для выявления РгР.

Профилактика:
Введение
ограничений на использование
лекарственных препаратов жи­вотного
происхождения. Ограничение трансплантации
твердой мозговой оболочки. Использование
резиновых перчаток при работе с
биологичес­кими жидкостями больных.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б02

1.
МИКРОБИОЛОГИЯ И ИММУНОЛОГИЯ В
СОВРЕМЕННОЙ МЕДИЦИНЕ.

Микра
— наука, изучающая строение,
жизнедеятельность и экологию
микроорганизмов — мельчайших форм
жизни растительного или животного
проис­хождения, не видимых невооруженным
глазом. Микра изучает всех представителей
микромира (бактерии, грибы, про­стейшие,
вирусы). Микра — био­логическая
фундаментальная наука. Для изучения
микроорга­низмов она использует
методы других наук (фи­зики, биологии,
биоорганической химии, молекулярной
биоло­гии, генетики, цитологии,
иммунологии). Микра подразделяется
на общую и частную. Общая изучает
закономерности строения и
жизнедеятель­ности микроорганизмов
на всех уровнях — молекулярном,
кле­точном, популяционном; генетику
и взаимоотношения их с ок­ружающей
средой. Частная изучает отдельных
представителей микромира в зависимости
от проявления и влияния их на окружающую
среду, живую при­роду, в том числе
человека. К частным разделам относятся:
медицинская, ветеринарная,
сельскохозяйствен­ная, техническая
(раздел биотехнологии), морская,
космическая микра.

Многочисленные
открытия в области микры, изуче­ние
взаимоотношений между макро- и
микроорганизмами во второй половине
XIX
в. способствовали началу бурного
разви­тия иммунологии. Иммунология
стала общемедицинской и общеби­ологической
наукой. Иммунная система служит для
защиты организма не только от микробных
агентов, но и от любых генетически
чужеродных организму веществ с целью
со­хранения постоянства внутренней
среды организма, т.е. гомеостаза.

Иммунология
— основа для разработки лабораторных
методов диагностики, профилактики и
лечения инфекционных и многих
неинфекционных болезней, а также
разработки имму­нобиологических
препаратов (вакцин, иммуноглобулинов,
иммуномодуляторов, аллергенов,
диагностических препаратов).
Иммунобиотехнология — занимается
разра­боткой и производством
иммунобиологических препаратов.

Современная
медицинская микра и иммуно­логия
играют огромную роль в ди­агностике,
профилактике и лечении инфекционных
и многих не инфекционных болезней,
связанных с нарушением иммунной
системы (онкологические, аутоиммунные
болезни, транспланта­ция органов и
тканей).

2.
АНТИГЕНЫ  И  ИХ  СВОЙСТВА

Термин
АГ обозначает любую молекулу, которую
могут специфически распознавать
элементы системы приобретенного
иммунитета, т.е. В-клетки или Т-клетки,
либо и те и другие.
АГ
— инициатор и движущая сила всех реакций
приобретенного иммунитета. Иммунная
система возникла для распознавания
и разрушения чужеродных агентов, а
также устранения источника их
образования — бактерий, инфицированных
вирусом клеток. Когда АГ элиминирован,
иммунный ответ прекращается.
Антигены
— вещества различного происхождения,
несущие признаки генетической
чужеродности и вызывающие развитие
иммунных реакций (гуморальных,
клеточных, состояние иммунной
толерантности, индуцирование иммунной
памяти).

Свойства
АГ определяются комплексом признаков:
иммуногенность, антигенность,
специфичность.
Иммуногенность —
способность АГ индуцировать в организме
иммунный ответ.
Антигенность
—
способность АГ взаимодействовать
только с гомологичными АТ и лимфоцитами
определенного клона.
Специфичность
— структурные особенности, отличающие
один АГ от другого.
Способность
вызывать развитие иммунного ответа
и определять его специфичность обладает
фрагмент молекулы АГ — антигенная
детерминанта (эпитоп), избирательно
реагирующая с антигенраспознающими
рецепторами и АТ. Молекула АГ может
иметь несколько эпитопов, то есть быть
поливалентной. Чем сложнее молекула
АГ и чем больше у нее эпитопов, тем
больше вероятность развития иммунного
ответа.
Иммуногены или полные АГ —
вещества, вызывающие полноценный
иммунный ответ и обладающие свойствами:
иммуногенностью, антигенностью и
специфичностью. Иммуногенами являются
биополимеры — белки, их комплексы с
углеводами (гликопротеиды), а также
сложные полисахариды, липополисахариды
с высокой молекулярной массой. Чем
дальше от человека в эволюционном
отношении отстоят организмы, тем
большую иммуногенность проявляют их
белки.
Гаптены — неполные АГ,
относительно простые вещества,
способные участвовать в иммунологических
взаимодействиях, но не способные
самостоятельно индуцировать иммунный
ответ. Гаптены обладают свойствами
антигенностью и специфичностью, но
не обладают иммуногенностью.
Гаптены
после присоединения к крупным, обычно
белковым молекулам (носителям), могут
приобретать свойства полного
антигена.
Толерогены — антигены,
способные подавлять иммунные реакции
с развитием специфической неспособности
отвечать на них.

3.
СТРЕПТОКОККИ.

Таксономия:
Отдел Firmicutes,
род Streptococcus.
Род состоит из более 20 видов, среди
которых есть представители нормальной
мик­рофлоры человеческого тела и
возбудители тяжелых инфекци­онных
эпидемических болезней человека.

Морфологические
и культуральные свойства:
Мелкие шаровидные клетки, располагающиеся
цепочками, грам+, спор не образуют,
неподвижные. Большинство штаммов
образует капсулу, состоящую из
гиалуроновой кисло­ты. Клеточная
стенка содержит белки (М-, Т- и R-АГ),
углеводы (группоспецифические) и
пептидогликаны. Легко переходят в
L-формы.
Возбудители растут на средах,
обогащен­ных углеводами, кровью,
сывороткой, асцитической жидкостью.
На плотных средах образуют мелкие
серые колонии. Капсульные штаммы
стрептококков группы А образуют
слизи­стые колонии. На жидких средах
дают придонный рост. Факультативные
анаэробы. По характеру роста на кровяном
агаре, они делятся на культуральные
варианты: а-гемолитические (зеленящие),
в-гемолитические (полный гемолиз) и
негемолитические.

Резистентность:
Чувствительны к физи­ческим и
химическим факторам окружающей среды,
могут длительно сохранять жизнеспособ­ность
при низких температурах. Устойчивость
к антибиотикам приобретается медленно.

Патогенность:
На основе полисахаридного АГ делятся
на серогруппы (А, В, С…О). Стрептококки
группы А вырабатывают более 20 веществ,
обладающих антигенностью и агрессивностью.
На поверхности клетки имеется белковый
АГ М, который тесно связан с вирулентностью
(препятствует фагоцитозу). Этот белок
определяет типовую принадлежность
стрептококков. Кофак­торам патогенности
относят стрептокиназу (фибринолизин),
ДНКазу, гиалуронидазу, эритрогенин.
Наиболее патогенны для человека
гемолитические стрепто­кокки группы
А, называемые S.
pyogenes.
Этот вид вызывает у человека болезни:
скарлатину, рожу, ангину, острый
эндокардит, послеродовой сепсис,
хронический тонзиллит, ревматизм.

Иммунитет:
постинфекционный нестойкий,
ненапряженный.

Микробиологическая
диагностика.
Материал — гной, моча, кровь, мокрота.

Бактериоскопический
метод:
окраска по Граму мазков из патологического
ма­териала. При положительном
результате обнаруживают цепочки грам+
кокков.

Бактериологический
метод:
Исследуемый материал за­севают на
кровяной агар в чашку Петри. После
инкубации при 37С в течение 24 ч отмечают
характер колоний и наличие вокруг них
зон гемолиза. Из части материала,
взятого из коло­ний, готовят мазок,
окрашивают по Граму и микроскопируют.
Для получения чистой культуры 1-3
подозрительные колонии пересевают в
пробирки со скошенным кровяным агаром
и сахарным бульоном. На кровяном агаре
S.
pyogenes
образует мелкие мутноватые круглые
колонии. В бульоне стрептококк дает
придонно-пристеночный рост в виде
хлопьев, оставляя среду прозрачной.
По характеру гемолиза на кровяном
агаре стрептококки делятся на три
группы: 1) негемолитические; 2)
а-гемолитические 3) β-гемолитические,
образующие вокруг колонии пол­ностью
прозрачную зону гемолиза. Заключительный
этап бактериологического исследования
— идентификация выделенной культуры
по антигенным свойствам. По данному
признаку все стрептококки делят на
серологические группы (А, В, С, D).
Серогруппу определяют в реакции
преципитации с полисахаридным
преципитиногеном С. Серовар определяют
в реакции агглютинации. Выявленную
культуру стрептококка проверяют на
чувствительность к антибиотикам
методом дисков.

Серодиагностика:
Устанавливают наличие специфических
АГ в крови больного с помощью РСК или
реакции преципитации. АТ к О-стрептолизину
определяют для подтверждения диагноза
ревматизма.

Лечение:
Антибиотики широкого спектра действия
(пенициллины, устойчивые к в-лактамазе).При
выделении стрептококка А — пенициллин.
Химиотерапия антибиотиками, к которым
выявлена чувствительность микроба —
левомицетин, рифампицин.

Профилактика:
Неспецифическая — выявление, лечение
больных; проведение планового
обследования медперсонала, вакцинация
стрептококковый
бактериофаг (жидкий)
— фильтрат фаголизата стрептококка.
Применятся наружно, внутрикожно, в/м.,
О-стрептолизин
сухой
(лиофильно высушенный фильтрат
бульонной культуры стрептококка —
активного продуцента О-стрептолизина.
Применяется для постановки серологических
реакций — определения анти-О-стрептолизина
в сыворотке крови больных).

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б05

1.
РАБОТЫ Л.ПАСТЕРА, Р.КОХА.

Основные
этапы развития микры и имунологии. 5
этапов развития микры: эвристический,
морфологический, физиологический,
им­мунологический и молекулярно-генетический.

Пастер
доказал что брожение (молочнокислое,
спиртовое, уксуснокислое) не явля­ется
химическим процессом, его вызывают
микроорганизмы; опроверг теорию
самозарождения; открыл явление
анаэробио­за, т.е. возможность жизни
микроорганизмов в отсутствие кис­лорода;
заложил основы дезинфекции, асептики
и антисепти­ки; открыл способ
предохранения от инфекционных болезней
с помощью вакцинации.

Путем
прогревания (пастеризации) были
побеждены болезни пива и вина,
молочнокислых продук­тов, вызываемые
микроорганизмами; для предупреждения
гной­ных осложнений ран введена
антисептика; на основе принципов
Пастера разработаны многие вакцины
для борьбы с инфекционными болезнями.

Работы
Пастера по вакцинации открыли новый
этап в раз­витии микры — имму­нологический.

Принцип
аттенуации (ослабления) микроорганизмов
с помо­щью пассажей через восприимчивое
животное или при выдерживании
микроорганизмов в неблагоприятных
условиях (темпе­ратура, высушивание)
позволил Пастеру получить вакцины
против бешенства, сибирской язвы,
куриной холеры; этот прин­цип до
настоящего времени используется при
приготовлении вакцин.

2.
МЕХАНИЗМЫ И ФАКТОРЫ ПРОТИВОВИРУСНОЙ
ЗАЩИТЫ.

1.
Неспецифические механизмы. Существование
вирусов в 2 формах (внеклеточной и
внутриклеточной) предопределяют и
особенности иммунитета при вирусных
инфекциях. В отношении внеклеточных
вирусов действуют те же неспецифические
и специфические механизмы антимикробной
резистентности, что и в отношении
бактерий. Клеточная ареактивность —
неспецифический фактор защиты. Она
обусловлена отсутствием на клетках
рецепторов для вирусов, что делает их
невосприимчивыми к вирусной инфекции.

В
защите от внеклеточного вируса
участвуют:
Система комплемента; Пропердиновая
система; NK-клетки (естественные
киллеры); Вирусные ингибиторы.

Фагоцитарный
механизм защиты малоэффективен в
отношении внеклеточного вируса, но
достаточно активен в отношении клеток,
уже инфицированных вирусом. Экспрессия
на поверхности таких вирусных белков
делает их объектом макрофагального
фагоцитоза. Поскольку вирусы представляют
собой комплекс АГ, то при их попадании
в организм развивается иммунный ответ
и формируются специфические механизмы
защиты — АТ и эффекторные клетки.

2.
Специфические механизмы. АТ действуют
только на внеклеточный вирус, препятствуя
его взаимодействию с клетками организма
и неэффективны против внутриклеточного
вируса. Некоторые вирусы (вирус гриппа,
аденовирусы) недоступны для циркулирующих
в сыворотке крови АТ и способны
персистировать в организме человека
достаточно долго, иногда пожизненно.

При
вирусных инфекциях происходит продукция
АТ классов IgG и IgM, а также секреторных
АТ класса IgA. Последние обеспечивают
местный иммунитет слизистых оболочек
на входных воротах, что при развитии
вирусных инфекций желудочно-кишечного
тракта и дыхательных путей может иметь
определяющее значение. Антитела класса
IgM появляются на 3-5-й день болезни и
через несколько недель исчезают,
поэтому их наличие в сыворотке
обследуемого отражает острую или
свежеперенесенную инфекцию. IgG
появляются позже и сохраняются дольше,
чем IgМ.
Они обнаруживаются только через 1-2
недели после начала заболевания и
циркулируют в крови в течение длительного
времени, обеспечивая тем самым защиту
от повторного заражения.

Клеточный
иммунитет — инфицированные клетки
становятся мишенью для цитолитического
действия Т-киллеров. Особенностью
взаимодействия вирусов с иммунной
системой является способность поражать
сами клетки иммунной системы
(иммунодефицитные состояния).

3.
Интерферон — естественный белок,
обладающий противовирусной активностью
в отношении внутриклеточных форм
вируса. Он нарушает трансляцию и-РНК
на рибосомах клеток, инфицированных
вирусом, что ведет к прекращению
синтеза вирусного белка. Исходя из
этого универсального механизма
действия, интерферон подавляет
репродукцию любых вирусов, т.е. не
обладает специфичностью. Его
специфичность носит видовой характер,
т.е. человеческий интерферон ингибирует
репродукцию вирусов в клетках человека,
мышиный — мыши.

Интерферон
обладает и противоопухолевым действием,
что является косвенным свидетельством
роли вирусов в возникновении опухолей.
Образование интерферона в клетке
начинается уже через 2ч после заражения
вирусом, т.е. намного раньше, чем его
репродукция, и опережает механизм
антителообразования. Интерферон
образуют любые клетки, но наиболее
активными его продуцентами являются
лейкоциты и лимфоциты. В настоящее
время методами генной инженерии
созданы бактерии (кишечные палочки),
в геном которых введены гены,
ответственные за синтез интерферона
в лейкоцитах. Полученный таким образом
генно-инженерный интерферон широко
используется для лечения и пассивной
профилактики вирусных инфекций и
некоторых видов опухолей.

3.
СИФИЛИС.

Возбудитель
Treponema
palladium;
T.entericum.

Морфология:
Типичные трепонемы, имеют 8-12 завитков,
двигательный аппарат — 3 периплазматических
жгутика у каждого полюса клетки.
Окраску по Граму не воспринимают, по
Романовскому-Гимзе — слабо розового
цвета, выявляется импрегнацией
серебром.

Культуральные
свойства:
Вирулентный штамм на пит. средах не
растёт, накопление культуры происходит
путём заражения кролика в яичко.
Вирулентные штаммы культивируют на
средах с мозговой и почечной тканью.

Биохимические
свойства:
Микроаэрофил.

Антигенная
структура:
Сложная, обладает специфическим
белковым и липоидным АГ, последний по
своему составу идентичен кардиолипину,
экстрагированному из бычьего сердца
(дифосфадилглицерин).

Факторы
патогенности:
В процессе прикрепления участвуют
адгезины, липопротеины участвуют в
развитии иммунопатологических
процессов.

Резистентность:
При неблагоприятных условиях переходит
в L-формы
и образует цисты.

Патогенез:
Из места входных ворот трепонемы
попадают в регионарные лимфатические
узлы, где размножаются. Далее Т.
проникает в кровяное русло, где
прикрепляется к эндотелиоцитам,
вызывая эндартерииты, приводящие к
васкулитам и тканевому некрозу. С
кровью Т. разносится по всему организму,
обсеменяя органы: печень, почки,
костную, сердечно-сосудистую, нервную
системы.

Иммунитет:
Защитный иммунитет не вырабатывается.
В ответ на антигены возбудителя
развивается ГЗТ и аутоиммунные
процессы. Гуморальный иммунитет
вырабатывается на липоидный АГ
трепонемы и представляет собой титр
IgA
и IgM.

Микроскопическое
исследование.
Материал
—
отделяемое шанкра, содержи­мое
регионарных лимфатических узлов, из
которых готовят пре­парат
«раздавленная» капля и исследуют в
темном поле. При положительном
результате видны тонкие извитые нити
длиной 6-14
мкм, имеющие 10-12 рав­номерных
мелких завитков пра­вильной,
формы. Для бледной
трепонемы характерны маятникообразные
и поступательно-сгибательные движения.

Серодиагностика.
Реакцию
Вассермана ставят одновременно с 2
АГ: 1) специфическим, содержащим АГ
возбудителя — разрушенные ультразвуком
трепонемы; 2) неспецифическим —
кардиолипиновым. Исследуемую сыворотку
разводят в соотно­шении 1:5 и ставят
РСК по общепринятой методике. При
поло­жительной реакции наблюдается
задержка гемолиза, при отри­цательной
— происходит гемолиз эритроцитов;
интенсивность ре­акции оценивается
соответственно от ( + + + + ) до ( -). Первый
период сифилиса является серонегативным
и характе­ризуется отрицательной
реакцией Вассермана. У 50 % больных
реакция становится положительной
через 2-3 нед после появления твердого
шанкра. После проведенного курса
лечения реакция Вассермана становится
отрицательной. Параллельно
реакции Вассермана ставится реакция
мик­ропреципитации с
неспецифическим кардиолипиновым
ан­тигеном
и исследуемой инактивированной
сывороткой крови или плазмой.
В лунку на пластине из стекла
наносят 3 капли сыворотки и добавляют
1 каплю кардиолипинового АГ. Смесь
тщательно перемешивают и учитывают
результаты. Положительная реакция
характеризуется образованием и
выпадением
хлопьев разной величины; при отрицательном
результате наблюдается
равномерная легкая опалесценция.

РИФ

— специфическая при диагностике
сифилиса. В ка­честве АГ используют
взвесь тканевых трепонем. Используется
реакция РИФ 200. Сыворотку больного
инактивируют так же, как для реакции
Вассермана, и разводят в соотношении
1:200. На предметные стекла наносят капли
АГ, высуши­вают и фиксируют 5 мин в
ацетоне. Затем на препарат наносят
сыворотку больного, через 30 мин
промывают и высушивают. Следующим
этапом является обработка препарата
флюоресци­рующей сывороткой против
глобулинов человека. Изучают пре­парат
с помощью люминесцентного микроскопа,
отмечая степень свечения трепонем.

Реакция
иммобилизации трепонем
— специфическая. Живую культуру
тре­понем получают при культивировании
в яичке кролика. Яичко измельчают в
специальной среде, в которой трепонемы
со­храняют подвижность. Ставят
реакцию: взвесь тканевых (подвижных)
трепонем соединяют в пробирке с
исследуемой сывороткой и добавляют
свежий комплемент. В одну контрольную
пробирку вместо исследуемой сыворотки
добавляют сыворотку здорового человека,
в другую — вместо свежего комплемента
добавляют неактив­ный. После
выдерживания при 35С в анаэробных
условиях из всех пробирок готовят
препарат раздавленная капля и в темном
поле определяют количество подвижных
и не­подвижных трепонем.

Лечение:
Пенициллины, тетрациклины,
висмутсодержащие препараты.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б08

1.
МЕЧНИКОВ И ДР.

Исследования
Мечни­кова показали, что большую
роль в формировании иммунитета играют
— макро- и микрофаги. Эти клетки
поглощают и переваривают чужеродные
частицы, в том
числе бактерии. Исследования Мечникова
по фагоцитозу доказали, что, помимо
гуморального, существует клеточный
иммунитет. Мечников один из
ос­новоположников иммунологии. Его
работы положили начало изу­чению
иммунокомпетентных клеток как
морфологической основы иммунной
системы, ее единства и биологической
сущности.

Ивановский
открыл вирусы (царство Vira).
Основоположник вирусологии. Открыл
проходящий через бактериологические
фильтры возбудитель табачной мозаики,
названный вирусом.

Гамалея
— вместе с Мечниковым организовал
первую в России бактериологическую
станцию. Автор работ по микре и
иммунологии (по профилактике холеры,
чумы, оспы, паразитарных тифов,
бешенства). Открыл бактериолизины,
возбудители холеры птиц. Обосновал
значение дезинсекции для ликвидации
сыпного и возвратного тифов.

Здровский
— микробиолог, иммунолог и эпидемиолог.
Исследования по проблемам тропических
болезней, бруцеллеза. Под руководством
Здродовского разработаны методы
вакцинации против столбняка, дифтерии.

Смородинцев
вирусолог и иммунолог. Труды по
профилактике гриппа, энцефалитов.
Совместно с Чумаковым разработал и
внедрил вакцину против полиомиелита.

Ермольева
— микробиолог. Получила первые образцы
антибиотиков — пенициллина, стрептомицина;
интерферона.

Жданов
— вирусолог. Труды по вирусным инфекциям,
молекулярной биологии и классификации
вирусов, эволюции инфекционных
болезней.

2.
МЕСТНЫЙ ИММУНИТЕТ.

Комплекс
приспособлений, который защищает
поверхности, соприкасающиеся с внешней
средой, от чужеродных биологических
агентов. Местный иммунитет участвует
в поддержании постоянства внутренней
среды организма, его целостности и
является частью общего иммунитета.

Местный
иммунитет обеспечивают IgA.

IgА
— 60%
содержится в секретах слизистых.

Сывороточный
IgA:
10-15%
всех сывороточных Ig.
В сыворотке крови взрослого чело­века
содержится 2,5 г/л IgA.
Период полураспада IgA
— 6 дней.

IgA
— мономер, имеет 2 антигенсвязывающих
центра (2х-валентный), молекуляр­ная
масса 170 кДа и константа седи­ментации
7S.
Есть подтипы А1 и А2. Синтезируется
В-лимфоцитами и плазматическими
клетками. Опре­деляется в сыворотке
крови при первич­ном и вторичном
иммунном ответе.

Обладает
аффинностью. Может быть неполным АТ.
Не связывает комплемент. Не проходит
через плацентар­ный барьер.

IgA
обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию
и маркирование АГ, осуществля­ет
запуск антителозависимой
клеточно-опосредованной цитотоксичности.

Секреторный
IgA:
Существует
в полимерной форме в виде ди- или
тримера (4- или 6-валентный) и содержит
J—
и S-пeптиды.
Молекулярная масса 350 кДа, константа
седиментации 13S.

Синтезируется
В-лимфоцитами, плазматическими клетками
со­ответствующей специализации
только в пределах слизистых и выделяется
в их секреты. Объем продукции достигает
5 г в сут. Самый многочисленный в
организме — его количество превышает
суммарное содержание IgM
и IgG.
В сыворотке крови не обнаруживается.

Секреторнай
IgA
— основной фак­тор специфического
гуморального местного иммунитета
слизистых оболочек желудочно-кишечного
тракта, мочеполовой системы и
респираторного тракта. Благодаря
S-цепи
он устойчив к действию протеаз. slgA
не активи­рует комплемент, но
эффективно связывается с АГ и
нейтрализует их. Он препятс­твует
адгезии микробов на эпителиальных
клетках и генерализации инфекции в
преде­лах слизистых.

3.
ТУБЕРКУЛЁЗ.

Хроническое
заболевание, сопровождающееся
поражением органов дыхания, лимфатичес­ких
узлов, кишечника, костей и суставов,
глаз, кожи, почек и мочевыводящих
путей, половых органов, центральной
нервной системы.

Возбудители
3 вида микобактерий: M.tuberculosis
— человеческий, M.bovis
— бычий, M.africanum
— промежуточный.

Таксономия:
Отдел Firmicutes,
род Mycobacterium.
Родовой признак: кислото-, спирто- и
щелочеустойчивость.

Морфология,
тинкториальные и культуральные
свойства:
Полиморфизм. Форма длинных, тонких
(М.tuberculosis)
или коротких, толстых (M.bovis),
прямых или слегка изогнутых палочек
с гомогенной или зернистой цитоплазмой;
грам+, неподвижны, спор не образуют,
имеют микрокапсулу. Выявление окраской
по Цилю-Нильсену. Образуют морфовары
(L-формы
бак­терий), которые персистируют в
организме и индуцируют противотуберкулезный
иммунитет.

М.tuberculosis
— аэробы, глицеринзависимы. На жидких
питательных средах дают рост в виде
сухой пленки кремового цвета. При
внутриклеточном развитии и при росте
на жидких средах выявляется характерный
корд-фактор, благодаря которому
микобактерии растут в виде жгутов. На
плотных средах рост в виде кремового,
сухого чешуйчатого налета с неровными
краями (R-формы).
По мере роста колонии приоб­ретают
бородавчатый вид. Под влиянием
антибактериальных средств возбудители
изменяют культуральные свойства,
образуя гладкие колонии (S-формы).
M.bovis
— растут на средах медленнее,
пируватзависимы; на плотных питательных
средах образуют мелкие шаровидные,
серовато-белые колонии (S-формы).

Ферментная
активность:
Высокая каталазная и пероксидазная
активность. Каталаза термолабильна.
М.tuberculosis
синтезирует ниацин (никотиновая
кислота), который накапливается в
культуральной среде и определяется
в пробе Конно.

Химический
состав:
Основные компо­ненты — белки, углеводы,
липиды. Липиды (фосфатиды, корд-фактор,
туберкулостеариновая кислота) —
устойчивость к кислотам, спиртам,
щелочам, препятствуют фагоцитозу,
нарушают проницаемость лизосом,
вызывают развитие специфи­ческих
гранулем, разрушают митохондрии
клеток. Микобактерии индуцируют
развитие ГЗТ (туберкулин).

Факторы
патогенности:
Прямое или иммунологически опосредованное
действие липидов и липидсодержащих
структур.

АГ
структура:
При забо­леваниях к АГ образуются
антипротеиновые, антифосфатидные и
антиполисахаридные АТ, свидетельствующие
об активности процесса.

Резистентность:
Благодаря липидам, устойчивы к действию
небла­гоприятных факторов. Высушивание
не влияет. Погибают при кипячении.

Эпидемиология:
Источник — человек, больной туберкулезом
органов дыхания, выделяющий микробы
в окружающую среду. Пути передачи —
воздушно-капельный и воздушно-пылевой.

Патогенез
и клиника:
Возникновению заболевания способствуют
иммунодефициты. Инкубационный период
от 3-8 нед. до 1 года. В развитии болезни
выделяют первичный, вторичный и
диссеминированный туберкулез. В зоне
проникновения микобак­терий возникает
первичный туберкулезный комплекс,
со­стоящий из воспалительного очага,
пораженных регионарных лимфатичес­ких
узлов и измененных лимфатических
сосудов между ними. Диссеминация
микробов происходит бронхо-, лимфо- и
гематогенно.
В
основе специфического воспаления при
туберкулезе лежит ГЗТ, что препятствует
рас­пространению микробов по
организму.

Иммунитет:
Противотуберкулезный иммунитет
нестериль­ный инфекционный, обусловлен
наличием в организме L-форм
микобактерий.

Микробиологическая
диагностика.
К методам обследования относится
бактериоскопическое, бактериологическое
исследование, биологическая проба,
туберкулинодиагностика, основанная
на определении повышенной чувствительности
организма к туберкулину. Все методы
направлены на обнаружение микобактерий
в патологическом материале: мокроте,
промывных водах бронхов, плевральной
и церебральной жидкостях, кусочках
тканей из органов.

Для
вы­явления инфицирования и
аллергических реакций ставят
внутрикожную пробу Манту с очищенным
туберкулином в стандартном разведе­нии.
Для экспресс-диагностики туберкулеза
применяют РИФ и ПЦР.
Для
раннего выявле­ния туберкулеза
используют ИФА, направленный на
обнаружение специфических АТ.

Лечение:
Противотуберкулезные препараты:
группа А — изониазид, рифампицин; группа
В — пиразинамид, стрептомицин, флоримицин;
группа С — ПАСК, тиоацетозон.

Профилактика:
Проводят путем введения живой вакцины
— БЦЖ, внутрикожно на 2-5й день после
рождения ребенка. Ставят пробу Манту
для выявления туберкулиннегативных
лиц, подлежащих ревакцинации.

Условно-патогенные
микобактерии:
Семейство Mycobacteriaceae
род Mycobacterium.
Сходны по биологич. свойствам, но
устойчивы к противотуберкулезным
препаратам.

1
гр: медленнорастущие фотохромогенные
M.kansassi,
M.marinum
— поражения кожи, лимфадениты, инфекции
мочеполового тракта.

2
гр: медленнорастущие скотохромогенные:
M.scrofulaceum,
M.gordonae.

3
гр: медленнорастущие нехромогенные:
M.avium,
M.gastri.

4
гр: быстрорастущие ското- фотохромогенные:
M.fortuitum,
M.chelonei.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б11

1.
МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР
БАКТЕРИЙ.

Чистая
культура — популяция бактерий од­ного
вида или одной разновидности, выращенная
на питательной среде.

Выделение
ЧК аэробных бактерий.

1
этап. Для определения морфологии
клеток и их тинкториальных свойств,
из исследуемого материала готовят
мазок, окрашивают по Граму или другим
методом и микроскопируют. Для посева
исследуемый материал разводят в
пробирке со стерильным изотоническим
раствором NaCl.
Одну каплю приготовленного разведения
наносят петлей на поверхность
питательного агара в чашку Петри и
тщательно втирают шпателем в среду,
равномерно распределяя материал по
всей ее поверхности. После посева
чашку переворачивают дном кверху,
подписывают и помещают в термостат
при 37С на 18-24 ч.

2
этап. Просматривают чашки и изучают
изолированные колонии (форма, величина,
консистенция).
Для выделения и накопления ЧК одну
изолированную колонию или несколько
различных изолированных колоний
пересевают в отдельные пробирки со
скошенным агаром. Для этого часть
колонии снимают петлей, не задевая
соседние колонии.

3
этап. Отмечают характер роста выделенной
ЧК. ЧК характеризуется однородным
ростом. При микроскопическом исследовании
окрашенного мазка, приготовленного
из ЧК, в нем обнаруживаются морфологически
и тинкториально однородные клетки.
Однако в случае выраженного полиморфизма
(некоторые виды бактерий), в мазках из
ЧК наряду с типичными встречаются и
другие формы клеток.

Выделение
ЧК анаэробных бактерий. Посевы
на анаэробную микрофлору, как
спорообразующую (клостридии), так и
неспорообразующую (вейлонеллы,
бактероиды, пептококки), производят
анаэробных условиях. Первоначальные
посевы делают на обогатительные среды
типа Китта-Тароцци, затем пересевают
на плотные: сахарный кровяной агар в
чашки Петри, в пробирки с сахарным
питательным агаром. После инкубации
посевов в анаэробных условиях из
образовавшихся колоний бактерий
готовят мазки, окрашивают, микроскопируют,
а затем пересевают на среду Китта-Тароцци
и агаровые среды для выделения чистой
культуры.

При
выделении спорообразующих анаэробных
бактерий (клостридии) первоначальные
посевы прогревают на водяной бане при
80С в течение 20 мин для уничтожения
вегетативных клеток посторонней
микрофлоры, которая может присутствовать
в исследуемом материале.

2.
РАССТРОЙСТВА ИММУННОЙ СИСТЕМЫ.

Иммунодефициты
— нарушения нор­мального иммунного
статуса, обусловлен­ные дефектом
одного или нескольких механизмов
иммунного ответа.

Первичные
(врожденные, генетические) иммунодефициты.
Состояния,
при которых нарушение иммунных
гуморальных и кле­точных механизмов
связано с генетическим блоком, т. е.
генетически обусловлено неспособностью
организма реализовывать то или иное
звено иммунологической реактивности.
Расстройства иммунной системы
затра­гивают основные специфические
звенья в функционировании иммунной
системы и факторы, определяющие
неспецифическую резистентность.
Возможны комбинирован­ные и
селективные варианты иммунных
рас­стройств. В зависимости от уровня
и характера нарушений различают
гуморальные, клеточ­ные и комбинированные
иммунодефициты.

Причины
врожден­ных иммунодефицитов —
удвоение хромосом, точечные мутации,
дефект
фер­ментов
обмена нуклеиновых кислот, генети­чески
обусловленные нарушения мембран,
повреждения генома в эмбриональном
пе­риоде. Первичные имму­нодефициты
проявляются на ранних этапах
постнатального периода, наследуются
по аутосомно-рецессивному типу.
Проявления первичных иммунодефицитов
— недостаточность фагоцитоза, система
комп­лемента, гуморальный иммунитет
(В-системы), клеточный иммунитет
(Т-системы), комбинированная
иммунологичес­кая недостаточность.

Вторичные
(приобретенные) иммунодефициты.
Развиваются
у лиц с нормально функционировавшей
от рождения иммунной системой. Они
формируются под воздействи­ем
окружающей среды на уровне фенотипа
и обусловлены нарушением функции
иммунной системы в результате различных
заболеваний или неблагоприятных
воздействий на орга­низм. При
вторичных иммунодефицитах поражаются
Т- и В-системы иммунитета, фак­торы
неспецифической резистентности.
Вторичные иммунодефициты поддаются
иммунокоррекции, т.е. восстановлению
нормальной деятельности иммунной
системы.

Вторичные
иммунодефициты:
после перенесенных инфекций (особенно
ви­русных) и инвазий (протозойные и
гельминтозы); при ожоговой болезни;
при уремии; при опухолях; при нарушении
обмена веществ и истощении; при
дисбиозах; при тяжелых травмах; при
облучении, действии химических веществ;
при старении; медикамен­тозные.

По
времени возникновения:
Ан­тенатальные
(ненаследственные
формы синдрома ДиДжорджи), перинаталь­ные
(нейтропения
новорожденного, вызванная
изосенсибилизацией матери к АГ
нейтрофилов плода), постнатальные
вторичные
иммунодефициты.

По
клиническому течению:
Компенсированная
форма
сопро­вождается повышенной
восприимчивостью организма к
инфекционным агентам, вы­зывающим
оппортунистические инфекции.
Субкомпенсированная
форма
характеризует­ся склонностью к
хронизации инфекционных процессов.
Декомпенсированная
форма
про­является в виде генерализованных
инфекций, вызванных условно-патогенными
микробами и злокачественными
новообразова­ниями.

Вторичные
иммунодефициты:
Физиологические,
новорожденные, беременности и лактации,
старения,
биоритмичности,
экологические,
сезонные, эндогенные интоксикации,
радиационные,
СВЧ,
патологические, постинфекционные,
стрессовые, регуляторно-метаболические,
медикаментозные,
онкологические.

3.
ГРИПП

Таксономия:
Семейство Orthomyxoviridae,
род Influenzavirus.
3 серотипа вируса гриппа: А, В, С.

Структура
вируса гриппа
А.
Возбудитель
имеет однонитчатую РНК (8 фрагментов).
Подобная сегментарность позволяет
двум вирусам при взаимодействии легко
обмениваться генетической информацией
и способствует высокой изменчивости
вируса. Капсомеры уложены вок­руг
нити РНК по спиральному типу. Имеет
суперкапсид с отростками. Полиморфен:
сферические, палочковидные, нитевидные
формы.

АГ
структура:
Внутренние
АГ
состоят из РНК и белков капсида,
представлены нуклеопротеином
(NP-белком)
и М-белками. NP-и
М-белки — типоспецифические АГ. NP-белок
способен связывать комп­лемент,
поэтому тип вируса гриппа определяют
в РСК. Внутренний АГ стимулирует
Т-киллеры и макрофаги, не вызывает
антителообразования. Поверхностные
АГ
— гемагглютинин и нейраминидаза. Их
струк­туру, которая определяет
подтип вируса гриппа, исследуют в
РТГА, благодаря тор­можению
специфическими АТ гемагглютинации
вирусов. Имеются 3 разновидности Н- и
2 разновидности N-АГ.

Иммунитет:
Во время заболевания в проти­вовирусном
ответе участвуют факторы неспе­цифической
защиты: выделительная функция организма,
сывороточные ингибиторы, аль­фа-интерферон,
специфические IgA
в секре­тах респираторного тракта,
которые обеспечи­вают местный
иммунитет.

Клеточный
иммунитет — NK-клетки
и специфические цитотоксические
Т-лимфоциты, действующие на клетки,
ин­фицированные вирусом. Постинфекционный
иммунитет длителен и прочен, но
высокоспецифичен.

Микробиологическая
диагностика.
Выделение
и иден­тификациия вируса; определение
вирусных АГ в клетках больного; поиск
вирусоспецифических АТ в сыворотке
больно­го. При отборе материала
важно получить пораженные вирусом
клетки, так как в них происходит
репликация вирусов. Материал —
носоглоточное отделяемое. Для
определения АТ исследуют парные
сыворотки крови больного.

Экспресс-диагностика.
Обнаруживают
ви­русные АГ в исследуемом материале
с помощью РИФ (прямой и непрямой
вариан­ты) и ИФА. Можно обнаружить
в материале геном вирусов при помощи
ПЦР.

Вирусологический
метод.
Оптимальная
лабо­раторная модель для культивирования
штаммов — ку­риный эмбрион. Индикацию
вирусов проводят в зависи­мости от
лабораторной модели (по гибели, по
клиническим и патоморфологическим
изменениям, ЦПД, образованию бляшек,
цветной пробе, РГА и гемадсорбции).
Идентифицируют вирусы по АГ структуре.
Применяют РСК, РТГА, ИФА,
РБН
(реакцию биологической нейтрализа­ции)
вирусов. Обычно тип вирусов грип­па
определяют в РСК, подтип — в РТГА.

Серологический
метод.
Диагноз
ставят при четырехкратном увеличении
титра АТ в парных сыворотках от
больного, полученных с интервалом в
10 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА, РБН
вирусов.

Лечение:
Симптоматическое/патогенетическое.
А-интерферон — угнетает размножение
вирусов.

1.
Препараты — индукторы эндогенного
интерферона. Этиотропное лечение —
ремантидин — препятствует репродукции
вирусов, блокируя М-белки. Арбидол —
действует на вирусы А и В.

2.
Препараты — ингибиторы нейраминидазы.
Блокируют выход вирусных частиц из
инфицированных клеток.

При
тяжелых формах — противогриппозный
донорский Ig
и нормальный человеческий Ig
для вв введения.

Профилактика:
Неспецифическая
— противоэпидемические мероприятия,
препараты а-интерферона и оксолина.
Специфическая
— вакцины. Живые аллантоисные
интраназальная и подкожная, тривалентные
инактивированные цельно-вирионные
гриппозные интраназальная и
парентеральная-подкожная (Грипповак),
химические Агриппал, полимер-субъединичная
Гриппол. Живые вакцины создают наиболее
пол­ноценный, местный, иммунитет.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б14

1.
МЕТОДЫ
МИКРОСКОПИИ.

Люминесцентная
(флюоресцентная). Осно­вана
на явлении фотолюминесценции.
Люминесценция
— свечение веществ, возникающее после
воз­действия на них каких-либо
источников энергии: световых,
элек­тронных лучей, ионизирующего
излучения. Фотолюминесцен­ция
— люминесценция объекта под влиянием
света. Если осве­щать люминесцирующий
объект синим светом, то он испускает
лучи красного, оранжевого, желтого
или зеленого цвета. В ре­зультате
возникает цветное изображение объекта.

Темнопольная.
Основана
на явлении дифракции света при сильном
боковом освещении взвешенных в жидкости
мельчайших частиц (эффект Тиндаля).
Эффект достигается с помощью параболоид-
или кардиоидконденсора, которые
заменяют обычный конденсор в
био­логическом микроскопе .

Фазово-контрастная.
Дает
возможность увидеть прозрачные
объекты. Они приобретают высокую
контрастность изображения, которая
может быть позитивной или негативной.
Позитивное — темное изображение объекта
в светлом поле зрения, негативное —
светлое изображение объек­та на
темном фоне.

Используют
обычный микроскоп и дополнительное
фазово-контрастное устройство, а также
специальные осветители.

Электронная.
Позволяет
наблюдать объекты, размеры которых
лежат за пределами разрешающей
способно­сти светового микроскопа
(0,2 мкм). Применяется для изучения
вирусов, тонкого строения различных
микроорганизмов, макромолекулярных
структур и других субмик­роскопических
объектов.

2.
РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ.

РН
основана на способности специфических
вируснейтрализующих АТ блокировать
инфекционные, гемагглютинирующие,
гемадсорбирующие, цитопатические,
бляшкообразующие свойства вирусов.

Применяется
для: Идентификации вирусов; Серодиагностики
вирусных инфекций, т.е. для определения
нарастания титра вируснейтрализующих
АТ в парных сыворотках.
Компоненты:
1.
Исследуемый вирус (при идентификации
выделенного вируса) или исследуемая
сыворотка (при серодиагностике
инфекции).
2. Диагностическая (группе-,
видо-, типоспецифическая) сыворотка
(при идентификации вируса) или известный
вирус — диагностикум (при серодиагностике).
3.
Индикаторный объект: животные, куриные
эмбрионы, культуры тканей или эритроциты.

РН
ставят в культурах клеток, куриных
эмбрионах и на лабораторных животных.

Принцип.
Смесью вирус (исследуемый или известный)
+ сыворотка (диагностическая или
исследуемая), выдержанной в течение
определенного времени, заражают
культуру клеток, куриный эмбрион или
лабораторное животное. При (+) реакции,
т.е. при нейтрализации вируса АТ
индикаторные объекты продолжают
нормально существовать, а в контроле
— гибель или характерные изменения.

РН
— реакция торможения гемагглютинации
(РТГА).

РТГА
применяется для: Серотипирования
вирусов; Серодиагностики инфекций.
Выделяют
два способа постановки: Капельный
способ на стекле (ориентировочная
реакция), применяется для серо
копирования вирусов; Развернутый в
пробирках.

Механизм.
У некоторых вирусов (грипп) есть
гемагглютинин, вызывающий агглютинацию
эритроцитов различных животных, в
зависимости от вида вируса. При наличии
в сыворотке АТ — антигемагглютининов
наблюдаются ингибирования активности
вирусов.
РТГА. Цель: серотипирование
вируса гриппа А

Компоненты:
1.
Материал — аллантоисная жидкость
куриного эмбриона
2. Диагностические
противогриппозные типоспецифические
сыворотки
3. 5 % взвесь куриных
эритроцитов
4. Физиологический
раствор

Реакция
ставится на стекле капельным способом.
На стекло наносят по 1 капле диагностических
сывороток и исследуемого материала,
перемешивают, затем добавляют 1 каплю
взвеси эритроцитов. При (+) реакции
наблюдается гомогенное покраснение,
а при отрицательной выпадение хлопьев
красного цвета (гемагглютинация).

3.
БОТУЛИЗМ.

Острое
инфекционное заболевание,
ха­рактеризующееся интоксикацией
организма с пре­имущественным
поражением центральной нервной
системы. Болезнь возникает при
употреб­ления пищевых продуктов,
содержащих токсины Clostridium
botulinum.

Таксономия:
Отдел Firmicutes,
род Clostridium.

Морфологические
и тинкториальные свойства:
Грам+ палочки с закругленными концами,
образуют споры и имеют вид веретена.
Капсулы нет, перитрихи.

Культуральные
свойства:
Строгий анаэроб. Оптимальная температура
для роста 30С. На кровяном агаре образует
прозрачные колонии. В столбике сахарного
агара можно обнаружить R-формы
зерен чечевицы и S-формы
— пушинок.

Биохимическая
активность:
4 группы: 1 — выраженные протеолитические
свойства, гидролизуют желатин,
ферментируют глк и мальтозу; 2 — проявляют
сахаролитическую активность,
протеолитической – нет; 3 — проявляют
липазную активность, гидролизуют
желатин. 4 — гидролизуют желатин, не
проявляют сахаролитических свойств.

Все
типы образуют желатиназу, лецитиназу,
H2S.
Бактерии типа А,В,Е,F
— ферментируют глк, фруктозу, мальтозу,
сахарозу. Типа С,D
— глк, мальтозу.

АГ
свойства:
Имеются группоспецифические жгутиковые
– Н- и типоспецифические О-АГ бактерий,
не проявляющие токсических свойств.
По структуре экзотоксинов бактерии
разделяют на 8 сероваров: А, В, С1, С2, D,
E,
F
и G.

Факторы
патогенности:
Экзоток­син. Ботулинический
эк­зотоксин обладает нейротоксическим
действием. Особенность — высокая
устойчивость к нагреванию (сохраняется
10-15 мин при 100С), к кислой среде, высоким
концентрациям поваренной соли,
замораживанию, пищевари­тельным
ферментам.

Резистентность:
Споры устойчивы к высокой температуре
(выдерживают ки­пячение 3-5 ч).

Эпидемиология:
Обнаруживают в организме животных,
рыб, откуда он попадает в почву и воду.
В почве C.botulinum
сохраняется в виде спор и размножается
(сапронозная инфекция). Из почвы
возбудитель попадает в пищевые продукты
и при наличии анаэробных условий
раз­множается там и выделяет
экзотоксин. Путь заражения — пищевой.

Патогенез:
Попадает с пищей в ЖКТ. Устойчивый к
действию пищеварительных ферментов
и хлористоводородной кислоты, токсин
всасывается через стенку кишечника
в кровь (длительная токсинемия). Токсин
связывается нервными клетками и
блокирует передачу импульсов через
нервно-мышечные синапсы. Разви­вается
паралич мышц гортани, глотки, дыхательных
мышц; изменения со стороны органа
зрения.

Клиника:
Инкубационный период от 6-24 ч до 2-6
дней. Чем короче инкубационный период,
тем тяжелее протекает болезнь. Болезнь
начинается остро, но температура в
норме. В первом случае болезнь начинается
с появления сухости во рту, тошно­ты,
рвоты, поноса, во втором — нарушения
со стороны зрения (снижение остроты
зрения, двоение).

Иммунитет:
Не фор­мируется. Введение ботулинических
анатоксинов создает прочный искусственный
вариантоспецифический антитоксичес­кий
иммунитет.

Микробиологическая
диагностика.
Материал — про­мывные воды желудка,
рвотные массы, остатки пищи, кровь.
Применяют бактериологический метод,
биологический (РН токсина антитокси­ном),
с помощью реакции обратной непрямой
гемагглютинации, и серологический
(РПГА) методы, позволяющие выявить в
исследуемом материале ботулинический
токсин.

Лечение:
Ан­титоксические противоботулинические
гетерологичные сыворот­ки и
гомологичные Ig.

Профилактика:
Для специфической актив­ной
профилактики ботулизма разработаны
и применяются по показаниям тетра- и
трианатоксины, в состав которых входят
ботулинические анатоксины типов А, В
и Е. Для экстренной пассивной профилактики
используют противоботулинические
антитоксические сыворотки.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б17

1.
МОРФОЛОГИЯ
ФАГОВ.

Головки
фагов состоят из внутреннего содержимого
— нуклеиновой кислоты и окружены
белковой оболочкой. Отросток состоит
из: оболочки, внутреннего стержня с
канальцем, базальной пластинки,
оканчивающейся выступами и нитевидными
структурами. Оболочка состоит из
субъединиц белковой природы, собранных
в спираль. Вид гофрированной трубки.
В верхней части отростка фагов —
воротничок.

Фазы
взаимодействия фага с бактериальной
клеткой.

Адсорбция
фага на бактер клетке происходит при
соответствии фаговых рецепторов,
расположенных на конце отростка, с
рецепторами бактер клетки, связанными
с клет стенкой. Некоторые фаги
адсорбируются на половых ворсинках.
На бактериях, лишенных клет стенок
(протопласты) нет адсорбции.

Проникновение
фага в бактерию происходит путем
инъекции нуклеиновой кислоты через
канал отростка.

Некоторые
фаги вводят свою ДНК без предварительного
повреждения клет стенки бактерий,
другие — сквозь отверстия которые они
пробуравливают в клет стенке с помощью
лизоцима содержащегося в их капсиде.

Репликация
фаговой нуклеиновой кислоты и синтез
фагоспецифических ферментов транскрипции
и репликации происходят так же, как и
при репродукции других вирусов.

Выход
зрелых фагов из бактер клетки происходит
путем взрыва, во время которого
зараженные бактерии лизируются. Лизис
происходит при участии фагового
лизоцима.

Адсорбция
бактериофага на фагоспецифических
рецепторах клетки.

Инъекция
фаговой нуклеиновой кислоты в клетку
хозяина. Совместная репликация фаговой
и бактериальной нуклеиновой кислоты.

Деление
клетки. Далее бактериофаг может
развиваться по двум моделям: лизогенный
либо литический путь.

2.
ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ
ПАМЯТЬ И ТОЛЕРАНТНОСТЬ.

Иммунологическая
память
(вторичный иммунный ответ) — при
повторной встрече с АГ орга­низм
формирует быструю иммунную реакцию.
Иммунологическая память имеет
специфичность к конкретному АГ,
распространяется на гуморальное и
клеточное звено иммунитета и обус­ловлена
В- и Т-лимфоцитами. Образуется всегда,
долго сохраняется.

Механизм
формирова­ния:
1. Длительное сохранение АГ в организме
(инкапсулированный возбудитель
туберкулеза, персистирующие вирусы
кори, полиомиелита, ветряной оспы
длительное время, сохраняются в
организме, под­держивая в напряжении
иммунную систему).
2. В
про­цессе развития в организме
продуктивного им­мунного ответа
часть антигенореактивных Т- или
В-лимфоцитов дифференцируется в малые
по­коящиеся клетки (клетки
иммунологической памяти).
Эти
клетки высоко специфичны к конкретной
АГ детер­минанте и обладают большой
продолжительностью жизни (до 10 лет).
Они активно рециркулируют в организме,
распределяясь в тканях и органах, но
постоянно возвращаются в места своего
про­исхождения за счет хоминговых
рецепторов. Это обеспечивает постоянную
готовность иммунной системы реагировать
на повторный контакт с АГ по вторичному
типу.

Иммунологическая
память используется в вакцинации
людей для создания напряженного
иммунитета. Осуществляют это 2-3-кратными
при­вивками при первичной вакцинации
и перио­дическими повторными
введениями вакцинно­го препарата
— ревакцинациями.

Повторная
попытка трансплантировать уже однажды
отторгнутую ткань вызывает быст­рую
и бурную реакцию — криз
отторжения.

Иммунологическая
толе­рантность —
проявляется отсутствием специфического
продуктивного иммунного ответа
организма на АГ в связи с неспособностью
его распознавания.

Иммунологическую
толерантность толерогены
(полисахариды).

Врожденная
толерантность
—
отсутс­твие реакции иммунной системы
на свои собственные АГ. Приобретенную
толе­рантность
можно
создать, вводя в организм вещества,
подавляющие иммунитет (иммунодепрессанты),
или путем введения АГ в эмбриональном
периоде. Активная
толерантность создается
пу­тем введения в организм толерогена,
который формирует специфическую
толерантность. Пассивную
толерантность можно
вызвать ве­ществами, тормозящими
биосинтетическую или пролиферативную
активность иммунокомпетентных клеток
(антилимфоцитарная сыворотка,
цитостатики).

Степень
проявления иммунологической
толе­рантности
зависит от свойств макроорганизма и
толерогена.

Значение
в индукции иммуноло­гической
толерантности имеют доза АГ и
продолжительность его воздействия.
Высокодозовую
толерантность вызывают
введением больших количеств
высококонцентрированного АГ.
Низкодозовая
толерантность
вызывается малым количеством
высокогомогенного молекулярного АГ.

Механизмы
толерантности — основу составляют
нормальные процессы регуляции иммунной
системы. Причины развития имму­нологической
толерантности:

1.
Элиминация из организма антигенспецифических
клонов лимфоцитов.

2.
Блокада биологической активности
иммунокомпетентных клеток.

3.
Быстрая нейтрализация АГ АТ.

3.
ПАРАМИКСОВИРУСЫ.

Также
включены суперкапсидные одетые вирусы.
Сферическаие, геном представлен
однонитевой нефрагментированной
-РНК, связанной с главным нуклеокапсидным
белком NP. Оболочка содержит два
гликопротеида — HN (обладает
гемагглютинирующей и нейраминидазной
активностью), F (ответственен за слияние
клеток — образование синцития и слияние
мембран вируса и клеток, обладает
гемолитической и цитотоксической
активностью), М- белок, формирующий
внутренний слой вирусной оболочки.

Особенность
размножения парамиксовирусов —
отсутствие необходимости в затравочной
мРНК и соответственно — в проникновении
в ярдо клеток. Репликация полностью
реализуется в цитоплазме клеток
хозяина.

Вирусы
парагриппа человека. Возбудитель
ОРЗ.

АГ
структура: На
основе различий АГ структуры HN, F и NP-
белков выделяют 4 серотипа. 1, 2 и 3
антигенно родственны и перекрестно
реагируют с АТ к вирусу паротита. 4 не
имеет выраженного АГ родства с
остальными и имеет два подтипа. 3
вызывает заболевания у детей до 1,5 лет
(бронхиолиты, пневмонии), 1 и 2 вызывают
ложный круп.

Патогенез:
Аналогичный большинству ОРВИ и гриппу.

Лабораторная
диагностика в целом аналогична гриппу.

Вирус
эпидемического паротита (свинки):
Вызывает вирусную инфекцию,
характеризующуюся преимущественным
поражением околоушных слюнных желез.

АГ
структура:
1 серовар. АГ структура аналогична
другим парамиксовирусам.

Патогенез:
Вирус
попадает в эпителий носоглотки, далее
в кровоток. В период вирусемии он
проникает в околоушные железы, яички,
яичники, поджелудочную и щитовидную
железы, головной мозг. Специфическое
поражение — эпидидимит и орхит у
мальчиков, возможно развитие серозных
менингитов, панкреатитов и других
осложнений.

Лабораторная
диагностика:
В случае необходимости используют
вирусологические методы (выделение
вируса на культурах фибробластов или
куриных эмбрионах — из спинномозговой
жидкости, слюны, пунктатов желез),
серологические методы (чаще РТГА или
РСК, ИФА).

Специфическая
профилактика:
Применяются живые аттенуированные
вакцины, специфический донорский
иммуноглобулин, проводится
серопрофилактика.

Вирус
кори.
Род Morbillivirus семейство парамиксовирусов.
По морфологии не отличается от других
представителей. Отсутствует
нейраминидаза. Обладает гемагглютинирующей,
гемолитической и симпластической
активностью. Имеет гемагглютинин,
гемолизин (F), нуклеопротеид (NP) и
матричный белок, отличающиеся АГ
специфичностью и иммуногенностью.
Имеет сероварианты, имеет общие АГ
детерминанты с другими морбилливирусами
(вирус чумы собак, вирус чумы крупного
рогатого скота).

Патогенез:
Размножается в эпителии верхних
отделов дыхательных путей и регионарных
лимфоузлах, затем проникает в кровь,
гематогенно разносится по организму,
фиксируется в ретикуло-эндотелиальной
системе. Вызывает поражения клеток
эндотелия сосудов, сыпь, отек и
некротические изменения тканей.
Осложнения — пневмония, отек гортани,
круп, энцефалит.

Лабораторная
диагностика:

1.Экспресс-диагностика
— обнаружение вирусных АГ методом
флюоресцирующих АТ в пораженных
клетках.

2.
Вирусологическая диагностика —
исследуют кровь до появления сыпи,
слизь из носоглотки заражением культур
клеток. Определяют цитопатический
эффект, идентифицируют вирус в РТГА,
РН и МФА.

3.
Серологические методы — РСК, РТГА, ИФА.

Специфическая
профилактика: Применяют
живые аттенуированные вакцины. У
контактных можно проводить
серопрофилактику противокоревым Ig
или Ig
донорским нормальным.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б20

1.
РАСПРОСТРАНЕНИЕ
ФАГОВ. ЛИЗОГЕНИЯ.

Фаги
встречаются в местах, где есть
чувствительные к ним бактерии. Чем
богаче тот или иной субстрат (почва,
выделения человека и животных, вода)
микроорганизмами, тем в большем
количестве в нём встречаются фаги.
Роль
бактериофагов в:
контроле численности микробных
популяций; автолизе стареющих клеток;
переносе бактериальных генов, выступая
в качестве векторных систем.

Применение
в медицине: Антибактериальная
терапия, альтернативная приёму антибиотиков
(коли, стрептококковый,
стафилококковый,
клебсиеллёзный,
дизентерийный
поливалентный, пиобактериофаг,
протейный, колипротейный бактериофаги).

Фаговая
конверсия —
изменение свойств бактериальной
клетки вследствие встраивания части
генома умеренного бактериофага.

Лизогения
— совместное существование бактерий
и бактериофагов, при котором бактериофаг
является составной частью нормально
развивающейся бактер клетки. При
лизогении нуклеиновая кислота
бактериофага включается в состав
хромосомы бактерии и воспроизводится
вместе с ней. Образуются белки, придающие
бактерии-хозяину новые свойства
(меняют ее вирулентность, чувствительность
к антибиотикам). Фаговые частицы не
образуются.

2.
РЕАКЦИЯ
АГГЛЮТИНАЦИИ.

АГ
в
виде частиц (микробные клетки,
эритроциты) склеиваются с АТ.
Проявляется
образованием хлопьев или осадка.
Компоненты:
1. АГ (агглютиноген); 2. АТ (агглютинин);
3. Электролит (изотонический раствор
NaCl).

Варианты
РА: развернутая, ориентировоч­ная,
непрямая. Реакция агглютинации

РА
используют для: 1. Определения
АТ
в сыворотке
крови боль­ных (бруцеллез — реакции
Райта, Хеддельсона; брюшной тиф и
паратифы — реак­ция Видаля);
2.
Определения
возбудителя,
выделенного от больного;
3.
Определения
групп крови
с использова­нием моноклональных
АТ против алло-АГ эритроцитов.

Развернутая
реакция агглютинации для определения
АТ: к
разве­дениям сыворотки крови больного
добавля­ют диагностикум
(взвесь
убитых микробов,) и через несколько
часов инкубации при 37С отмечают
наибольшее разведение сыворотки (титр
сыворотки), при котором произошла
агглютинация (образование осадока).

Реакция
агглютина­ции с О-диагностикумом
(бактерии,
убитые нагреванием, сохранившие
термостабильный О-АГ)
—
мелкозернис­тая агглютинация.
Реакция агглютинации с Н-диагностикумом
(бактерии, убитые фор­малином,
сохранившие термолабильный жгу­тиковый
Н-АГ) — крупнохлопчатая и протекает
быстрее.

Ориентиро­вочная
реакция агглютинации для определения
возбудителя: применяют
диа­гностические АТ (агглютинирующую
сыворотку), т.е. проводят серотипирование
возбудителя. Проводят на предметном
стекле. К капле диа­гностической
агглютинирующей сыворотки в разведении
1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру
возбудителя. Рядом ставят контроль:
вместо сыворотки наносят каплю раствора
натрия хлорида. При появлении в капле
с сывороткой и микроба­ми хлопьевидного
осадка ставят развернутую
реакцию агглютинации в
пробирках с увели­чивающимися
разведениями агглютинирую­щей
сыворотки, к которым добавляют по 2-3
капли взвеси возбудителя. Агглютинацию
учитывают по количеству осадка и
степени просветления жидкости. Реакция
(+), если агглютинация отмеча­ется в
разведении, близком к титру диагностической
сыворотки. Одновременно учитыва­ют
контроли: сыворотка, разведенная
изото­ническим раствором NaCl,
должна быть прозрачной, взвесь микробов
в том же растворе — равномерно мутной,
без осадка.

Реакция
непрямой (пассивной) гемагглютинации
(РНГА, РПГА):
1. Для обнаружения полисахаридов,
белков, экстрактов бактерий, риккетсий
и вирусов, комплексы которых с
агглютининами в обычных РА увидеть
не удается; 2. Для выявления АТ в
сыворотках больных к этим высокодисперстным
веществам и мельчайшим микроорганизмам.
РНГА
— реакция, в которой АТ взаимодействуют
с АГ, предварительно адсорбированными
на инертных частицах
(латекс,
целлюлоза, полистерол, оксид бария).

В РНГА в качестве носителя используют
нагруженные
АГ эритроциты,
которые
склеиваются в присутствии специфических
АТ к данному АГ и выпадают в осадок.
Сенсибилизированные АГ эритроциты
используют в РНГА как эритроцитарный
диагностикум
для обнаружения АТ (серодиагностика).

3.
СПИРОХЕТЫ: БОРЕЛИИ,
ЛЕПТОСПИРЫ.

Спирохеты
— тонкие, спирально завитые бактерии
длиной до сотен микрометров, подвижные,
грам-, хемоорганотрофы. Медицинское
значение — род Treponema, Borrelia, Leptospira,
Spirillum.

Род
Borrelia.
Возбудители
возвратных тифов (рекуррентных
лихорадок) и боррелиозов.

Морфология
и классификация:
Имеют до 10 неправильной формы крупных
завитков, с вращательно-поступательным
характером движений. Анаэробы, требующие
сложных сред для культивирования.

B.recurrens
передается человеку вшами (эпидемический
или вшивый возвратный тиф). 2
группы боррелиозов человека: Аргасовые
клещевые боррелиозы (12 видов боррелий);
Иксодовые клещевые боррелиозы
(B.burgdorferi, B.garinii, B.afzelii).

Культуральные
свойства:
Необходимы факультативно-анаэробные
условия, температура 33С, специальные
среды (BSK-2), содержащие среду 199, глюкозу,
альбумин, цистеин, кроличью сыворотку,
желатин.

АГ
свойства:
Имеют перекрестно- реагирующие АГ с
другими спирохетами, родо — и
видоспецифические АГ. Выделяют H-
(жгутиковые) флагеллиновые АГ (слабая
специфичность) и поверхностные белковые
АГ (OspA, OspC, более специфичны, используют
для межвидовой и внутривидовой
идентификации).

Патогенез:
После присасывания клеща со слюной
попадают в макроорганизм, размножаются
во входных воротах инфекции, поражая
кожу (эритема) и ближайшие лимфоузлы
(фаза первичной адаптации). Преодолев
кожный и лимфатический барьеры,
попадают в кровь (спирохетемия),
проявляющаяся общетоксическим
синдромом (стадия первичной диссеминации).
Затем проникают в гематотканевые
барьеры (через гематоэнцефалитический
барьер) и вызывают поражение различных
органов и систем.

Эпидемиология:
ИКБ
— облигатно-трансмиссивные природноочаговые
инфекции, распространенные в умеренном
климатическом поясе северного
полушария, связанные с присасыванием
клещей Ixodes. Переносчики — клещи
I.reticulatus (таежный клещ), I.ricinus (европейский
лесной клещ).

Лабораторная
диагностика:
Выделяют с использованием среды BSK2 у
больных из очагов кожных поражений,
из крови и спинно-мозговой жидкости,
при исследовании переносчиков и
теплокровных хозяев (из мочевого
пузыря) в природных очагах.

Выявляют
световой (окраска по Романовскому-Гимзе),
темнопольной, люминесцентной
микроскопиями и ПЦР.

Серологическая
диагностика:
Реакция непрямой иммунофлюоресценции
с корпускулярным АГ B.afzelii, позволяющим
выявлять АТ к боррелиям группы ИКБ.

Лечение:
Предупредительная терапия (при
положительных результатах исследования
присосавшегося клеща) и лечение больных
ИКБ тетрациклинами, пенициллинами и
цефалоспоринами.

Род
Leptospira.
Возбудители зоонозной острой
бактериальной инфекции, харак­теризующейся
волнообразной лихорадкой, интоксикацией,
поражением капилляров печени, почек,
ЦНС.

Возбудитель
— L.
Interrhogans,се­мейство
Leptospiraceae,
poд
Leptospira.

Морфология:
Тонкие
спирохеты, с изогнутыми концами.
Двигательный аппарат — фибрил­лы.
Различимы при микроскопии в темном
поле и фазово-контрасте. Цист не
образуют.

Культуральные
и биохимические свойства:
Аэробы.
Источник углерода и энергии — липиды.
Каталаза-и оксидазаположительны.
Культивируются на питательных средах,
содержащих сыворотку или сывороточный
альбумин, при темпера­туре 30С. На
жидкой питательной среде — отсутствие
помутнения. Делятся поперечным
делением. Растут мед­ленно.

АГ
структура:
Содержат
общеродовой АГ белковой природы,
выявляемый в PCК,
а также вариантоспецифический
повер­хностный АГ липополисахаридной
при­роды, выявляемый в РА. Основной
таксо­н — серовар.
Серовары
объединены в серогруппы (25 серогрупп).

Резистентность:
Чувствитель­ны
к высыханию, нагреванию, низким
зна­чениям рН, дезинфицирующим
веществам. Кипячение убивает микроб
мгно­венно.

Эпидемиология.
Природно-очаговый
зооноз. Передача — фекально-орально.
Источник — грызуны, до­машние животные.

Патогенез
и клиника заболевания:
Инкубационный
период 7-10 дней. Входные ворота —
слизистые оболочки пищеварительного
тракта, поврежденная ко­жа. Проникнув
в организм, микроб с кровью разносится
к органам ретикулоэндотелиальной
системы (печень, почки), где размножа­ется
и вторично поступает в кровь.

Поражает
капилляры печени, почек, ЦНС.

Иммунитет:
Стойкий,
гуморальный, серовароспецифический.

Микробиологическая
диагностика.
Материа­л
— кровь, спин­номозговая жидкость,
моча, сыворотка кро­ви. Бактериоскопический
(обнаружение лептоспир в темнопольном
микроскопе), бактериологический и
серологи­ческие методы (РА, РСК),
ПЦР.

Профилактика
и лечение:
Вакцинация
по эпиде­мическим показаниям убитой
нагреванием, кор­пускулярной
вакциной, содержащей 4 серогруппы
возбудителя. Для лечения — антибиотики
(пенициллин, тетрациклин) в сочетании
с лептоспирозным гетерологичным Ig.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б23

1.
ПЛАЗМИДЫ.

Внехромосомные
мобильные генетические структуры
бактерий. Форма — замкнутые кольца
двунитчатой ДНК. Размеры — 0,1-5 % ДНК
хромосомы. Способны автономно
копироваться и существовать в цитоплазме
клетки, поэтому в клетке может быть
несколько копий плазмид. Могут
включаться в хромосому и реплицироваться
вместе с ней. Трансмиссив­ные плазмиды
передаются из одной бактерии в другую.

Фенотипические
признаки:
Устойчивость
к антибиотикам;
образование
колицинов;
продукция
факторов патогенности;
способность
к синтезу антибиотических веществ;
расщепление
сложных органических веществ;
образование
ферментов рестрикции и модификации.

Плазмиды
обозначают половой фактор бак­терий.
Несут гены, не обязательные для
клетки-хозя­ина, придают бактериям
дополнительные свойства, которые в
условиях окружающей среды обеспечивают
их вре­менные преимущества по
сравнению с бесплазмидными бакте­риями.

Плазмиды
под стро­гим
контролем
— их реплика­ция сопряжена с репликацией
хромосомы так, что в каждой бактериальной
клетке присутс­твует одна или, по
крайней мере, несколько копий плазмид.

Плазмиды
под слабым
контролем
— их число
может
достигать от 10 до 200 на бактериальную
клетку.

Для
характеристики плазмидных репликонов
их принято разбивать на группы
совмести­мости. Несовместимость
плазмид
связана с не­способностью двух
плазмид стабильно сохра­няться в
одной и той же бактериальной клетке.
Несовместимость свойственна тем
плазмидам, которые обладают высоким
сходством репликонов, поддержание
которых в клетке регули­руется одним
и тем же механизмом.

Интегративные
плазмиды (эписомы)
— могут обратимо встраиваться в
бактериальную хромосому и функционировать
в виде единого репликона.

R-плазмиды
(несу­т
гены)
— множественная устойчивость к
лекарственным препаратам — антибиотикам,
сульфаниламидам. F-плазмиды
(половой
фактор бактерий)
— определяют способность бактерий к
конъюгации и образованию половых
пилей. Ent-плазмиды
— детерминируют
продукцию энтеротоксина.

Плазмиды
определяют вирулентность бактерий;
определяют способность почвенных
бак­терий использовать необычные
источники углерода; контроли­руют
синтез белковых антибиотикоподобных
веществ — бактериоцинов.

Плазмиды
подвержены рекомбинациям, мутациям,
могут быть элиминированы (удалены) из
бактерий.

2.
ИММУНИТЕТ.

Невосприимчивость,
сопротивляемость организма к инфекциям
и инвазиям чужеродных организмов, а
также воздействию чужеродных веществ,
обладающих АГ свойствами. Иммунные
реакции возникают и на собственные
клетки организма, измененные в АГ
отношении.

Обеспечивает
гомеостаз организма на клеточном и
молекулярном уровне. Реализуется
иммунной системой.

Биологический
смысл иммунитета — обеспечение
генетической целостности организма
на протяжении его индивидуальной
жизни.

Врождённый
иммунитет (неспецифический,
конституционный) обусловлен
анатомическими, физиологическими,
клеточными или молекулярными
особенностями, закрепленными
наследственно. Не имеет строгой
специфичности к антигенам, и не обладает
памятью о первичном контакте с
чужеродным агентом.

Приобретенный
активный иммунитет возникает после
перенесенного заболевания или после
введения вакцины.

Приобретенный
пассивный иммунитет развивается при
введении в организм готовых АТ в виде
сыворотки или передаче их новорожденному
с молозивом матери или внутриутробным
способом.

Естественный
иммунитет включает врожденный иммунитет
и приобретенный активный (после
перенесенного заболевания). А также
пассивный при передаче АТ ребёнку от
матери.

Искусственный
иммунитет включает приобретенный
активный после прививки (введение
вакцины) и приобретенный пассивный
(введение сыворотки).

Местный
иммунитет
(обеспечивают IgA) — комплекс приспособлений,
который защищает поверхности,
соприкасающиеся с внешней средой, от
чужеродных биологических агентов.
Местный иммунитет участвует в
поддержании постоянства внутренней
среды организма, его целостности и
является частью общего иммунитета.

3.
СТОЛБНЯК.

Возбудитель
— Clostridium
tetani,
характеризуется по­ражением нервной
системы, приступами тоничес­ких и
клонических судорог.

Таксономия:
Отдел Firmicutes,
род Clostridium.

Морфологические
свойства:
Подвиж­ная (перитрих) грам6 палочка,
об­разует споры, чаще круглые, реже
овальные, споры располо­жены
терминально. В культуре старше 24 ч
бактерии становятся грам-. Капсул не
образуют.

Культуральные
свойства: Облигатный
анаэроб. На жидких питательных средах
бактерии растут придонно, продуцируя
сильный экзотоксин. На плотных
питательных средах образуют прозрачные
или слегка сероватые колонии с
шероховатой поверхностью. Не расщепляют
углеводов, обладают слабым протеолитическим
действием.

АГ
структура и токсинообразование:
По жгутиковому Н-АГ делится на 10
сероваров; О-АГ является общим для
всех представителей вида. Воз­будитель
продуцирует два патогенных растворимых
АГ (столбнаяный экзотоксин) — тетанолизин
и тетаноспазмин.

Факторы
патогенности:
Основной фактор — экзотоксин. Тетанолизин
и тетаноспазмин оказы­вают
гемолитическое (лизис эритроци­тов)
и спастическое (непроизвольное
сокращение мышц) действие.

Резистентность:
В виде спор могут сохраняться годами.
Споры термоустойчивы: при кипячении
погибают через 50-60 мин.

Эпидемиология
и патогенез:
Заражение происходит при проникно­вении
возбудителя в организм через дефекты
кожи и слизистых оболочек при ранениях,
ожогах, обморожениях, через операционные
раны, после инъ­екций. При инфицировании
пуповины возможно развитие стол­бняка
у новорожденных (пупочный столбняк).

Патогенез:
Главный фактор — столбнячный токсин.
Палочки столбняка остаются в раневой
ткани и не распространяются по
организму. От места размножения
возбудителя токсин распро­страняется
по кровеносным и лимфатическим сосудам,
по не­рвным стволам, достигает
спинного и продолговатого мозга и
поражает нервные окончания синапсов,
секретирующих меди­аторы (ацетилхолин),
в результате чего нарушается про­ведение
импульсов по нервным волокнам.

Клиника:
Инкубационный период — 6- 14 дней.
Наблюдаются спазм жевательных мышц,
затрудненное глотание, напряжение
мышц затылка, спины (опистотонус),
груди и живота. Характерны постоянные
мышечные боли, по­вышенная
чувствительность к различным
раздражителям, час­тые генерализованные
судороги. Болезнь протекает при
повы­шенной температуре тела и ясном
сознании.

Иммунитет:
Не вы­рабатывается. От матери,
вакцинированной против столбняка,
новорожденным передается непродолжительный
пассивный ан­титоксический иммунитет.

Микробиологическая
диагностика.
Для бактериологического исследования
берут материал из раны и очагов
воспаления, а также кровь. В культурах
выявляют стол­бнячный токсин, проводя
опыт на мышах. Обнаружение столбняч­ного
токсина при наличии грам+ палочек с
круг­лыми терминальными спорами
позволяет сделать заключение, что в
исследуемом материале присутствует
С. tetani.

Лечение:
Адсорбированный
столбнячный анатоксин. Получен
путем обезвреживания формалином
столбнячного токсина с последую­щей
его очисткой, концентрацией и адсорбцией
на гидрате оксида алюминия. Входит в
состав ассоциированной
коклюшно-дифтерийно-столбнячной
вакцины и других препаратов. Приме­няется
для активной иммунизации против
столбняка.

Противостолбнячная
сыворотка. Получена
из крови лоша­дей, гинериммунизированных
столбнячным анатоксином. Применяется
для профилактики и лечения столбняка.

Иммуноглобулин
человеческий противостолбнячный.
Полу­чен
из гамма-глобулиновой фракции крови
людей-доноров, ревакцинированных
очищенным столбнячным анатоксином.
Применяется для пассивной экстренной
профилактики столбняка в сочетании
со столбнячным анатоксином при
повреждениях кожных покровов, а также
для лечения начав­шегося заболевания.

Профилактика:
Специфическая профилактика — проведение
плановой и эк­стренной иммунизации.
Экстренная пассивная иммунизация
осуществляется у привитых детей и
взрослых в случаях травм, ожогов и
обморожений путем введения 0,5 мл
сорбированного столбняч­ного
анатоксина; непривитым вводят 1 мл
столбнячного анаток­сина и человеческий
иммуноглобулин. Для создания
искусственного активного иммунитета
применяют адсорбированный столбнячный
анатоксин в составе вакцин АКДС и АДС
или секстанатоксина. Вакцинацию
начинают с 3-5-месячного возраста и
затем пе­риодически проводят
ревакцинации.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б26

1.
САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОИЕ
ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ, ВОЗДУХА.

Загрязненность
воды
определяется по обнаружению
санитарно-показательных
микроорганизмов —
индикаторов наличия выделений человека
или животных. В воде регистрируют
кишечную
палочку, БГКП (бактерии группы кишечной
палочки — колиформные палочки),
энте­рококк, стафилококки.

На
основании количественного выявле­ния
санитарно-показательных бак­терий
вычисляются индекс
БГКП (число
БГКП в 1 л воды), перфрингенс-титр,
титр энтерококка.
Титр энтерококка воды — наименьшее
количество воды, в котором определяется
энтерококк.

К
БГКП относят грам- палочки, сбра­живающие
с образованием кислоты и газа лактозу
или глюкозу при температуре 37С в
течение 24-48 ч и не обладающие оксидазной
активностью. Этот показатель применяют
как индикатор фекального за­грязнения
воды. Другой показатель фекального
загрязнения — общие колиформные
бактерии (enterobacteriaceae):
грам-, оксида-заотрицательные палочки,
ферментирующие лактозу или маннит
(глюкозу) с образованием альдегида,
кислоты и газа при температуре 37С в
течение 24 ч. Расту­т на лактозосодержащих
средах (среда Эндо).

При
бактериальном загрязнении воды свыше
допустимых норм следует провести
дополни­тельное исследование на
наличие бактерий — показателей свежего
фекального загрязнения. К таким
бактериям относят термотолерантные
колиформные бактерии, фекальные
кишечные палочки, ферментирующие
лактозу до кислоты и газа при температуре
44С в течение 24 ч и не растущие на
нитратной среде. О свежем фекальном
загрязнении свидетельствует также
выявление энтерококка.
На
давнее фекальное загрязнение указывают
отсутствие БГКП и на­личие определенного
количества клостридии
перфрингенс (устойчивых
споро-образующих бактерий).

Нормати­вы
микробиологических показателей
питьевой воды при централизованном
водоснабжении:

1.
Общее микробное число воды — не
больше 100 микробов в 1 мл воды;

2.
Общие колиформные бактерии —
нет в 100 мл воды;

3.
Термотолерантные колиформные бактерии
—
нет в 100 мл воды;

4.
Колифаги — нет
в 100 мл воды (учет по бляшкообразующим
единицам);

5.
Споры сульфитредуцирующих клостридий
— нет в 20 мл воды;

6.
Цисты лямблий — нет
в 50 мл воды.

Загрязненность
воды оценива­ется по обнаружению
патогенных микробов с фекально-оральным
механизмом переда­чи (энтеровирусы,
энтеробактерии, холерные вибрионы).

Контроль
возду­ха
проводится с помощью методов
естест­венного или принудительного
оседания микробов. Естественное
оседание
(по методу Коха) проводится в течение
5-10 мин путем осаждения микробов на
поверхность твердой питательной среды
в чашке Петри. Принудительное
оседание
микробов осуществляется путем посева
проб воздуха на питательные среды с
помощью специаль­ных приборов:
Импактор
—
при­нудительное осаждение микробов
из воздуха на поверхность питательной
среды (прибор Кротова); Импшджер
—
воздух проходит через жидкую питательную
среду или изотоничес­кий раствор
NaCl.

Санитарно-гигиеническое
состояние воз­духа:

1.
Общее количество микроорганизмов в
1 м³
воздуха
— коли­чество колоний микроорганизмов,
выросших при посеве воздуха на
питательном агаре в чашке Петри в
течение 24 ч при 37С, выра­женное в
колониеобразующих еденицах;

2.
Индекс санитарно-показательных
микро­бов — количество
золотистого стафилококка и гемолитических
стрептококков в 1 м³
воздуха. Эти бактерии представители
мик­рофлоры верхних дыхательных
путей. Появление в воздухе спорообразующих
бактерий — показатель загрязненности
воздуха микроорганизмами почвы, а
появление грам- бактерий — показатель
антисанитарного состояния.

2.
ВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ.

Факторы
специфичности вирусов. Вирулентность
вирусов.

• Количество
специфических рецепторов, обеспечивающих
взаимодействие вируса с клеткой
ограничено.

• Наличие
в геномах чувствительных клеток
соответствующих промоторов,
обеспечивающих полноценную репродукцию
возбудителя.

• G-белок
(основной протеин оболочки) вируса
бешенства обладает высоким сродством
к ацетилхолиновым рецепторам нейронов,
что обеспечивает его способность
проникать в клетки нервной ткани.
Нейротропные вирусы вызывают тяжёлые
заболевания, т.к. нервные клетки не
регенерируют. Репродукция возбудителя
делает их мишенями для цитотоксических
иммунных реакций.

Патогенез
вирусных инфекций — взаимодействие
генома вируса с генетическим аппаратом
чувствительной клетки. Сопровождается
вирусемией — циркуляция возбудителя
в крови. В кровоток возбудитель
проникает прямым путем или из
лимфатической системы. Вирусы (ВИЧ,
вирусы гриппа, кори, герпеса) поражают
иммунокомпетентные клетки, что
проявляется в нарушении функций и
уменьшении числа Т-хелперов, увеличении
содержания и активации Т-супрессоров
или В-клеток. Возбудители образуют
внутриядерные или цитоплазматические
тельца включений (тельца Бабеша-Негри),
имеющие диагностическое значение.

Этапы
патогенеза вирусных инфекций

Проникновение
вируса в организм. Входные ворота —
дыхательные пути, ЖКТ, кожные покровы.
Распространение возбудителя в организме
может носить локальный или системный
характер.

Локальные
поражения вирусами типичны для
возбудителей респираторных и кишечных
инфекций, и для некоторых кожных
заболеваний. Инкубационный период
инфекций 2-3 сут. Первичную репликацию
сопровождает вирусемия. Она протекает
бессимптомно или по типу продромальных
явлений, но может возникать и на фоне
выраженной клинической картины, не
вызывая развития дополнительной
симптоматики. Для подобных заболеваний
характерно повторное заражение, т.к.
циркулирующие AT не проявляют протективный
эффект, а секреторный IgA оказывает
лишь кратковременное нейтрализующее
действие на слизистой оболочке.

Системные
поражения — из места проникновения
возбудители попадают в кровоток,
вызывая вирусемию, и фиксируются в
чувствительных тканях. Первичное
распространение вызывает продромальные
явления. Инкубационный и продромальный
период до 2-3 нед.

Вирусемия
при системных инфекциях носит
двухэтапный характер. Первый этап
заканчивается поглощением циркулирующих
вирусов клетками ретикулоэндотелиальной
системы.

Основные
органы-мишени. Полиовирусы способны
вызывать поражения ЖКТ, а вирус
эпидемического паротита обладает
тропностью к эпителию извитых канальцев
яичек.

3.
ТУБЕРКУЛЁЗ.

Хроническое
заболевание, сопровождающееся
поражением органов дыхания, лимфатичес­ких
узлов, кишечника, костей и суставов,
глаз, кожи, почек и мочевыводящих
путей, половых органов, центральной
нервной системы.

Возбудители
3 вида микобактерий: M.tuberculosis
— человеческий, M.bovis
— бычий, M.africanum
— промежуточный.

Таксономия:
Отдел Firmicutes,
род Mycobacterium.
Родовой признак: кислото-, спирто- и
щелочеустойчивость.

Морфология,
тинкториальные и культуральные
свойства:
Полиморфизм. Форма длинных, тонких
(М.tuberculosis)
или коротких, толстых (M.bovis),
прямых или слегка изогнутых палочек
с гомогенной или зернистой цитоплазмой;
грам+, неподвижны, спор не образуют,
имеют микрокапсулу. Выявление окраской
по Цилю-Нильсену. Образуют морфовары
(L-формы
бак­терий), которые персистируют в
организме и индуцируют противотуберкулезный
иммунитет.

М.tuberculosis
— аэробы, глицеринзависимы. На жидких
питательных средах дают рост в виде
сухой пленки кремового цвета. При
внутриклеточном развитии и при росте
на жидких средах выявляется характерный
корд-фактор, благодаря которому
микобактерии растут в виде жгутов. На
плотных средах рост в виде кремового,
сухого чешуйчатого налета с неровными
краями (R-формы).
По мере роста колонии приоб­ретают
бородавчатый вид. Под влиянием
антибактериальных средств возбудители
изменяют культуральные свойства,
образуя гладкие колонии (S-формы).
M.bovis
— растут на средах медленнее,
пируватзависимы; на плотных питательных
средах образуют мелкие шаровидные,
серовато-белые колонии (S-формы).

Ферментная
активность:
Высокая каталазная и пероксидазная
активность. Каталаза термолабильна.
М.tuberculosis
синтезирует ниацин (никотиновая
кислота), который накапливается в
культуральной среде и определяется
в пробе Конно.

Химический
состав:
Основные компо­ненты — белки, углеводы,
липиды. Липиды (фосфатиды, корд-фактор,
туберкулостеариновая кислота) —
устойчивость к кислотам, спиртам,
щелочам, препятствуют фагоцитозу,
нарушают проницаемость лизосом,
вызывают развитие специфи­ческих
гранулем, разрушают митохондрии
клеток. Микобактерии индуцируют
развитие ГЗТ (туберкулин).

Факторы
патогенности:
Прямое или иммунологически опосредованное
действие липидов и липидсодержащих
структур.

АГ
структура:
При забо­леваниях к АГ образуются
антипротеиновые, антифосфатидные и
антиполисахаридные АТ, свидетельствующие
об активности процесса.

Резистентность:
Благодаря липидам, устойчивы к действию
небла­гоприятных факторов. Высушивание
не влияет. Погибают при кипячении.

Эпидемиология:
Источник — человек, больной туберкулезом
органов дыхания, выделяющий микробы
в окружающую среду. Пути передачи —
воздушно-капельный и воздушно-пылевой.

Патогенез
и клиника:
Возникновению заболевания способствуют
иммунодефициты. Инкубационный период
от 3-8 нед. до 1 года. В развитии болезни
выделяют первичный, вторичный и
диссеминированный туберкулез. В зоне
проникновения микобак­терий возникает
первичный туберкулезный комплекс,
со­стоящий из воспалительного очага,
пораженных регионарных лимфатичес­ких
узлов и измененных лимфатических
сосудов между ними. Диссеминация
микробов происходит бронхо-, лимфо- и
гематогенно.
В
основе специфического воспаления при
туберкулезе лежит ГЗТ, что препятствует
рас­пространению микробов по
организму.

Иммунитет:
Противотуберкулезный иммунитет
нестериль­ный инфекционный, обусловлен
наличием в организме L-форм
микобактерий.

Микробиологическая
диагностика.
К методам обследования относится
бактериоскопическое, бактериологическое
исследование, биологическая проба,
туберкулинодиагностика, основанная
на определении повышенной чувствительности
организма к туберкулину. Все методы
направлены на обнаружение микобактерий
в патологическом материале: мокроте,
промывных водах бронхов, плевральной
и церебральной жидкостях, кусочках
тканей из органов.

Для
вы­явления инфицирования и
аллергических реакций ставят
внутрикожную пробу Манту с очищенным
туберкулином в стандартном разведе­нии.
Для экспресс-диагностики туберкулеза
применяют РИФ и ПЦР.
Для
раннего выявле­ния туберкулеза
используют ИФА, направленный на
обнаружение специфических АТ.

Лечение:
Противотуберкулезные препараты:
группа А — изониазид, рифампицин; группа
В — пиразинамид, стрептомицин, флоримицин;
группа С — ПАСК, тиоацетозон.

Профилактика:
Проводят путем введения живой вакцины
— БЦЖ, внутрикожно на 2-5й день после
рождения ребенка. Ставят пробу Манту
для выявления туберкулиннегативных
лиц, подлежащих ревакцинации.

—

—

Б29

1.
ФИЗИЧЕСКИЕ И ХИМИЧЕСКИЕ ДЕЙСТВИЯ НА
КЛЕТКУ.

Физическое
действие.

Температура.
Психрофилы
(растущие при низкой t).
Группа сапрофитов — обитатели почвы,
морей, пресных водоемов и сточных вод
(железобактерии, псевдомонады,
све­тящиеся бактерии, бациллы).
Некоторые патогенные бакте­рии
(возбудитель псевдотуберкулеза
размножается при t
4С). Интервал t,
при кото­ром возможен рост бактерий
— от -10 до 40С, температурный оптимум —
от 15 до 40С.

Мезофилы
(растущие при средней t
37С).
Группа патогенных и услов­но-патогенных
бактерий. Растут в диапазоне t
10-47С; оптимум роста 37С.

Термофилы
(растущие при высокой t).
При высоких t
— от 40 до 90С. На дне океана в горячих
сульфидных водах живут бактерии,
развивающиеся при t
250-300С и давлении 262 атм. Участвуют в
процессах самонагревания на­воза,
зерна, сена. Показатель загрязненности
почвы.

Микроорганизмы
выдерживают действие низких t,
их можно хранить в замороженном
со­стоянии, и при t
жидкого газа (—173С).

Высушивание.
Обезвоживание вызывает нарушение
функ­ций микроорганизмов. Наиболее
чувствительны патогенные микроорганизмы
(возбудители гоно­реи, менингита,
холеры, брюшного тифа, дизентерии).
Устойчивые микроорганизмы — защищенные
слизью мокроты.

Высушивание
под вакуумом из замороженного состояния
— лиофилизацию — используют для продления
жизнеспособнос­ти, консервирования
микроорганизмов. Лиофилизированные
куль­туры микроорганизмов и
иммунобиологические препараты
дли­тельно сохраняются, не изменяя
своих первоначальных свойств.

Излучения.
Неионизирующее — УФ и ИК лучи солнечного
света, и ионизирующее — гамма-излучение
радиоактивных ве­ществ и электроны
высоких энергий губительно действуют
на микроорганизмы. УФ-лучи применяют
для обеззараживания воздуха в больницах
(бактерицидные лампы УФ-излучения с
длиной волны 200-450 нм).

Ионизирующее
излучение применяют для стерилизации
од­норазовой пластиковой
микробиологической посуды, питатель­ных
сред, перевязочных материалов,
лекарственных препаратов. Имеются
бактерии, устойчивые к действию
иони­зирующих излучений — Micrococcus
radiodurans,
была вы­делена из ядерного реактора.

Химическое
действие.
Хим
вещества: служат источ­ником питания;
не оказывают влияния; стимули­руют
или подавляют рост. Хим вещества,
уничтожающие микроорганизмы в
окружающей среде — дезинфицирующие
(хлор-, йод-, бромсодержащие соединения
и окислители). Антимикробные хи­м
вещества обладают бактерицидным,
вирулицидным, фунгицидным действием.

Антимикробным
действием обладают кислоты и их соли
(оксолиновая, салициловая, борная);
щелочи (аммиак и его соли).

Стерилизация.
Полная инактивация микробов в объектах,
подвергшихся обработке.

Дезинфекция.
Обработка загрязненного микробами
предмета с целью уничтоже­ния
микробов до такой степени, чтобы они
не смогли вызвать инфекцию при
использовании дан­ного предмета.
Некоторые резистентные вирусы могут
остаться в жизнеспособном состоянии.

Асептика.
Предупреждение попадания возбудителя
инфекции в рану, органы больного при
операциях, лечебных и диагностических
процедурах. Методы асептики применяют
для борьбы с экзогенной инфекцией,
источниками которой являются больные
и бактерионосители.

Антисептика.
Уничтожение микробов в ране,
патологическом очаге или организме
в целом. Предупреждение или ликвидация
воспалительного процесса.

2.
АГ
БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ.

АГ
— биополимер органической природы,
генетически чужеродный для организма,
который при попадании распознаётся
его иммунной системой и вызывает
иммунные реакции, направленные на его
устранение.

Свойства
АГ: антигенность,
специфичность,
иммуногенность.

Антигенность.
Способность
молекулы АГ акти­вировать компоненты
иммунной системы и специфически
взаимодействовать с фактора­ми
иммунитета (АТ, клон эффекторных
лимфоцитов). АГ выступает специфическим
раздражителем по отношению к
иммунокомпетентным клет­кам. При
этом
взаимодействие компонентов иммунной
системы происходит не со всей молекулой
одновременно, а только с не­большим
участком (АГ
детерминанта или
эпитоп).

АГ
бактериальной клетки.

Жгутиковые
(Н-АГ)
локализуют­ся
в жгутиках. Эпитопы сократительного
белка флагеллина. При на­гревании
флагеллин денатурирует — Н-АГ теряет
свою специфичность. Фенол не действует
на H-АГ.

Соматический
(О-АГ)
связан
с клеточной стенкой бактерий. Основу
со­ставляют липополисахариды. О-АГ
термос­табилен — не разрушается при
кипячении. О-АГ подвержен действию
альдегидов (формалина) и спиртов,
которые нарушают его структуру.

Капсульные
(К-АГ)
располагаются
на поверхности клеточной стенки. У
бактерий, образующих капсулу. К-АГ
состоят из кислых полисахаридов
(уроновые кислоты). У бациллы сибирской
язвы К-АГ построен из полипептидных
цепей. По чувствительности к нагреванию
различают типы: А, В, L.
Наибольшая термостабильность — тип
А, не денатурирует при кипячении. Тип
В выдержи­вает непродолжительное
нагревание до 60С. Тип L
быстро разрушается при этой t.
Поэтому частичное удале­ние К-АГ
возможно путем кипячения бактериальной
культуры.

Vi-АГ
(АГ вирулентности)
— разновидность капсульного АГ — на
поверхности возбудителя брюшного
ти­фа и других энтеробактерий,
которые облада­ют высокой
вирулентностью.

АГ
свойствами обладают бактериальные
белковые
токсины, ферменты и
другие белки, которые секретируются
бактериями в окружающую среду
(туберкулин). При взаимодействии со
специфическими АТ токсины, фер­менты
теряют свою активность. Столбнячный,
дифтерий­ный, ботулинический токсины
сильные полноценные АГ, их используют
для получения анатокси­нов для
вакцинации.

Протективные
АГ
— АГ с сильно выра­женной иммуногенностью,
чья биологическая активность играет
роль в формиро­вании патогенности
возбудителя. Являют­ся субъединицей
белкового токсина, которая ответственна
за активацию вирулентных субъединиц
— отечного
и
летального
факторов.

3.
ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ.

Возбудитель
— лимфотропный вирус. Семейство
Retroviridae
род
Lentivirus.

Морфологические
свойства:
РНК-содержащий
вирус. Сферической формы. Оболочка
состоит из двойного слоя липидов,
пронизанного гликопротеинами. Липидная
оболочка проис­ходит из плазматической
мембраны клетки хозяина, в которой
репродуцируется вирус. Гликопротеиновая
молекула состоит из 2 субъединиц,
находящихся на поверхности вириона
и пронизывающих его липидную оболочку.

Сердцевина
вируса конусовидной формы, состоит
из капсидных белков, ряда матриксных
белков и белков протеазы. Геном образует
2 нити РНК. Для процесса репродукции
ВИЧ имеет обратную транскриптазу.

Геном
вируса состоит из 3 основных струк­турных
генов и 7 регуляторных и функциональных
генов. Функциональные ге­ны выполняют
регуляторные функции и обеспечивают
осуществление процессов репродукции
и участие вируса в инфекционном
процессе.

Поражает
Т- и В-лимфоциты, некоторые клетки
моноцитарного ряда (макрофаги,
лейкоциты), клетки нервной системы.

Культуральные
свойства:
На культуре клеток Т-лимфоцитов и
моноцитов человека (в присутствии
ИЛ-2).

АГ
структура:
2 типа — ВИЧ-1, ВИЧ-2. ВИЧ-1 имеет 10 генотипов
(субтипов): А, В, С, D,
E,
F…
отличающихся между собой по
аминокислотному составу белков.

ВИЧ-1
делят на 3 груп­пы: М, N,
О. Большинство изолятов относится к
группе М, в которой выделяют 10 подти­пов:
А, В, С, D,
F—l,
F-2,
G,
Н, I,
К.

Резистентность:
Чувствителен
к физическим и химическим факторам,
гибнет при нагревании. Вирус может
сохраняться в высушенном состоянии,
в высохшей крови.

Факторы
патогенности, патогенез:
ВИЧ
прикрепляется к лимфоциту, проникает
в клетку и репродуцирует в лимфоците.
В результате размножения ВИЧ в лимфоците
последние раз­рушаются или теряют
свои функциональные
свойства. В результате размножения
вируса в раз­личных клетках происходит
накопление его в органах и тканях, и
он обнаруживается в крови, лимфе,
слюне, моче, поте, каловых массах.

При
ВИЧ-инфекции
снижается число Т-4-лимфоцитов,
на­рушается функция В-лимфоцитов,
подавля­ется функция естественных
киллеров и ответ на АГ снижается и
нару­шается продукция комплемента,
лимфокинов, в результате чего наступает
дисфункция иммунной системы.

Клиника:
Поражается дыхательная система
(пнев­мония, бронхиты); ЦНС (абсцес­сы,
менингиты); ЖКТ (диареи), возникают
злокачествен­ные новообразования
(опу­холи внутренних органов).

Стадии
ВИЧ-инфекции: 1. Инкуба­ционный период
2-4 недели; 2. Стадия первичных проявлений,
характеризующаяся вначале острой
лихорад­кой, диареей; завершает­ся
стадия бессимптомной фазой и
персистенцией вируса, восстановлением
самочувствия, однако в крови определяются
ВИЧ-АТ; 3. Стадия вторичных заболеваний,
проявляющихся поражением дыхатель­ной,
нервной системы; 4. Терминальная стадия
— СПИД.

Микробиологическая
диагностика.

Вирусологические
и серологические ис­следования
включают методы определения АГ и АТ
ВИЧ.
Исполь­зуют
ИФА, ИБ, ПЦР. Сыворотки больных ВИЧ-1 и
ВИЧ-2 содержат АТ ко всем вирусным
белкам. Для подтверждения диагноза
определяют АТ к белкам gp41,
gpl20,
gpl60,
p24
у ВИЧ-1 и АТ к белкам gp36,
gpl05,
gpl40
у ВИЧ-2. ВИЧ-АТ появляются через 2-4
недели пос­ле инфицирования и
определяются на всех стадиях ВИЧ.

Метод
выявления вируса
в крови, лим­фоцитах. Для подтверждения
результатов ставится ре­акция ИБ.
Применяют ПЦР, способ­ную выявлять
ВИЧ в инкуба­ционном и раннем
клиническом периоде, ее чувствительность
ниже, чем у ИФА.

Клинический
и серологический диагнозы подтверждаются
иммунологическими иссле­дованиями,
если они указывают на наличие
иммунодефицита у обследуемого пациента.

Диагностическая
иммуноферментная тест-система для
определения антител к ВИЧ — включает
вирусный АГ, адсорбированный на
носителе, АТ против Ig
человека. Используется для серодиагностики
СПИДа.

Лечение:
Применение
ингибиторов обратной транскриптазы,
действующих в активирован­ных
клетках. Препараты являются производные
тимидина — азидотимидин, фосфазид.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б32

1.
МОРФОЛОГИЯ ГРИБОВ.

Царство
Fungi
(Mycetes,
Mycota).
Мно­гоклеточные или одноклеточные
нефотосинтезирующие (бесхлорофильные)
эукариотические микроорганизмы с
клеточной стенкой.

Классификация
грибов.

Фикомицеты:
Хитридиомицеты
(водные грибы) — ведущие сапрофитический
образ жизни или поражающие водо­росли;
Гифохитридиомицеты
— сходство с хитридиомицетами и
оомицетами; Оомицеты
— паразиты высших растений и водяные
плесени; Зигомицеты
включают грибы рода Mucor,
распространенных в почве и воздухе и
способных вызывать мукоромикоз легких,
го­ловного мозга. При бесполом
размножении на плодоносящей
гифеспорангиеносце образуется
спорангий — ша­ровидное утолщение
с оболочкой, содержащее споры. Половое
размножение (оогамия) у зигомицетов
осуществляются путем образования
зигоспор или ооспор.

Эумицеты:
Аскомицеты
(сумчатые грибы) — грибы имеющие
септированный мицелий и отличающиеся
способностью к половому размножению.
К аскомицетам относятся род Aspergillus,
Penicillium,
отличающиеся особенностями формирования
плодоносящих гиф. У Aspergillus
(леечная плесень) на концах пло­доносящих
гифконидиеносцев имеются утолщения
— стеригмы, на которых образуются
цепочки спор — конидии (вызывают
аспергиллёзы).

Плодоносящая
гифа у рода Penicillium
(кистевик) на­поминает кисточку,
т.к. из нее (на конидиеносце) образуются
утолщения, разветвляющиеся на мелкие
структуры — стеригмы, на которых
находятся цепочки конидий (вызывают
пенициллинозы).

Дрожжи
— представители аскомицетов —
одноклеточные грибы, не образующие
истинного мицелия. Размножаются
поч­кованием, бинарным делением
или половым путем с образованием
аскоспор. Не имеют псевдомицелия и
хламидоспор. К аскомицетам относится
возбудитель эрготизма (спорыньи —
Claviceps
purpurea),
паразити­рующий на злаках.

Базидиомицеты
— совершенные грибы — шляпочные грибы
с септированным ми­целием.

Дейтеромицеты
— несовершенные грибы (Fungi
imperfecti)
— условный класс грибов, объединяющий
грибы с сеп­тированным мицелием, не
имеющих полового размножения.
Размножаются бесполым путем, образуя
конидии.

Несовершенные
грибы — род Candida.
Дрожжеподобные. По­ражают кожу,
слизистые оболочки, внутренние органы
(кандидоз). Имеют овальную форму,
диаметр 2-5 мкм; делятся почкованием
(бластоспоры), образуют псевдомицелий
(почкующиеся клетки из ростковой
трубочки вытягиваются в нить), на
концах которого находятся хламидоспоры.

2.
ТОКСИНЫ БАКТЕРИЙ.
Экзотоксины
продуцируют
грам+ и грам- бактерии. По химической
структуре — белки. По механизму действия
экзотоксина на клетку: цитотоксины,
мембранотоксины, функциональные
блокаторы, эксфолианты и эритрогемины.
Механизм действия белковых токсинов
сводится к повреждению процессов в
клетке: повышение проницаемости
мембран; блокада синтеза белка и;
нарушение взаимодействия и
взаимокоординации между клетками.
Экзотоксины — сильные АГ, которые и
продуцируют образование в организме
антитоксинов.
По молекулярной
организации делятся на:

•
экзотоксины
состоящие из двух фрагментов;

•
экзотоксины,
составляющие единую полипептидную
цепь.

По
степени связи с бактериальной клеткой:

•
Класс
А — токсины, секретируемые во внешнюю
среду;

•
Класс
В — токсины частично секретируемые и
частично связанные с микробной клеткой;

•
Класс
С — токсины, связанные и с микробной
клеткой и попадающие в окружающую
среду при разрушении клетки.

Экзотоксины
обладают высокой токсичностью. Под
действием формалина и t
экзотоксины утрачивают свою токсичность,
но сохраняют иммуногенное свойство
— анатоксины — применяются для
профилактики заболевания столбняка,
гангрены, ботулизма, дифтерии,
используются в виде АГ для иммунизации
животных с целью получения анатоксических
сывороток.

Эндотоксины
по
хим структуре — липополисахариды,
которые содержатся в клеточной стенке
грам- бактерий и выделяются в окружающую
среду при лизисе бактерий. Не обладают
специфичностью, термостабильны, менее
токсичны, обладают слабой иммуногенностью.
При поступлении в организм больших
доз — угнетают фагоцитоз, гранулоцитоз,
моноцитоз, увеличивают проницаемость
капилляров, оказывают разрушающее
действие на клетки. Микробные
липополисахариды разрушают лейкоциты
крови, вызывают дегрануляцию тучных
клеток с выделением вазодилататоров,
активируют фактор Хагемана, что
приводит к лейкопении, гипертермии,
гипотонии, ацидозу, дессиминированной
внутрисосудистой коагуляции.
Эндотоксины
стимулируют синтез интерферонов,
активируют систему комплемента по
классическому пути, обладают
аллергическими свойствами.
При
введении небольших доз эндотоксина
повышается резистентность организма,
усиливается фагоцитоз, стимулируются
В-лимфоциты. Сыворотка животного
иммунизированного эндотоксином
обладает слабой антитоксической
активностью и не нейтрализует
эндотоксин.
Патогенность бактерий
контролируется тремя типами генов:
гены — собственной хромосомами, гены
привнесенные плазмидами умеренными
фагами.

3.
СЫПНОЙ ТИФ. БОЛЕЗНЬ БРИЛЛА-ЦИНСЕРА.

Эпидемический
сыпной тиф
—
острый антропоноз с трансмиссивным
механизмом распространения платяными
вшами.

Таксономия
и общая характеристика:
Возбудитель
— R.prowazekii,
род
Rickettsia
семейство
Rickettsiaceae;
паразитирует в цитоплазме чувствительных
клеток. Хорошо культивируется в
организме платяных вшей, желточных
мешках, обладает гемолити­ческими
свойствами, способен формировать
негативные колонии (бляшки) в культуре
клеток; окраска по Здродовскому —
красный цвет. Устойчив к действию
факторов внешней сре­ды; сохраняется
в высохших фека­лиях инфицированных
вшей.

Эпидемиология
и механизм заражения:
Заражение
реализуется либо втиранием фе­калий
инфицированных вшей через расчесы
кожи, либо путем вдыхания пылевидного
аэ­розоля из высохших инфицированных
рикке­тсиями фекалий.

Клиника:
Инкубационный
период 10 дней. Начало острое, клиничес­кие
проявления обусловлены генерализован­ным
поражением системы эндотелиальных
клеток кровеносных сосудов, что
приводит к наруше­нию каскада
тромбо-антитромбообразования.
Морфологическую основу болезни
составля­ет генерализованный
васкулит с формированием сыпи на
кож­ных покровах. Болезнь протекает
с высокой t,
симптомами пора­жения сердечно-сосудистой
и нервной сис­тем.

Иммунитет:
Непродолжительный, клеточно-гуморальный.

Диагностика:
Осуществляется по клинико-эпидемиологическим
данным, под­крепляется лабораторным
исследованием на специфические АТ
(РСК, РНГА, ИФА).

Лечение:
Быстрое этиотропное лечение одно­кратным
приемом доксициклина, препаратами
тетрациклинового ряда.

Профилактика:
Изоляция
завшивлен­ных больных, дезинфекция
препаратами, содержащими перметрин.
Для специфической профилактики
разработана живая вакцина из штамма
Е, которая приме­няется в комбинации
с растворимым АГ риккетсии Провачека
(живая комбини­рованная сыпнотифозная
вакцина из штамма), а также инактивированная
вакцина из растворимого АГ.

Болезнь
Бриля
— рецидив
после ранее перенесенного эпидемического
сыпного тифа.

Возбудитель
— R.prowazekii.

Клинически
протекает
как эпидемический тиф легкой и средней
тяжести.

Патоморфология
инфек­ционного
процесса та же, что и при эпидеми­ческой
форме. Различие заключается в
эпи­демиологии (нет переносчика,
отсутствует се­зонность проявления,
источник и реализация способа заражения)
и патогенезе начальной стадии болезни.
Она возникает вследствие ак­тивации
дремлющих риккетсий.

Микробиологическая
диагностика.
Диагноз
устанавливается на основании
клинико-эпидемиологических данных с
учетом анамнеза больного и подкрепляется
серологическим исследованием со
специфическим АГ. При отсутствии
переносчика в очаге лечение может
осуществляться без изоляции больно­го,
в зависимости от его состояния.

Профилактика:
Меры
профилакти­ки те же, что и при
эпидемической форме.

Брюшной
тиф и паратифы А и В
— острые кишечные инфекции,
характеризующиеся поражением
лимфатического аппарата кишечника,
выраженной интоксикацией. Возбудители
— Salmonella typhi, S.paratyphi А и S.schottmuelleri.

Таксономия:
Отдел Gracilicutes, семейство Enterobacteriaceae,
род Salmonella.

Морфологические
и тинкториальные свойства:
Мелкие грам- палочки с закругленными
концами. В мазках располагаются
беспорядочно. Не образуют спор, имеют
микрокапсулу, перитрихи.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б35

1.
ФИЗИЧЕСКИЕ И ХИМИЧЕСКИЕ ДЕЙСТВИЯ НА
КЛЕТКУ.

Физическое
действие.

Температура.
Психрофилы
(растущие при низкой t).
Группа сапрофитов — обитатели почвы,
морей, пресных водоемов и сточных вод
(железобактерии, псевдомонады,
све­тящиеся бактерии, бациллы).
Некоторые патогенные бакте­рии
(возбудитель псевдотуберкулеза
размножается при t
4С). Интервал t,
при кото­ром возможен рост бактерий
— от -10 до 40С, температурный оптимум —
от 15 до 40С.

Мезофилы
(растущие при средней t
37С).
Группа патогенных и услов­но-патогенных
бактерий. Растут в диапазоне t
10-47С; оптимум роста 37С.

Термофилы
(растущие при высокой t).
При высоких t
— от 40 до 90С. На дне океана в горячих
сульфидных водах живут бактерии,
развивающиеся при t
250-300С и давлении 262 атм. Участвуют в
процессах самонагревания на­воза,
зерна, сена. Показатель загрязненности
почвы.

Микроорганизмы
выдерживают действие низких t,
их можно хранить в замороженном
со­стоянии, и при t
жидкого газа (—173С).

Высушивание.
Обезвоживание вызывает нарушение
функ­ций микроорганизмов. Наиболее
чувствительны патогенные микроорганизмы
(возбудители гоно­реи, менингита,
холеры, брюшного тифа, дизентерии).
Устойчивые микроорганизмы — защищенные
слизью мокроты.

Высушивание
под вакуумом из замороженного состояния
— лиофилизацию — используют для продления
жизнеспособнос­ти, консервирования
микроорганизмов. Лиофилизированные
куль­туры микроорганизмов и
иммунобиологические препараты
дли­тельно сохраняются, не изменяя
своих первоначальных свойств.

Излучения.
Неионизирующее — УФ и ИК лучи солнечного
света, и ионизирующее — гамма-излучение
радиоактивных ве­ществ и электроны
высоких энергий губительно действуют
на микроорганизмы. УФ-лучи применяют
для обеззараживания воздуха в больницах
(бактерицидные лампы УФ-излучения с
длиной волны 200-450 нм).

Ионизирующее
излучение применяют для стерилизации
од­норазовой пластиковой
микробиологической посуды, питатель­ных
сред, перевязочных материалов,
лекарственных препаратов. Имеются
бактерии, устойчивые к действию
иони­зирующих излучений — Micrococcus
radiodurans,
была вы­делена из ядерного реактора.

Химическое
действие.
Хим
вещества: служат источ­ником питания;
не оказывают влияния; стимули­руют
или подавляют рост. Хим вещества,
уничтожающие микроорганизмы в
окружающей среде — дезинфицирующие
(хлор-, йод-, бромсодержащие соединения
и окислители). Антимикробные хи­м
вещества обладают бактерицидным,
вирулицидным, фунгицидным действием.

Антимикробным
действием обладают кислоты и их соли
(оксолиновая, салициловая, борная);
щелочи (аммиак и его соли).

Стерилизация.
Полная инактивация микробов в объектах,
подвергшихся обработке.

Дезинфекция.
Обработка загрязненного микробами
предмета с целью уничтоже­ния
микробов до такой степени, чтобы они
не смогли вызвать инфекцию при
использовании дан­ного предмета.
Некоторые резистентные вирусы могут
остаться в жизнеспособном состоянии.

Асептика.
Предупреждение попадания возбудителя
инфекции в рану, органы больного при
операциях, лечебных и диагностических
процедурах. Методы асептики применяют
для борьбы с экзогенной инфекцией,
источниками которой являются больные
и бактерионосители.

Антисептика.
Уничтожение микробов в ране,
патологическом очаге или организме
в целом. Предупреждение или ликвидация
воспалительного процесса.

2.
ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ (ПЦР) —

Применяется
для диагностики вирусных и бактериальных
инфекций. ПЦР позволяет обнаружить
микроб в ис­следуемом материале
(воде, продуктах, ма­териале от
больного) по наличию в нем ДНК микроба
без выделения последнего в чистую
культуру.

Для
проведения реакции из исследу­емого
материала выделяют ДНК, в которой
определяют наличие специфичного для
дан­ного микроба гена. Обнаружение
гена осу­ществляют его накоплением.
Для этого необ­ходимо иметь праймеры
комплементарного З’-концам ДНК исходного
гена. Накопление (амплификация) гена:
Выделенную из исследуемого материала
ДНК нагревают. ДНК распадается на 2
нити; Добавляют праймеры; Смесь ДНК и
праймеров охлаждают. Праймеры, при
наличии в смеси ДНК искомо­го гена,
связываются с его комплементарными
участками; К смеси ДНК и праймера
добавляют ДНК-полимеразу и нуклеотиды;
Устанавливают t,
оптимальную для функционирования
ДНК-полимеразы. В этих условиях, в
случае комплементарное ДНК гена и
праймера, происходит присоединение
нуклеотидов к З’-концам праймеров, в
резуль­тате чего синтезируются две
копии гена. После этого цикл повторяется
снова, при этом ко­личество ДНК гена
будет увеличиваться каждый раз вдвое.
Проводят реакцию в специальных приборах
— амплификаторах.

3.
БОРРЕЛИОЗ.

Спирохеты
рода Borrelia
вызывают
антропонозные (возвратный тиф),
зоонозные (болезни Лайма) инфекционные
болезни с трансмиссивным механизмом
передачи воз­будителей (клещи, вши).

Морфология:
Тонкие спи­рохеты с крупными
завитками. Двигательный аппарат
представлен фибриллами. Хоро­шо
воспринимают анилиновые красители,
по Романовскому-Гимзе окрашиваются
в сине-фиолетовый цвет. Обладают
генетическим аппаратом, состоящим из
небольших размеров линейной хромосомы
и набора циркулярных и линей­ных
плазмид.

Культуральные
свойства:
Культивируются на сложных питательных
средах, со­держащих сыворотку,
тканевые экстра­кты, и в куриных
эмбрионах.
Чувствительны
к высыханию и нагреванию. Устойчивы
к низким t.

Болезнь
Лайма
— возбудитель В.burgdorferi.
Хроническая инфекция с поражением
кожи, сердечной и нервной систем,
суставов.

АГ
структура:
Сложная. Белковые АГ фибрил­лярного
аппарата и цитоплазматического
цилиндра, АТ к которым появля­ются
на ранних этапах инфекции. Протективную
активность имеют АГ, представленные
липидмодифицированными интегральными
белками наружной мембраны А, В, С, D,
E,
F.

Факторы
патогенности:
Липидмодифицированные
белки наружной мембраны обеспе­чивают
способность боррелий прикрепляться
и проникать в клетки хозяина. В
результате взаимодействия боррелий
с макрофагами про­исходит выделение
ИЛ-1, который индуци­рует воспалительный
процесс.

Патогенез:
На месте укуса клеща образуется красная
папула. Воз­будитель распространяется
из места укуса через окружающую кожу
с последующей диссеминацией с током
крови к различным органам, особенно
к сердцу, ЦНС, суставам. Клиника:

1.
Мигрирующая эритема, сопро­вождающаяся
развитием гриппоподобного
симптомокомплекса;

2
.Развитие доброкачественных поражений
сердца и ЦНС;

3.
Развитие артритов крупных суставов.

Иммунитет:
Гуморальный,
видоспецифический к АГ клеточной
стенки.

Микробиологическая
диагностика.
Исполь­зуются
бактериоскопический, серологичес­кий
методы, ПЦР в зависимости от стадии
заболевания. Материал — биоптаты кожи,
синовиальная жид­кость суставов,
ликвор, сыворотка крови. На 1 стадии
проводится бактери­ологическое
исследование биоптатов кожи из эритемы.

Начиная
со 2 стадии заболевания осу­ществляется
серологическое исследование определением
IgM
или нарастания титра IgG
ИФА или РИФ.

ПЦР
используется для определения наличия
боррелий в ликворе, суставной жидкости.

Лечение:
Антибиотики тетрациклинового ряда.

Профилактика:
Неспецифическая.

Возвратный
тиф
—
возбудитель
В.recurrentis.
Острое инфек­ционное заболевание,
характеризующееся острым нача­лом,
приступообразной лихорадкой, общей
интоксикацией.

Эпидемический
возвратный тиф
— антропоноз. Специфические пе­реносчики
— платяная, головная вши. Заражение
при втирании гемолимфы раздав­ленных
вшей в кожу при расчесывании места
укуса.

Эндемический
возвратный тиф
— зооноз. Возбудители — В.duttoni
и
В.persica.
Резервуар
— грызуны, клещи. Заражение через укусы
клещей.

Патогенез:
Попав
во внутреннюю среду организма, боррелии
внедряются в клет­ки лимфоидно-макрофагальной
системы, где размножаются и поступают
в кровь, вызывая лихорадку, головную
боль, озноб. Взаимодействуя с АТ,
образуют агрегаты, которые нагружаются
тромбоцитами, вызывая заку­порку
капилляров, следствием чего являет­ся
нарушение кровообращения в органах.

Иммунитет:
К
эпидемическому возвратному тифу
гуморальный, непродол­жительный.

Микробиологическая
диагностика.
Бактериоскопический
метод — обнару­жение возбудителя в
крови, окрашенной по Романовскому-Гимзе.
Биопробу ставят для дифференциации
В.recurrentis
от
возбуди­телей эндемического
возвратного тифа.
Вспомога­тельный
метод — серологический метод с
постановкой РСК.

Лечение:
Антибиотики тетрациклинового ряда,
левомицетин, ампициллин.

Профилактика:
Неспецифическая.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б38

1.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВИРУСА —

Проводят
с помощью серологических реакций:
РТГА, РТГАд, РН, РИФ, ИФА, РНГА, РСК, РДП.
При этом выделенный вирус используют
как АГ и с ним в серологических реакциях
применяют специфические сыворотки,
содержащие АТ к известным вирусам. Та
сыворотка, с которой выделенный вирус
будет давать продолжительную реакцию
(образование комплекса АГ+ АТ) и укажет,
какой это вирус.

Если
вирус выделели на культуре клеток и
он дает гемадсорбацию, то быстрее его
идентифицировать в РТГАд. Например,
вирус ПГ-3 крупного рогатого скота
дает гемадсорбцию с эритроцитами
морской свинки и может быть идентифицирован
в РТГАд. Вирусы, обладающие
гемагглютинирующей активностью, лучше
идентифицировать в РТГА.

Для
идентификации выделенных вирусов
используют РИФ, ИФА, РНГА, РДП, ПСК.
Универсальной и дающей достоверные
результаты при идентификации выделенных
вирусов является РН, в которой используют
те же живые чувствительные системы,
на которых и был выделен исследуемый
вирус.

Применение
моноклональных АТ с определенной
специфичностью позволяет проводить
идентификацию многих вирусов до уровня
подтипов, штаммов, вариантов. Для
обнаружения и идентификации вирусов
кроме серологических реакций используют
прямые методы идентификации вирусных
нуклеиновых кислот: ДНК-зонды, ПЦР. С
их помощью выявляют нуклеиновые
кислоты вирусов.

Методы
ДНК (или РНК)-зондов основаны на реакции
гибридизации нуклеиновых кислот,
способности односпиральных
комплементарных цепей ДНК или РНК
формировать двуспиральные структуры.
Реакция может протекать между
комплементарными молекулами вида:
ДНК+ДНК, ДНК+РНК, РНК+РНК.

Геном
вирусов, представленный в виде
специфической последоватедльности
нуклеидов в молекулах нуклеиновых
кислот, информативен и является
надежным критерием для идентификации.

У
большинства ДНК-содержащих вирусов
(адено-, герпес-, покс-, папилломавирусы)
нуклеиновая кислота находится в виде
двух цепей, которые связаны (водородная
связь) комплементарно через азотистые
основания (аденин-тимин, гуанин-цитозин).

2.
МЕЧНИКОВ
О ФАГОЦИТОЗЕ.

Мечников
внёс вклад в развитие иммунологии.
Обосновал учение о фагоцитозе и
фагоцитах. Доказал, что фагоцитоз —
явление
универсальное, наблюдается у всех
живот­ных, включая простейших, и
проявляется по отно­шению ко всем
чужеродным веществам (бактерии,
органические частицы).

Неспецифические
факторы защиты организма

Механические
факторы. Кожа и слизистые оболочки
ме­ханически препятствуют проникновению
микробов и АГ в организм. АГ могут
попадать в организм при заболеваниях
и повреждениях кожи (травмы, ожоги,
воспалительные заболевания, укусы
насекомых, живот­ных), и через
нормальную кожу и слизистую оболочку,
проникая между клетками или через
клет­ки эпителия (вирусы). Механическую
защиту осуществляет реснитчатый
эпителий верхних дыхательных пу­тей,
т.к. движение ресничек постоянно
удаляет слизь вмес­те с попавшими
в дыхательные пути инородными частицами
и микробами.

Физико-химические
факторы. Антимикробные свой­ства:
уксусная, молочная, муравьиная кис­лоты,
выделяемые потовыми и сальными железами
кожи; соля­ная кислота желудочного
сока; протеолитические ферменты в
жидкостях и тканях организма.

Фермент
лизоцим
— протеолитический
фермент мурамидаза, разрушает клеточную
стенку бактерий и других клеток,
вызывая их гибель и способствуя
фагоцитозу. Лизоцим вырабатывают
макрофаги и нейтрофилы. Содержится
во всех секретах, жидко­стях и тканях
организма (кровь, слюна, слезы, молоко,
кишеч­ная слизь, мозг). Снижение
уровня фермента — возникновение
инфекционных воспалительных
заболе­ваний.

Иммунобиологические
факторы.

Гуморальные
факторы
неспецифической резистентности —
белки, содержащиеся в крови и жид­костях
организма. К ним относятся белки
системы комплемен­та, интерферон,
трансферрин, β-лизины, белок пропердин,
фибронектин.

Белки
системы комплемента неактивны, но
приоб­ретают активность в результате
последовательной активации и
взаимодействия компонентов комплемента.
Интерферон
оказы­вает иммуномодулирующий,
пролиферативный эффект и вызы­вает
в клетке, инфицированной вирусом,
состояние противови­русной
резистентности. β
-Лизины
вырабатываются тромбоцита­ми и
обладают бактерицидным действием.
Трансферрин
конку­рирует с микроорганизмами за
необходимые для них метаболи­ты,
без которых возбудители не могут
размножаться. Пропердин
участвует в активации комплемента и
других реакциях. Сывороточные
ингибиторы
крови (р-липопротеины) инактивируют
многие вирусы в результате неспецифической
блокады их поверхности.

Фибронектин
вместе с АТ взаимодей­ствуют с
поверхностью микроорганизмов,
способствуя их фаго­цитозу, играя
роль опсонинов.

NK-клетки
— популяция лимфоцитоподобных клеток
(большие гранулосодержащие лим­фоциты),
обладающие цитотоксическим действием
против чуже­родных клеток (раковых,
клеток простейших и клеток, поражен­ных
вирусом).

3.
ГЕМОРРАГИЧЕСКАЯ ЛИХОРАДКА.

Острое
лихорадочное заболевание вирусной
этиологии. В патогенезе наблюдается
поражение сосудов, приводящее к
развитию тромбогеморрагического
синдрома. Общий анализ крови в
большинстве случаев выявляет вначале
лейкопению, затем тромбоцитопению.

Причины
геморрагического синдрома (вирусы
четырех семейств):

Аренавирусы
(Arenaviridae)

вирус
Ласса (Лихорадка Ласса)

вирус
Хунин (Аргентинская лихорадка)

вирус
Мачупо (Боливийская лихорадка)

вирус
Гуанарито (Венесуэльская лихорадка)

вирус
Сэбия (Бразильская лихорадка)

Буньявирусы
(Bunyaviridae)

вирус
геморрагической лихорадки с почечным
синдромом

вирус
лихорадки Крым-Конго

вирус
лихорадки долины Рифт

Филовирусы
(Filoviridae)

вирус
Марбург

вирус
Эбола

Флавивирусы
(Flaviviridae)

вирус
болезни леса Киассанур

вирус
омской геморрагической лихорадки

вирус
жёлтой лихорадки

вирус
лихорадки денге

вирус
лихорадки курианте

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б41

1.
БАКТЕРИОФАГИ.
В МЕДИЦИНЕ —

Вирусы
бактерий, обладающие способностью
специфически про­никать в бактериальные
клетки, репродуцироваться в них и
вы­зывать их лизис.

Взаимодействие
фага с
бактериальной
клеткой.

По
механизму взаимодействия:

Ви­рулентные
фаги,
проникнув в бактериальную клетку,
авто­номно репродуцируются в ней и
вызывают лизис бактерий. Фаги,
имеющие
хвостовой отросток с сокращающимся
чехлом, адсорбируются на поверхности
бактериальной клетки с помощью фибрилл
хвостово­го отростка. В результате
активации фагового фермента АТФазы
происходит сокращение чехла хвостового
отростка и внедрение стержня в клетку.
В процессе прокалывания клеточной
стенки бактерии принимает участие
фермент лизоцим, находящийся на конце
хвостового отростка. ДНК фага,
содержаща­яся в головке, проходит
через полость хвостового стержня и
ак­тивно впрыскивается в цитоплазму
клетки. Остальные структур­ные
элементы фага (капсид и отросток)
остаются вне клетки.

Под
действием фагового лизоцима и
внутриклеточного ос­мотического
давления происходит разрушение
клеточной стен­ки, выход фагового
потомства в окружающую среду и лизис
бактерии. Один литический цикл
продолжается 30-40 мин.

По
специфичнос­ти действия различают
поливалентные фаги, способные
взаимодействовать
с родственными видами бактерий,
моновалентные фаги, взаимодействующие
с бактериями определенного вида, и
типовые фаги, взаимодействующие с
отдельными вариантами данного вида
бактерий.

Умеренные
фаги
лизируют не все клетки в популяции, с
частью из них они вступают в симбиоз,
в результате чего ДНК фага встраивается
в хромосому бактерии. Гено­мом фага
называют профаг. Профаг, ставший частью
хромосо­мы клетки, при ее размножении
реплицируется синхронно с геном
бактерии, не вызывая ее лизиса, и
передается по наслед­ству от клетки
к клетке неограниченному числу
потомков.

Лизогения
— био­логическое явление симбиоза
микробной клетки с профагом. Культура
бакте­рий, содержащая профаг —
лизогенная.

Лизогенные
культуры по своим свойствам не
от­личаются от исходных, но они
невосприимчивы к повторному заражению
гомологичным или близкородственным
фагом и приобретают дополнительные
свойства, которые находятся под
контролем генов профага. Фаговая
конверсия — изменение свойств
микроорганизмов под влиянием профага.
Фаговая конверсия касается свойств:
культуральных, биохимических,
токсигенных, АГ, чувствительности к
антибиотикам. Переходя из интегрированного
состояния в вирулентную форму, умеренный
фаг может захва­тить часть хромосомы
клетки и при лизисе последней перено­сит
эту часть хромосомы в другую клетку.

В
МЕДИЦИНЕ.
Бактерио­фаги
используют в лабораторной диагнос­тике
инфекций при внутривидовой идентификации
бактерий (определение фаготипа).
Применяют метод фаготипирования,
основанный
на специфичности действия фагов: на
чашку с плотной питательной средой,
засеянной газоном чистой культурой
возбудителя, на­носят капли различных
диагностических типоспецифических
фагов. Фаговар бактерии определяется
тем типом фага, ко­торый вызвал ее
лизис (образование сте­рильного
пятна, бляшки, или негативной колонии).
Методику фаготипирова­ния используют
для выявления источника и путей
распространения инфекции
(эпидеми­ологическое маркирование).

Фаги
применяют для лечения и про­филактики
бактериальных инфекций. Производят
брюшнотифозный, сальмонеллезный,
дизентерийный, синегнойный,
ста­филококковый, стрептококковый
фаги и комбинированные препараты
(колипротейный, пиобактериофаги).
Бактериофаги назначают по показаниям
перорально, парен­терально или
местно в виде жидких, таблетированных
форм, свечей или аэрозолей.

Фаги
применяют в генной инженерии и
биотехнологии
как вектор для получе­ния рекомбинантных
ДНК.

2.
ЖИВЫЕ ВАКЦИНЫ —

Препараты
из аттенуированных (ослабленных)
патогенных микроорганизмов, а также
близкородственных микробов, способных
индуцировать невосприимчивость к
патогенному виду (дивергентные
вакцины). Все живые вакцины содержат
микробные тела, их относят к группе
корпускулярных вакцинных препаратов.

Иммунизация
живой вакциной приводит к развитию
вакцинального процесса, протекающего
у большинства привитых без видимых
клинических проявлений. Основное
достоинство живых вакцин — сохранённый
набор АГ возбудителя, что обеспечивает
развитие длительной невосприимчивости
даже после однократной иммунизации.
Недостаток — риск развития манифестной
инфекции в результате снижения
аттенуации вакцинного штамма (живая
полиомиелитная вакцина может вызвать
полиомиелит вплоть до развития
поражения спинного мозга и паралича).

Ослабленные
(аттенуированные) вакцины изготавливают
из микроорганизмов с пониженной
патогенностью, но выраженной
иммуногенностью. Введение вакцинного
штамма в организм имитирует инфекционный
процесс: микроорганизм размножается,
вызывая развитие иммунных реакций
(вакцины для профилактики сибирской
язвы, бруцеллёза, Ку-лихорадки, брюшного
тифа,
против
возбудителя жёлтой лихорадки,
противополиомиелитная вакцина Сэйбина,
против гриппа, кори, краснухи, паротита
и аденовирусных инфекций). Однако
большая часть живых вакцин —
противовирусные.

3.
ГЕПАТИТЫ
В, С, D.

Гепатит
В
—
семейс­тво Hepadnaviridae
род Orthohepadnavirus.

Морфология:
ДНК-содержаший
вирус сферичес­кой формы. Состоит
из сердцевины, состоящей из 180 белковых
частиц, составляющих сердцевинный
НВс-АГ и липидсодержащей оболоч­ки,
содержащей поверхностный HBs-АГ.
Внутри сердцевины находятся ДНК,
фермент ДНК-полимераза (ревертазная
активность), концевой белок НВе-АГ.
Геном
представлен двунитевой ДНК коль­цевой
формы.

Культуральные
свойства:
Не
культиви­руется на куриных эмбрионах,
не облада­ет гемолитической и
гемагглютинирующей активностью. ВГВ
культивируется только в культуре
клеток.

Резистентность:
Высокая
к факторам окружающей среды и
дезинфицирующим веществам. Устой­чив
к длительному воздействию кислой
среды, УФ-излучению, действию спирта,
фенола.

АГ
структура:
В
суперкапсиде вируса находится HBs-АГ,
который ло­кализован в гидрофильном
слое на поверх­ности вириона. В
формировании HBs-АГ
участвуют 3 полипептида в гликозилированной
форме:preSl
— большой полипептид; preS2
— средний полипептид; S
— малый полипептид.

Эпидемиология:
Заражение
проис­ходит при парентеральных
манипуляциях (инъ­екциях, хирургических
вмешательствах), пере­ливании крови.

Патогенез
и клиника заболевания:
Инкуба­ционный
период 3-6 мес. Инфекционный процесс
наступает после проникновения вируса
в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом
прони­кает в гепатоцит. После
проникновения вируса происходит
достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой
до пол­ноценной структуры. Клиническая
картина характеризуется сим­птомами
поражения печени, сопровождается
развитием желтухи.

Иммунитет:
Гуморальный,
пред­ставленный АТ к HBs-АГ,
защищает гепатоциты от вируса,
элиминируя его из крови.

Клеточный
иммунитет освобождает организм от
инфицирован­ных гепатоцитов благодаря
цитолитической функции Т-киллеров.
Переход острой фор­мы в хроническую
обеспечивается наруше­нием
Т-клеточного иммунитета.

Микробиологическая
диагностика.
Серологический
метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови
определяют маркеры гепатита В: АГ и
АТ. ПЦР определяют наличие вирусной
ДНК в крови и биоптатах печени. Для
острого гепатита ха­рактерно
обнаружение HBs-АГ,
НВе-АГ и анти-HBc—IgM
АТ.

Лечение:
Использование интерферона,
интерфероногенов: виферона, амиксина,
инги­битора ДНК-полимеразы, препарата
аденинрибонозида.

Профилактика:
Специфическая
профилактика осущест­вляется
вакцинацией рекомбинантной
ген­но-инженерной вакциной, содержащей
HBs-АГ.
Вакцинации подлежат все новорож­денные
в первые 24 ч жизни. Длительность
поствакцинального иммуните­та 7
лет.

Гепатит
С
— се­мейство Flaviviridae
род
Hepacivirus.

Морфология:
Сложноорганизованный
РНК-содержащим вирус сфе­рической
формы. Геном представлен одной линейной
+ цепью РНК, обладает большой
вариабельностью.

АГ
структура:
АГ:
1.
Гликопротеины оболочки;
2.Сердцевинный
АГ НСс-АГ;
3.Неструктурные
белки.

Культуральные
свойства:
ВГС
не культиви­руется на куриных
эмбрионах, не облада­ет гемолитической
и гемагглютинирующей активностью.

Резистентность:
Чувствителен
к эфиру, УФ-лучам, нагреванию до 50С.

Эпидемиология:
Передается
при переливаниях крови, трансплацентарно,
половым путем.

Клиника:
Встречаются
безжелтушные формы, течение инфекции
в острой форме, в 50 % случаев процесс
переходит в хроническое те­чение с
развитием цирроза и первичного ра­ка
печени.

Микробиологическая
диагностика.
ПЦР
и серо­логическое исследование.
Подтверждение активного инфекционного
процесса — обнаружение в крои вирусной
РНК ПЦР. Серологическое исследование
направлено на определение АТ к NS3
методом ИФА.

Лечение:
Применяют
интерфе­рон и рибовирин.

Гепатит
D
—
дефектный
вирус, не имеющий собственной оболочки.
Вирион сферической формы, состоит из
однонитчатой РНК и сердцевинного
HDc-АГ.
Резервуар ВГD
— но­сители ВГВ.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б44

1.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ. МЕТОДЫ ОКРАСКИ.

Бактерии
—
микроорганизмы, не имеющие оформлен­ного
ядра (прокариоты). Они имеют разнообразную
форму и довольно сложную структуру,
определяющую многообразие их
функциональной дея­тельности.

Бактерии
шаровидной формы (кокки)
в зависимости от плоскости деления и
расположения относительно друг друга
от­дельных особей подразделяются
на микрококки (отдельно лежащие),
диплококки (парные), стрептококки
(цепочки), стафилококки (виноградные
грозди), тетракокки (четырех кокка) и
сарцины (паке­ты из 8 или 16 кокков).

Палочковидные
(цилиндрические) бактерии
располагаются в виде оди­ночных
клеток, дипло- или стрептобактерий.

Извитые
формы бактерий
—
вибрионы
и спириллы, спирохеты. Вибрионы имеют
вид слегка изогнутых палочек, спириллы
—
извитую
форму с несколькими спиральными
завит­ками.

Размеры
бактерий
от 0,1 до 10 мкм. Состав бак­териальной
клетки: капсула, клет стенка,
цитоплазматическая мембрана и
цитоплазма (содержатся нуклеоид),
рибосомы и включения. Некоторые
снабжены жгутиками и ворсинками.
Некоторые образуют споры, которые
располагаются терминально,
субтер­минально, центрально; превышая
поперечный раз­мер клетки, споры
придают ей веретенообразную форму.

Методы
окраски.
Окраска
мазка простым методом — окраска
препарата одним красителем; сложным
методом (по Граму, Цилю – Нильсену,
Ауески, Нейссера, Бури-Гинса) включает
последовательное использование
нескольких красителей и имеет
диффе­ренциально-диагностическое
значение. Отношение микроорганиз­мов
к красителям — тинкториальные свойства.
Специальные методы — для выявления
жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида
и разных цитоплазматических включений.

При
простых методах мазок окрашивают
одним красителем, ис­пользуя красители
анилинового ряда (основные или кис­лые).
Если красящий ион (хромофор) — катион,
то краситель обладает основными
свойствами, если хромо­фор — анион,
то краситель имеет кислые свойства.
Кис­лые
красители
— эритрозин, кислый фуксин, эозин.
Ос­новные
красители
— генциановый фиолетовый, кристал­лический
фиолетовый, метиленовый синий, основной
фуксин. Основные
красители более интенсивно
связываются кислыми компонентами
клетки. Из сухих красителей, в виде
порошков, готовят на­сыщенные
спиртовые растворы, а из них —
водно-спирто­вые, которые и служат
для окрашивания микробных кле­ток.
Микроорганизмы окрашивают, наливая
краситель на поверхность мазка на
определенное время. Окраску основным
фуксином ведут в течение 2 мин,
метиленовым синим — 5-7 мин. Затем мазок
промывают водой, высушивают промоканием
фильтровальной бумагой и микроскопируют
в иммерсионной системе. Ес­ли мазок
правильно окрашен и промыт, то поле
зрения совершенно прозрачно, а клетки
окрашены.

Сложные
методы окраски применяют для изуче­ния
структуры клетки и дифференциации
микроорганиз­мов. Окрашенные мазки
микроскопируют в иммерсион­ной
системе. Последовательно нанести на
препа­рат определенные красители,
различающиеся по химическому составу
и цвету, протравы, спирты, кислоту.

2.
ГЗТ.

Аллергические
реак­ции: ГНТ — реакции, проявляющиеся
че­рез 20-30 мин после повторной встречи
с АГ; ГЗТ — реакции, возникающие через
24-48 ч. ГНТ — вы­работка АТ; ГЗТ —
клеточные реакции.

ГЗТ
— клеточные механизмы с участием
Т-лимфоцитов.

ГЗТ
возникает при сенсибилизации организма:

1.
Микроорганизмами и микробными АГ
(бактериальны­ми, грибковыми,
протозойными, вирусными);
2.
Гельминтами;
3.
Природными и искусственно синтезированными
гаптенами (лекарственные препараты,
красители);
4.
Некоторыми
белками.

ГЗТ
вызывает­ся всеми АГ. Ярко про­является
на введение полисахаридов,
низкомолекулярных пептидов
(малоиммуногенных АГ). Реакцию вызывают
малые дозы АГ при внутрикожном введении.

Механизм
— сен­сибилизация Т-лимфоцитов-хелперов
АГ. Сенсибилизация лимфоцитов вызывает
выделение медиаторов (интерлейкина-2),
которые активируют макрофаги и
вов­лекают их в процесс разрушения
АГ, вызвавшего сенсибилизацию
лимфоцитов. Т-лимфоциты проявляют
цитотоксичность. Роль лимфоцитов в
возникновении аллер­гий клеточного
типа — возможность передачи ал­лергии
от сенсибилизированного животного
несенсибилизированному с помощью
введения лимфоцитов, подавление
реакции при помощи антилимфоцитарной
сыворотки.

Морфологическая
картина — воспалительный характер,
обусловленный реакцией лимфо­цитов
и макрофагов на образующийся комплекс
АГ с сен­сибилизированными лимфоцитами.

Формы
проявления:

Туберкулиновая
реакция
возникает через 5-6 ч после внутрикожного
введения сенсибилизированным
туберкулезной палоч­кой животным
или человеку туберкулина, т.е. АГ
тубер­кулезной палочки. Выражается
реакция в виде покраснения, при­пухлости,
уплотнения на месте введения туберкулина.
Повышение температуры, лимфопения.
Достигает максимума через 24-48 ч.
Туберкули­новая реакция используется
с диагностической целью для вы­явления
заболеваний туберкулезом или контактов
организма с туберкулезной палочкой.

Замедленная
аллергия
возникает при сенсибилизации малы­ми
дозами белковых АГ с адъювантом, а
также конъюгатами белков с гаптенами.
В этих случаях аллергическая реак­ция
возникает через 5 дней и длится 2-3 нед.

Контактная
аллергия
возникает, если АГ являются
низкомолекулярные органические и
неорганические вещества, которые в
организме соединяются с белками,
образуя конъюга-ы. Конъюгированные
соединения, выполняя роль гаптенов,
вы­зывают сенсибилизацию. Возникает
при контакте с химическими веществами
(фармацевтическими препаратами,
красками, косметикой). Прояв­ляется
в виде дерматитов.

Значение:
Механизмы лежат в основе воспаления,
которое способствует локализации
инфекционного агента или АГ в пределах
определённых тканей и формированию
полноценной иммунной реакции защитного
характера.

Аллергопроба —
метод диагностики аллергических
заболеваний. Кожные — количественные
и качественные пробы, прямые и непрямые
пробы, провокационные пробы. Аллерген
(возбудитель заболевания) вводится в
организм пациента и наблюдается
реакция организма пациента на аллерген.
Пробы выполняют в период улучшения
состояния через 2-3 недели после
перенесенной аллергической реакции,
т.к. чувствительность организма к
аллергену в течение этого времени
снижается.

Прямая
кожная проба — аллерген
контактирует с кожей больного при
повреждении (укол, царапина, внутрикожное
введение), либо наносится на неповрежденную
кожу в виде капли или аппликации. При
положительной реакции на месте
внедрения аллергена развивается
покраснение или волдырь. Немедленная
реакция развивается через 20 минут,
замедленная — через 24-48 часов. Степень
чувствительности проб увеличивается:
капельная, аппликационная, укол, через
царапину, внутрикожная.

Непрямая
кожная проба —
человеку внутрикожно вводится сыворотка
крови больного, через 24 часа в то же
место вводят аллерген. По развитию
местной кожной реакции судят о наличии
АТ в сыворотке.

Провокационные
пробы показаны
при несоответствии данных
аллергологического анамнеза и
результатов кожных проб. Основаны на
воспроизведении аллергических реакций
путем введения аллергена в орган или
ткань, поражение которых является
ведущим в картине заболевания. Различают
конъюктивальные (аллергический
конъюнктивит), назальные (аллергический
ринит и поллиноз) и ингаляционные
(бронхиальная астма).

3.
ФИЛОВИРУСЫ. ЭБОЛА.

Филовирусы
— семейство, относящееся к отряду
Mononegavirales, входящему в вирусную группу
V по Балтимору. Геном содержит
одноцепочечную -РНК.

Два
вида: вирус Эбола (Ebolavirus, выделено 5
подтипов) и вирус Марбург (Marburgvirus). Оба
вызывают вирусную геморрагическую
лихорадку, характеризующуюся обильным
кровотечением и нарушением свёртываемости
крови, приводящую к смерти.

Описание.
РНК вируса содержит 19000 нуклеотидов
и кодирует 7 белков, 6 из которых служат
для воспроизводства и жизнеобеспечения
и один неструктурный секретируемый
белок — гликопротеид, предположительно
подавляющий образование АТ, чем
определяется высокая летальность и
скорость протекания болезни.

Вирион
имеет вытянутую цилиндрическую форму,
может быть прямым, изогнутым, скрученным,
иметь форму цифры «6» или буквы «U».
Длина вириона сильно варьируется, но
диаметр в сечении постоянный 80 нм.
Воспроизводство происходит почкованием
от инфицированной клетки. Дочерний
вирион состоит из вирусной цепочки
РНК и белков, заключённых в липидную
мембрану поражённой клетки (клеточная
мембрана).

При
комнатной t
филовирусы сохраняют вирулентность
длительное время. Чувствительны к
органическим растворителям и высокой
t.

Вирус
Эбола
— вирусы одного рода Ebolavirus, входящие
в семейство филовирусов, вызывающие
геморрагическую лихорадку Эбола у
высших приматов. Морфологические
признаки вируса Эбола схожи с марбургским
вирусом, также принадлежащим семейству
филовирусов и вызывающим подобное
заболевание. Изображение вируса Эбола
получено с помощью просвечивающей
электронной микроскопии.

Болезнь
передаётся через жидкости организма
(через кровь, кал, слюну, рвоту). Ранние
симптомы: лихорадка, головная боль и
боль в мышцах по истечении инкубационного
периода от 3 до 9 дней.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б47

1.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ
БАКТЕРИЙ. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ.

Бактериальная
петля
— инструмент для посевов. Бактериальная
игла
— для посевов уколом. Металлические
(стеклянные) шпатели
— для посевов на чашках Петри.
Пасте­ровские
и градуированные пипетки
— для посевов жидких материалов.

При
пересеве бактериальной культуры берут
пробирку, пронося её над пламенем
горелки. Набирают посевной ма­териал.
В пробирку со скошенным агаром вносят
петлю с посевным материалом, опуская
ее до конденсата в нижней ча­сти
среды, и зигзагообразным движением
распределяют по скошенной поверхности
агара. Пробирки с посевами подписывают,
указывая дату посева и характер
посевного мате­риала.

Посевы
газоном производят шпателем на
питательный агар в чашке Петри.
Приоткрыв крышку, пет­лей наносят
посевной материал на поверхность
питательного агара. Затем проводят
шпатель через пламя горелки, остужают
его о внутреннюю сторону крышки и
растирают материал по всей поверхности
среды. После инкубации посева появляется
равномерный сплошной рост бактерий.

Ростовые
факторы питательных сред,
которые катализируют метаболические
процессы микробной клетки — витамины
груп­пы В, никотиновая кислота.

Искусственные
среды готовят по рецептам из различных
настоев или отваров животного
про­исхождения с добавлением
неорганических солей, угле­водов и
азотистых веществ.

В
бактериологической практике используют
сухие питательные среды. Для приготовления
используют: кровезаменители (гидролизин
— кислотный гидролизат крови животных,
аминопептид — ферментативный гидролизат
крови); продукты биотехнологии (кормовые
дрожжи, кормовой лизин, виноградная
мука, белколизин).

Консистенция.
Плотные среды готовят до­бавляя к
жидкой среде 1,5-2% агара, полужидкие —
0,3-0,7 % агара. Агар — продукт переработки
морских водорослей, плавится при
80-86С, затвердевает при 40С.

По
целевому назначению. Основные
среды
— триптические гидролизаты мясных
продуктов, крови животных или казеина,
из которых готовят жидкую (питательный
бульон) и плотную (пита­тельный агар)
среды.

Элективные
среды
— для выделения и накопления микробов
определен­ного вида из материалов,
содержа­щих постороннюю микрофлору
(рост стафилококков — при повышенной
концентрации NaCl,
хо­лерного вибриона — в щелочной
среде).

Дифференциально-диагностические
среды
— для разграничения отдельных видов
мик­робов. Разные виды бактерий
различаются между собой по биохи­мической
активности (неодинаковый набор
фермен­тов).

Синтетические
среды
— химически чистые вещества: аминокислоты,
минеральные соли, углеводы, витамины.
Полусинтетические
среды
— пептон, дрожжевой экстракт. Эти среды
применяют при получении антибиотиков,
вакцин.

2.
ДИСБАКТЕРИОЗ —

Нарушения
под влиянием факто­ров окружающей
среды, стрессовых воздействий,
бесконтрольного применения анти­микробных
препаратов, лучевой и хими­отерапии,
нерационального питания, оператив­ных
вмешательств. В результате нарушается
колонизационная резистентность.
Размножившиеся транзиторные
микроорганиз­мы продуцируют токсичные
продукты метабо­лизма — индол, скатол,
аммиак, сероводород.

Дисбиоз
и дисбактериоз — состояния, развивающиеся
в результате утраты нормальных функций
микрофлоры.

При
дисбактериозе происходят стойкие
количест­венные и качественные
изменения бактерий, входящих в состав
нормальной микрофло­ры. При дисбиозе
изменения происходят и среди других
групп микроорганизмов (виру­сов,
грибов). Дисбиоз и дисбактериоз приводят
к эндогенным инфекция­ми.

Дисбиозы
классифицируют по этиологии (грибковый,
стафилококковый, протейный) и по
локализации (дисбиоз рта, кишки,
влагалища). Изменения в составе и
функциях нормальной микрофлоры
сопровождаются нарушениями: разви­тием
инфекций, диарей, запоров, синдрома
мальабсорбции, гастритов, колитов,
язвенной болезни, злокачественных
новообразований, аллергий, мочекаменной
болезни, гипо- и гиперхолестеринемии,
гипо- и гипертензии, кариеса, артрита,
поражений печени.

Нарушения
нормальной микрофлоры определяются:

1.
Выявление видового и количественного
со­става представителей микробиоценоза
определенного биотопа (кишки, рта,
влагалища, кожи) — путем высева из
разведений исследу­емого материала
или путем отпечатков, смыва на
соответствующие питательные среды
(среда Блаурокка — для бифидобактерий;
среда МРС2 — для лактобактерий; анаэробный
кровя­ной агар — для бактероидов;
среда Левина или Эндо — для энтеробактерий;
желчно-кровяной агар — для энтерококков;
кровяной агар — для стрептококков и
гемофилов; мясопептонный агар с
фурагином — для синегнойной палочки;
среда Сабуро — для грибов).

2.
Определение в исследуемом материале
микробных метаболитов — маркеров
дисбиоза (жирных кислот, гидроксижирных
кислот, жирнокислотных альдегидов,
ферментов). Обнаружение в фекалиях
бета-аспартилглицина и бета-аспартиллизина
свидетельствует о нарушении кишечного
микробиоценоза, так как в норме эти
дипептиды метаболизируются кишечной
анаэроб­ной микрофлорой.

Для
восстановления нормальной микро­флоры:
1.Проводят селективную деконтаминацию;
2.Назначают препараты пробиотиков,
полученные из лиофильно вы­сушенных
живых бактерий — представителей
нормальной микрофлоры кишечника —
би­фидобактерий (бифидумбактерин),
кишеч­ной палочки (колибактерин),
лактобактерий (лактобактерин).

Пробиотики
— препараты, оказывающие при приеме
per
os
нормализирующее
действие на организм человека и его
микрофлору.

3.
ГЕМОФИЛЫ.

Токсономия:
Род Haemophilus семейство Pasteurellaceae, класс
Гамма-Протеобактерий.

Морфология:
Мелкие неподвижные полиморфные
некислотоустойчивые аэробные или
факультативно-анаэробные облигатные
паразиты. Для роста необходимы ростовые
факторы, содержащиеся в er.
Образуют капсулу.

Клиническое
значение:
H.influenzae — острые респираторные заболевания
(ринит, синусит, фарингит, трахеит,
эпиглоссит, бронхит, пневмонию),
абсцессы, эмпиему, гнойный менингит,
эндокардит, артрит, сепсис.

H.aphrophilus
— подострый эндокардит.

H.aegyptius
— тяжелый остро протекающий конъюнктивит.

H.parainfluenzae,
H.haemolyticus и H.parahaemolyticus — нормальные
обитатели респираторного тракта, но
могут вызывать эндокардит, а на фоне
вирусных инфекций — вторичные острые
заболевания ротовой полости, глотки,
трахеи, бронхов.

H.ducreyi
— венерическое заболевание — мягкий
шанкр.

Диагностика:
H.influenzae — кровь, спинно-мозговая жидкость,
мазки из зева, носоглотки, мокрота,
аспират из придаточных полостей носа,
промывные воды бронхов, смывы из глаз,
биоптаты конъюнктивы, суставная
жидкость, ткани легких.

H.aphrophilus
— биоптаты эндокарда, кровь.

H.aegyptius
— смывы с конъюнктивы.

H.parainfluenzae,
H.haemolyticus, H.parahaemolyticus — кровь, смывы из
ротовой полости, глотки, трахеи,
бронхов.

H.ducreyi
— отделяемое и соскобы из язв, аспираты
пораженных лимфатических узлов.

Схема
исследования:
Бактериоскопия мазков проб. Обнаружение
гемофил в мазках клинического материала.
Диагноз на мягкий шанкр ставят уже на
этом этапе лабораторных исследований
на основании обнаружения грам- палочек
в форме «8» или веретена, располагающихся
параллельными цепочками. При подозрении
на инфекции других видов гемофил пробы
высевают на питательные среды.

Посев
материала на питательные среды и
выделение чистой культуры. Пробы
высевают на кровяной агар, на следующий
день колонии пересевают на шоколадный
агар.

Бактериоскопия
мазков колоний:
выявление в мазках бактерий с характерной
для гемофил морфологией.

Биохимический
анализ:
проводят для дифференциации видов
гемофил.

Дополнительные
исследования:
определяют чувствительность гемофил
к антимикробным препаратам на
гемофилезном тестовом агаре.

Рост
на пит.средах:
Для культивирования на искусственных
питательных средах гемофилы нуждаются
в факторах X (гемин) и V
(никотинамидадениндинуклеотид),
источником является свежая кровь.
Различных представителей рода
дифференцируют по потребностям в
указанных факторах. Лучше всего
гемофилы растут на средах с нагретой
кровью (шоколадном агаре), т.к. при
нагревании из крови высвобождаются
необходимые им ростовые факторы. На
шоколадном агаре гемофилы растут в
виде полупрозрачных, сероватых, нежных,
сочных колоний диаметром от 1 до 2 мм;
в зависимости от состояний популяции
могут формировать три вида колоний:
крупные круглые слизистые колонии
(М-форма); круглые полупрозрачные
голубоватые колонии размером 1 мм
(S-формы); очень мелкие, менее 1 мм в
диаметре, непрозрачные колонии
(R-форма).

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б03

1.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ. МЕТОДЫ ОКРАСКИ.

Бактерии
—
микроорганизмы, не имеющие оформлен­ного
ядра (прокариоты). Они имеют разнообразную
форму и довольно сложную структуру,
определяющую многообразие их
функциональной дея­тельности.

Бактерии
шаровидной формы (кокки)
в зависимости от плоскости деления и
расположения относительно друг друга
от­дельных особей подразделяются
на микрококки (отдельно лежащие),
диплококки (парные), стрептококки
(цепочки), стафилококки (виноградные
грозди), тетракокки (четырех кокка) и
сарцины (паке­ты из 8 или 16 кокков).

Палочковидные
(цилиндрические) бактерии
располагаются в виде оди­ночных
клеток, дипло- или стрептобактерий.

Извитые
формы бактерий
—
вибрионы
и спириллы, спирохеты. Вибрионы имеют
вид слегка изогнутых палочек, спириллы
—
извитую
форму с несколькими спиральными
завит­ками.

Размеры
бактерий
от 0,1 до 10 мкм. Состав бак­териальной
клетки: капсула, клет стенка,
цитоплазматическая мембрана и
цитоплазма (содержатся нуклеоид),
рибосомы и включения. Некоторые
снабжены жгутиками и ворсинками.
Некоторые образуют споры, которые
располагаются терминально,
субтер­минально, центрально; превышая
поперечный раз­мер клетки, споры
придают ей веретенообразную форму.

Методы
окраски.
Окраска
мазка простым методом — окраска
препарата одним красителем; сложным
методом (по Граму, Цилю – Нильсену,
Ауески, Нейссера, Бури-Гинса) включает
последовательное использование
нескольких красителей и имеет
диффе­ренциально-диагностическое
значение. Отношение микроорганиз­мов
к красителям — тинкториальные свойства.
Специальные методы — для выявления
жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида
и разных цитоплазматических включений.

При
простых методах мазок окрашивают
одним красителем, ис­пользуя красители
анилинового ряда (основные или кис­лые).
Если красящий ион (хромофор) — катион,
то краситель обладает основными
свойствами, если хромо­фор — анион,
то краситель имеет кислые свойства.
Кис­лые
красители
— эритрозин, кислый фуксин, эозин.
Ос­новные
красители
— генциановый фиолетовый, кристал­лический
фиолетовый, метиленовый синий, основной
фуксин. Основные
красители более интенсивно
связываются кислыми компонентами
клетки. Из сухих красителей, в виде
порошков, готовят на­сыщенные
спиртовые растворы, а из них —
водно-спирто­вые, которые и служат
для окрашивания микробных кле­ток.
Микроорганизмы окрашивают, наливая
краситель на поверхность мазка на
определенное время. Окраску основным
фуксином ведут в течение 2 мин,
метиленовым синим — 5-7 мин. Затем мазок
промывают водой, высушивают промоканием
фильтровальной бумагой и микроскопируют
в иммерсионной системе. Ес­ли мазок
правильно окрашен и промыт, то поле
зрения совершенно прозрачно, а клетки
окрашены.

Сложные
методы окраски применяют для изуче­ния
структуры клетки и дифференциации
микроорганиз­мов. Окрашенные мазки
микроскопируют в иммерсион­ной
системе. Последовательно нанести на
препа­рат определенные красители,
различающиеся по химическому составу
и цвету, протравы, спирты, кислоту.

2.
ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫЕ
ИНФЕКЦИИ. КЛИНИЧЕСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ.

ВБИ
—
инфекция, зара­жение которой
происходит в больничных учреждениях:
наслаиваясь на основное заболевание,
она утяжеляет клиническое те­чение
болезни, затрудняет диагностику и
лечение, ухудшает прогноз и исход
заболе­вания, нередко приводя к
смерти больного.

ВБИ
— ятрогенное, т.е. связан­ное с
медицинскими вмешательствами,
за­болевание. Возбудителями ВБИ
могут
быть патогенные микробы, например, в
случаях госпитализации инфекционного
больного в соматические отделения,
неправильной или несовершенной
изоляции больных в инфекционных
отделениях, заноса возбу­дителей в
больницы посетителями во время
эпидемий.

Клиническая
микра —
раздел медицинской микры, изучающий
взаимоотношения, складывающиеся между
макро- и микроорганизмами в норме, при
патологии, в динамике воспалительного
процесса с учетом проводимой терапии
до констатации клиницистом состояния
кли­нического или полного выздоровления.

Задачи
клинической микры близки к тем задачам,
которые стоят перед медицинс­кой
микробиологией. Их специфика
определя­ется лишь тем, что клиническая
микробиоло­гия исследует одну группу
микробов — УПМ, одну группу заболеваний
— оппортунистичес­кие инфекции и
одну антропогенную экосис­тему —
больничные учреждения.

Исходя
из этого, задачами клинической микры
являются:

1.
Изучение биологии и роли УПМ в этио­логии
и патогенезе ГВЗ человека.

2.
Разработка и использование методов
микробиологической диагностики,
специфи­ческой терапии и профилактики
микробных заболеваний, встречающихся
в неинфекци­онных стационарах.

3.
Исследование микробиологических
ас­пектов проблем ВБИ, дисбактериоза,
лекарс­твенной устойчивости микробов.

4.
Микробиологическое обоснование и
контроль за антимикробными мероприятия­ми
в больничных стационарах.

3.
ГОНОКОККИ.

Токсономия:
Род Neisseria. Грам- аэробные кокки. Род
включает 8 видов: N.
meningitides,
N.
gonorrhoeae,
N.
flava,
N.
subflava,
N.
perflava,
N.
sicca.

Морфология:
Неподвижные неспорогенные диплококки,
образующие капсулу, полиморфны —
встречаются в виде мелких или крупных
форм, а так же в виде полочек. Хорошо
окрашиваются анилиновыми красителями
(метиленовым синим, бриллиантовым
зелёным). Под действием пенициллина
образуют L-формы,
могут менять свойства и превратиться
в грамположительную форму.

Культуральные
свойства:
Хемоорганотрофы; для роста требуют
свежеприготовленные влажные среды с
добавлением нативных белков крови,
сыворотки или асцитической жидкости.
Не вызывают гемолиза на средах,
содержащих кровь; на средах с добавлением
молока, желатина и картофеля не растут.
На плотных питательных средах через
24ч, при содержании протеина II
образуют слегка мутные бесцветные
колонии. Не содержащие его, образуют
круглые прозрачные колонии в виде
капель росы. На жидких питательных
средах растут диффузно и образуют
плёнку, через несколько часов оседающую
на дно.

Биохимическая
активность:
Крайне низкая — разлагают только
глюкозу, продуцируют каталазу и
цитохромоксидазу, протеолитическая
активность отсутствует, H2S,
аммиака, индола не образует.

Антигенная
структура:
Содержит А и К антигены, ЛПС обладают
сильной иммуногенностью, основную
антигенную нагрузку несут пили и белки
мембраны. Наружная мембрана содержит
протеины I,
II,
III
классов, проявляющих сильные
иммуногеннные свойства

Факторы
патогенности:
Капсула, пили, эндотоксин, белки
мембраны.

Капсула
обладает антифагоцитарным действием.
Пили обеспечивают адгезию к эпителию.
Клеточная стенка содержит эндотоксин.
Поверхностный белок I
класса — обеспечивает устойчивость к
бактерицидным факторам слизистых
оболочек. Класса II
— (протеины мутности, ОРА-протеины)
обуславливают прикрепление к эпителию,
препятствуют фагоцитозу. N.
синтезируют IgA
протеазу, расщепляющую Ig.

Резистентность:
Очень неустойчивы в окружающей среде,
чувствительны к действию антисептиков,
высокочувствительны к пенициллинам,
тетрациклину, стрептомицину. Способны
к утилизации пенициллинов при
приобретении в-лактамаз.

Патогенез:
Входные ворота — цилиндрический
эпителий мочеполовых путей. Гонококки
прикрепляются к эпителию посредством
поверхностных белков, вызывают гибель
и слущивание клеток, захватываются
клетками, где размножаются, попадают
на БМ, после чего попадают на соед.
ткань и вызывают воспаление или
попадают в кровь с возможным
дессиминированием.

Иммунитет:
Почти отсутствует.

Микробиологическая
диагностика.
Материал
— гнойное отделяемое из уретры,
влагалища, прямой кишки, глотки,
сыворотки крови.

Бактериоскопическое
исследование:
Готовят мазки, окраска по Граму. При
«+» результате — обнаруживают гонококки
— грам+ диплококки бобовидной формы,
находятся внутри лейкоцитов.
Положительный диагноз ставится при
острой форме гонореи до применения
антибиотиков.

Бактериологическое
исследование:
Материал
засевают на чашки Петри со специальными
питательными средами — КДС, сывороточным
агаром. Среда КДС содержит питательный
агар с добавлением в определенной
концентрации казеина, дрож­жевого
экстракта и сыворотки крови. Посевы
инкубируют при 37С в течение 24-72 ч.
Гонококки образуют круглые прозрач­ные
колонии, напоминающие капли росы.
Гонококк ферментирует только глюкозу
с образованием ки­слоты.

Серодиагностика:
Ставят РСК Борде — Жангу. В качестве
АГ используют взвесь убитых гонокок­ков.
Реакция Борде-Жангу имеет вспомогательное
значение при диагностике гонореи. Она
положительна при хронической и
осложненной гонорее.

Лечение:
Антибиотикотерапия (пенициллин,
тетрациклин, канамицин),
иммунотерапия — гонококковая вакцина
— взвесь гонококков, убитых нагреванием,
используется для вакцинотерапии
хронической гонореи.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б06

1.
РАБОТЫ Р. КОХА.

Основные
этапы развития микробиологии и
имунологии.

Историю
развития микры можно разделить на
пять этапов: эвристический,
морфологический, физиологический,
им­мунологический и молекулярно-генетический.

Кох.
Физиологический период в развитии
микры связан с именем немецкого ученого
Коха, которому принадлежит разработка
методов получения чистых культур
бактерий, окраски бактерий при
микроскопии, микрофотографии. Известна
также сформулированная Кохом триада
Коха, которой до сих пор пользуются
при установлении возбудителя болезни.

2.
АНТИТЕЛА.

Особые
специфические глобулины, которые
образуются в организме под влиянием
АГ. Основным свойством АТ является
способность специфически соединяться
с АГ, который вызвал их образование,
и защищать организм от действия
инфекционных агентов. АТ либо
нейтрализуют, обезвреживают возбудителей
инфекционных заболеваний, либо делают
их чувствительными к действию других
факторов, например фагоцитов или
комплемента. Различают полные, или
преципитирующие АТ, которые при
взаимодействии с АГ дают видимые
иммунологические реакции (агглютинации,
преципитации), и неполные, непреципитирующие,
или блокирующие АТ, не дающие видимых
реакций при соединении с АГ.

По
характеру действия на микроорганизмы
АТ:

Антимикробные
АТ
могут склеивать микробы — агглютинины,
осаждать белковые молекулы или частички
микробов — преципитины, растворять
бактерии — лизины, убивать бактерии
без заметного изменения их формы —
бактерицидные АТ. АТ, усиливающие
фагоцитоз, называют опсонинами, или
бактериотропинами. Существуют также
вирус-нейтрализующие АТ и иммобилизующие
АТ, обездвиживающие спирохет.
Антитоксические
АТ
обезвреживают экзотоксины бактерий.

Антиклеточные
АТ
дифференцируют на гемагглютинины
(склеивают эритроциты), гемолизины
(растворяют эритроциты) и цитотоксины
(умертвляют клетки животных).

Аутоантитела
вырабатываются организмом против
собственных белков и клеток тканей и
органов при изменении химической
структуры последних или при освобождении
АГ из разрушившихся органов и тканей. 

Циркулирующие
АТ обнаруживают в сыворотке крови и
различных жидкостях организма с
помощью иммунологических реакций:
агглютинации, преципитации, связывания
комплемента, иммунофлюоресценции.

Механизма
образования АТ: 1. Наличие естественных
АТ в организме является генетически
обусловленным, без всякого антигенного
раздражения. 2. Нормальные АТ являются
обычными иммунными АТ, образовавшимися
в ответ на попадание незначительных
доз микроорганизма, которые не в
состоянии были вызвать заболевание.
3. Выработка нормальных АТ происходит
в ответ на имеющиеся общие групповые
АГ пищи и микроорганизма.

Химическая
природа АТ. АТ связаны с глобулиновой
фракцией сывороточных белков. В
альбуминах их нет. Нормальные глобулины
сыворотки по степени подвижности в
геле при прохождении электрического
тока делятся на три фракции: а, в, у. АТ
в значительной части связаны с
у-глобулиновой фракцией, которая
увеличивается при заболевании или
иммунизации. При отсутствии у человека
у-глобулинов (агаммаглобулинемия) АТ
не вырабатываются. Активность АТ
выявляется также в а- и в-глобулиновых
фракциях. В настоящее время иммуноглобулины
делят на 5 классов: М, G, А, Е, D, отличающихся
между собой по химической структуре
и биологической функции.

IgG
— самый активный и наиболее важный в
развитии иммунитета при заболевании.
Он имеет молекулярную массу 160 000,
скорость осаждения 7S и содержит до 3%
углеводов. В начале заболевания IgG
мало, но по мере его развития количество
их значительно увеличивается и они
выполняют основную защитную функцию.

IgM
— макроглобулинами — первыми появляются
при развитии плода и после начала
заболевания. Молекулярная масса их
900 000. Они содержат до 10% углеводов,
имеют скорость осаждения 19S. Естественные,
или нормальные АТ являются
макроглобулинами.

IgA
— важны в защите слизистых оболочек
дыхательного и пищеварительного
трактов от проникновения микробов.
Они вырабатываются в плазматических
клетках, расположенных преимущественно
в подслизистом слое этих органов. IgA
легко прикрепляются к клеткам и
выделяются на поверхность слизистых
оболочек.

IgE
— реагиновые АТ. Реагины являются
причиной возникновения многих
аллергических заболеваний, в том числе
сенной лихорадки и астмы.

Динамика
образования АТ. Количество и длительность
сохранения АТ в организме зависят от
дозы, кратности и способа введения
АГ. При первичном попадании АГ в
организм различают две фазы: индуктивную
— от момента введения АГ до появления
антителообразующих клеток, и
продуктивную, которая наступает к
концу 1х суток и характеризуется
появлением АТ. Количество АТ быстро
нарастает к 4му дню и достигает
максимального уровня в крови на 7-8й
день. Это количество обычно сохраняется
в течение 10-15 дней, а затем, к 2-3 мес,
уменьшается.

При
повторном введении в организм того
же АГ индуктивная фаза бывает короче,
а продукция АТ — интенсивнее.

3.
ПИКОРНАВИРУСЫ. ПОЛИОМИЕЛИТ. КОКСАКИ
И ECHO.

Picornaviridae
— семейство, объединяющее маленькие
икосаэдрические вирусы высших
позвоночных, содержащих одноцепочечную
геномную РНК положительной полярности.
Размер капсида составляет около 27-30
нм, размер генома около 7-8 тысяч
оснований. Размножение пикорнавирусов
происходит в цитоплазме зараженной
клетки. Пикорнавирусы возбудители
полиомиелита, ринит, ящура, гепатита
А.

Полиомиелит.
Таксономия:
семейство Picornaviridae,
род
Enterovirus,
вид
Poliovirus.

Структура:
Полиовирусы.
РНК-содержащие
вирусы.

Морфология:
Мелкие, просто организованные вирусы,
сферической формы, состоят из
одноцепочечной РНК и капсида.

Культивирование:
Хорошо репродуцируются в первичных
и перевариваемых культурах клеток из
тканей человека и сопровождается
цитопатическим эффектом. В культуре
клеток под агаровым покрытием
энтеровирусы образуют бляшки.

Антигенные
свойства:
Различают
3 серотипа внутри вида: 1, 2, 3, не вызывающие
перекрес­тного иммунитета. Все
серотипы патогенны для человека.

Патогенез
и клиника:
Естественная воспри­имчивость
человека к вирусам полиомиелита
высокая. Входные ворота — слизис­тые
оболочки верхних дыхательных путей
и пищеварительного тракта. Первичная
репродукция вирусов происходит в
лимфатических узлах глоточного кольца
и тонкой кишки. Из лимфатической
системы вирусы проникают в кровь, а
затем в ЦНС, где избирательно поражают
клетки передних рогов спинного мозга
(двигательные нейроны). Инкубационный
период продолжается в среднем 7-14 дней.
3 клинические формы полиомиелита:
паралитическая, менингеальная (без
параличей), абортивная (легкая форма).
Заболевание на­чинается с повышения
температуры тела, об­щего недомогания,
головных болей, рвоты, болей в горле.

РНК-содержащие
вирусы.
II
семейство — Picornaviridae
включает 7 серотипов энтеровирусов
Коксаки и ECHO,
поражающих дыхательные пути, и 120
серотипов риновирусов;

Вирусы
Коксаки
— несколько видов РНК-содержащих
энтеровирусов которые хорошо
размножаются в желудочно-кишечном
тракте. Являются причиной возникновения
асептического менингита. После
перенесенной инфекции развивается
стойкий типоспецифический иммунитет.

Echo
(эховирусы)
— вид РНК-содержащего вируса, рода
Enterovirus, семейства Picornaviridae. Обнаружены
в желудочно-кишечном тракте, вирус
вызывает оппортунистические заболевания
(вызываемые условно-патогенными
бактериями, которые обычно не приводят
к болезни у здоровых особей).

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б09

1.
СТРУКТУРА И ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ
БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ.

Бактериальная
клетка состоит из клет стенки,
цитоплазматической мембраны, цитоплазмы
с включениями и яд­ра (нуклеоида).
Дополни­тельные структуры: капсула,
микрокапсула, слизь, жгутики, пили.
Некоторые бактерии в неблагоприятных
условиях спо­собны образовывать
споры.

Клеточная
стенка.
В
клет стенке грам+
бактерий
содержатся полисахариды, липиды,
белки. Основной компонент (40-90% массы
клет стенки) толстой клет стенки —
многослойный пептидогликан (муреин,
мукопептид). С пептидогликаном клет
стенки грам+ бактерий ковалентно
связаны тейхоевые кислоты.

В
клет
стенке грам- бакте­рий
— наружная
мембрана, связанная
посредством липопротеина
с
подлежащим слоем пептидогликана.
На
ультратонких срезах бактерий наружная
мембрана имеет вид волнообразной
трехслойной структуры, сходной с
внутрен­ней мембраной (цитоплазматической).
Основной компонент этих мембран —
бимолекулярный слой липидов. Внутренний
слой наружной мембраны представлен
фосфолипидами, а в наружном слое
расположен липополисахарид.

Функции
клет стенки:
1.
Форма клетки.
2. Защита клетки от
механических повреждений извне и
выдерживание внутреннего давления.
3.
Полупроницаемость — через нее
избирательно проникают из среды
питательные вещества.
4. Несет на
своей поверхности рецепторы для
бактериофагов и различных хим веществ.

Выявление
клет стенки
— электронная микроскопия, плазмолиз.

L-формы
бактерий
— полностью или частично лишенные клет
стенки. Своеобразная морфология в
виде крупных и мелких сферических
клеток. Способны к размножению.

Цитоплазматическая
мембрана
— под клет стенкой (между ними —
периплазматическое пространство). По
строению — сложный липидобелковый
комплекс.

Функции
цитоплазматической мембраны:
1.
Осмотический и онкотический барьер.
2.
Участвует в энергетическом метаболизме
и в активном транспорте пит веществ
в клетку, так как является местом
локализации пермеаз и ферментов
окислительного фосфорилирования.
3.
Дыхание и деление.
4. Синтез компонентов
клет стенки (пептидогликана).
5.
Участвует в выделении из клетки
токсинов и ферментов.

Выявление
цитоплазматической мембраны
— электронная микроскопия.

2.
ГНТ.

ГНТ
— ги­перчувствительность, обусловленная
АТ (IgE,
IgG,
IgM)
против аллергенов. Развивается сразу
после воздействия аллергена: рас­ширяются
сосуды, повышается их проницаемость,
зуд, бронхоспазм, сыпь, отеки. Поздняя
фаза ГНТ дополня­ется действием
продуктов эозинофилов и нейтрофилов.

К
ГНТ относятся типы реакций
гиперчувствительности (по Джеллу и
Кумбсу):

I
тип —
анафилактический,
действие IgE. При
первичном контакте с АГ образуются
IgE,
которые прикрепляются Fc-фрагментом
к тучным клеткам и базофилам. Повторно
вве­денный АГ перекрестно связывается
с IgE
на клетках, вызывая их дегрануляцию,
выброс гистамина. Первичное поступление
аллергена вызывает продук­цию
плазмацитами IgE,
IgG4.
При повторном поступ­лении аллергена
на тучных клетках и базофилах образуются
комплексы IgE
с аллергеном, вызывающие дегрануляцию
клеток.

Клиника:
Атопия
— наследственная предрасположенность
к развитию ГНТ, обусловленная повы­шенной
выработкой IgE-АТ
к аллергену, повышенным количеством
Fc-рецепторов
для этих АТ на тучных клет­ках,
особенностями распределения тучных
клеток и повы­шенной проницаемостью
тканевых барьеров.

Анафилактический
шок —
протекает остро с развитием коллапса,
отеков, спазма гладкой мускулатуры;
заканчи­вается смертью. Крапивница
—
увеличивается проницае­мость
сосудов, кожа краснеет, появляются
пузыри, зуд. Бронхиальная
астма —
воспаление, бронхоспазм, усиливается
секреция слизи в бронхах.

II
тип —
цитотоксический,
действие IgG, IgM. АГ,
расположенный на клетке узнается АТ
классов IgG,
IgM.
При взаимо­действии типа клетка-АГ-АТ
происходит актива­ция комплемента
и разрушение клетки по трем направлениям:
комплементзависимый цитолиз; фагоцитоз;
антителозависимая клеточная
цитотоксичность.

Ко
II
типу близки антирецепторные реакции
(IV
тип гиперчувствительности), основой
которых являются антирецепторные АТ
(АТ против рецепторов к гормонам).

Клиника:
Аутоиммунные
болезни (появление аутоантител к АГ
собственных тканей): злокачественная
миастения, аутоиммун­ная гемолитическая
анемия, инсулинозависимый диабет II
типа.

Аутоиммунную
гемолитическую анемию вызывают
АТ против Rh-АГ
эритроцитов; эритроциты разруша­ются
в результате активации комплемента
и фагоцитоза. Ле­карственно-индуцируемые
гемолитическая анемия, гранулоцитопения
и тромбоцитопения сопровождаются
появле­нием АТ против лекарства —
гаптена и цитолизом кле­ток, содержащих
этот АГ.

III
тип —
иммунокомплексный,
образование иммунного комплекса IgG,
IgM с АГ. АТ
классов IgG,
IgM
образуют с растворимыми АГ иммунные
комплексы, которые активируют
комплемент. При избытке АГ иммунные
комплексы откладывают­ся на стенке
сосудов, базальных мембранах (структурах,
имеющих Fc-рецепторы).

Первичные
компоненты III
типа — растворимые иммунные комплексы
АГ-АТ и комплемент (анафилатоксины
С4а, СЗа, С5а). Поврежде­ния обусловлены
тромбоцитами, нейтрофилами, иммунными
комплексами, комплементом. Привлекаются
воспалительные цитокины, включая
TNF—a
и хемокины. Макрофаги вовлекаются на
поздних стади­ях.

Развивается
через 3-10 ч после экспозиции АГ, как в
реакции Артюса. АГ может быть экзогенный
(хронические бактериальные, вирусные,
грибковые, протозойные инфекции) или
эндогенный (системная эритематозная
волчанка).

Клиника:
Сывороточная
болезнь —
введение высоких доз АГ (лошадиной
противостолбнячной сы­воротки).
Через 6-7 дней в крови появляются АТ
про­тив лошадиного белка, которые,
взаимодействуя с данным АГ, образуют
иммунные комплексы, откладывающие­ся
в стенках кровеносных сосудов и тканях.
Развиваются си­стемные васкулиты,
артриты (отложение комплексов в
суста­вах), нефрит (отложение
комплексов в почках).

Реакция
Артюса развивается
при повторном внутрикожном введении
АГ, который локально образует иммун­ные
комплексы с ранее накопившимися АТ.
Прояв­ляется отеком, геморрагическим
воспалением.

3.
ВОЗБУДИТЕЛИ
БРЮШНОГО ТИФА И ПАРАТИФОВ.

Брюшной
тиф и паратифы
А
и В
—
острые кишечные инфек­ции,
характеризующиеся поражением
лимфатического аппарата ки­шечника,
выраженной интоксикацией. Возбудители
Salmonella
typhi,
S.
paratyphi
А и
S.
schottmuelleri.

Таксономия:
Отдел Gracilicutes,
семей­ство
Enterobacteriaceae,
род
Salmonella.

Морфологические
и тинкториальные свойства:
Мелкие грам- палочки с закругленными
конца­ми. В мазках располагаются
беспорядочно. Не образуют спор, имеют
микрокапсулу, перитрихи.

Культуральные
свойства:
Факульта­тивные анаэробы. Оптимальная
для роста темпера­тура 37С. Растут
на простых питательных средах.
Элективная среда — желчный бульон.

Биохимическая
активность:
Высокая, но они не сбраживают лактозу.
S.typhi
менее
активна, чем возбудители паратифов.

Антигенные
свойства и классификация:
Имеют О—
и
H-АГ,
состоящие из ряда фракций. Каждый вид
обладает определенным набором АГ. Все
виды сальмонелл, имеющие общую групповую
фракцию 0-АГ, объединены в одну группу.
Таких групп насчитывается 65. S.typhi
и
некоторые другие сальмонеллы имеют
Vi—АГ
(разновидность К-АГ), с этим АГ связывают
вирулен­тность бактерий, их
устойчивость к фагоцитозу.

Факторы
патогенности:
Образуют эндо­токсин, обладающий
энтеротропным, нейротропным и пирогенным
действием. С белками наружной мембраны
связаны адгезивные свойства, наличие
микрокапсулы обусловливает устойчивость
к фагоцитозу.

Резистентность:
Устойчивы к низ­кой температуре.
Чувствительны к дезинфицирующим
веществам, высокой температуре,
ультрафиолетовым лучам. В пищевых
продуктах (мясе, молоке) могут долго
сохраняться и размножаться.

Эпидемиология:
Брюшной тиф и паратиф А
—
антропонозные инфекции (больной
человек, носитель). Источник паратифа
В
— сельскохозяйственные
животные. Механизм заражения
фекально-оральный.

Патогенез:
Возбудители попадают в организм через
рот, достигают тонкой кишки, где в ее
лимфатических образованиях размножаются
и попадают в кровь (стадия бактериемии).
С током крови они разносятся по всему
организму, внедряясь в паренхиматозные
органы (селезенку, печень, почки,
костный мозг). При гибели бактерий
освобождается эндотоксин, вызывающий
интоксикацию.

Клиника:
Инкубационный период 12 дней. Болезнь
начинается остро: с повышения t,
по­явления слабости, утомляемости;
нарушаются сон и аппетит. Для брюшного
тифа характерны помутнение сознания,
бред, галлюцинации, сыпь. Тяжелые
осложнения — прободение стенки кишки,
перитонит, кишечное кровотечение,
возникающие в результате некроза
лимфатических образований тонкой
кишки.

Иммунитет:
После перенесенной болезни проч­ный
и продолжительный.

Микробиологическая
диагностика.
Бактериологический:
посев
и выделение S.
typhi
из крови (гемокультура), фекалий
(копрокультура), мочи (уринокультура),
желчи, костного мозга. РИФ для обнаружения
АГ возбудителя в биологических
жидкостях. Серологический
ме­тод обнаружения
0- и Н-АТ в РПГА. Бактерионосителей
выявляют по обнаружению Vi-АТ
в сыворотке крови с по­мощью РПГА и
положительному результату
бактериологического; выделения
возбудителя. Для внутривидовой
идентификации применяют фаготипирование.

Лечение:
Антибиотики. Иммуноантибиотикотерапия.

Профилактика:
Вакци­нация — брюшнотифозная
химическая и брюшно-тифозная спиртовая
вакцина, обогащенная Vi-АГ.
Для экстренной профилактики —
брюшнотифозный бакте­риофаг.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б12

1.
СТРУКТУРА И ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ
БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ.

Бактериальная
клетка состоит из клет стенки,
цитоплазматической мембраны, цитоплазмы
с включениями и яд­ра (нуклеоида).
Дополни­тельные структуры: капсула,
микрокапсула, слизь, жгутики, пили.
Некоторые бактерии в неблагоприятных
условиях спо­собны образовывать
споры.

Клеточная
стенка.
В
клет стенке грам+
бактерий
содержатся полисахариды, липиды,
белки. Основной компонент (40-90% массы
клет стенки) толстой клет стенки —
многослойный пептидогликан (муреин,
мукопептид). С пептидогликаном клет
стенки грам+ бактерий ковалентно
связаны тейхоевые кислоты.

В
клет
стенке грам- бакте­рий
— наружная
мембрана, связанная
посредством липопротеина
с
подлежащим слоем пептидогликана.
На
ультратонких срезах бактерий наружная
мембрана имеет вид волнообразной
трехслойной структуры, сходной с
внутрен­ней мембраной (цитоплазматической).
Основной компонент этих мембран —
бимолекулярный слой липидов. Внутренний
слой наружной мембраны представлен
фосфолипидами, а в наружном слое
расположен липополисахарид.

Функции
клет стенки:
1.
Форма клетки.
2. Защита клетки от
механических повреждений извне и
выдерживание внутреннего давления.
3.
Полупроницаемость — через нее
избирательно проникают из среды
питательные вещества.
4. Несет на
своей поверхности рецепторы для
бактериофагов и различных хим веществ.

Выявление
клет стенки
— электронная микроскопия, плазмолиз.

L-формы
бактерий
— полностью или частично лишенные клет
стенки. Своеобразная морфология в
виде крупных и мелких сферических
клеток. Способны к размножению.

Цитоплазматическая
мембрана
— под клет стенкой (между ними —
периплазматическое пространство). По
строению — сложный липидобелковый
комплекс.

Функции
цитоплазматической мембраны:
1.
Осмотический и онкотический барьер.
2.
Участвует в энергетическом метаболизме
и в активном транспорте пит веществ
в клетку, так как является местом
локализации пермеаз и ферментов
окислительного фосфорилирования.
3.
Дыхание и деление.
4. Синтез компонентов
клет стенки (пептидогликана).
5.
Участвует в выделении из клетки
токсинов и ферментов.

Выявление
цитоплазматической мембраны
— электронная микроскопия.

2.
ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ.

Противоэпидемические
действия — ряд взаимодополняющих мер,
обеспечивающих предупреждение
инфекционных болезней среди групп
населения, снижение заболеваемости
и уничтожение отдельных инфекций.

Основные
методы профилактики:
Иммунопрофилактика организма;
Ограничение социальных контактов;
Химиопрофилактика — применение хим
лекарственных препаратов от заражения;
Повышение общей сопротивляемости
организма к инфекционному заболеванию.

Проникновение
вируса в организм:

1.
Вирусы растений проникают в организм
по типу раневых инфекций, где
распространяются по плазмодесмам,
ксилеме и флоэме.

2.
Вирусы бактерий — путем введения
нуклеиновой кислоты в тело клетки или
путем проникновения вириона.

3.
Вирусы насекомых попадают в организм
в процессе питания или размножения.

4.
Вирусы животных и человека при
инфицировании организма проходят
сложный путь. Одни вирусы (вирус гриппа,
ротавирусы) реплицируются и вызывают
заболевание в месте проникновения в
организм (входные ворота инфекции).
Другие вирусы, попав в организм с
использованием того или иного механизма,
проходят стадию распространения.
Распространение вируса в организме
сопровождается виремией — циркуляцией
вируса в крови, что свидетельствует
о генерализации инфекции.

Пути
распространения вирусов в организме:

1.
Нейронный путь (вирусы бешенства,
герпеса).

2.
Лимфатический путь (реовирусы,
полиомавирусы).

3.
Гематогенный путь, ассоциированный
с клеточными компонентами и плазмой
крови (вирус краснухи, вирусы гепатита
B и C, цитомегаловирус, энтеровирусы).

3.
ГЕПАТИТЫ
А И Е.

ГЕПАТИТ
А.
Острая инфекционная болезнь, с
лихорадкой, поражением печени.
Антропоноз.

Таксономия,
морфология, антигенная струк­тура:
Семейство
Picornaviridae
род
Hepatovirus.
Типовой
вид -имеет один серотип. РНК-содержащий
вирус, просто организо­ванный, имеет
один вирусоспецифический АГ.

Культивирование:
Выращивают
в культурах клеток. Цикл репродукции
длительный, цитопатический эффект не
выражен.

Резистентность:
Устойчивос­ть
к нагреванию; инактивируется при
кипячении 5 мин. Устойчив во внешней
среде.

Эпидемиология:
Источник
— больные. Механизм передачи —
фекально-оральный. Вирусы выделяются
с фекалиями в начале клинических
проявлений. С появлением желтухи
интенсив­ность выделения вирусов
снижается. Передаются через воду,
пищевые продукты, руки.

Болеют
дети в возрасте от 4 до 15 лет.

Патогенез:
После
заражения репликация вирусов происходит
в кишечнике, а оттуда че­рез портальную
вену они проникают в печень и
реплицируются в цитоплазме гепатоцитов.
Повреждение гепатоцитов возникает в
ре­зультате иммунопатологических
механизмов.

Клиника:
Инкубационный период от 15 до 50 дней.
Начало острое, с повышением температуры
и тошнотой, рвотой. Возможно появление
желтухи на 5й день. Клиническое течение
заболевания без особых осложнений.
Продолжительность 2 нед. Хронические
формы не развиваются.

Иммунитет:
После инфекции — стойкий пожизненный
иммунитет, связан­ный с IgG.
В начале заболевания в крови IgM,
которые сохраняются в ор­ганизме в
течение 4 мес и имеют диа­гностическое
значение. Помимо гумо­рального,
развивается и местный иммунитет в
кишечнике.

Микробиологическая
диагностика.
Материа­л
— сыворотка и испражнения. Диагностика
основана на определении в крови IgM
с помощью ИФА, РИА и иммунной электрон­ной
микроскопии. Этими же методами можно
обнаружить вирусный АГ в фекалиях.

Лечение:
Симптоматическое.

Профилактика:
Неспецифическая
профи­лактика. Для специфической
пассивной профилак­тики используют
Ig.
Иммунитет сохраняется 3 мес. Для
специфической активной профилактики-
инактивированная культуральная
концентрированная вакцина. Рекомбинантная
генно-инженерная вакцина.

ГЕПАТИТ
Е.
Антропоноз.

Таксономия:
Семейство Caliciviridae.
Группа
гепатит Е-подобных вирусов.

Структура:
Вирион безоболочечный, сфери­ческий.
Геном — однони­тевая плюс-РНК, которая
кодирует РНК-зависимую РНК-полимеразу,
папаинподобную протеазу и трансмембранный
белок, обеспе­чивающий внедрение
вируса в клетку.

Эпидемиология,
клиника:
Механизм передачи — фекально-оральный.
Инкубационный период 2-6 нед. Поражение
печени, интоксикацией, желтухой.

Иммунитет:
После
перенесенного заболева­ния стойкий.

Микробиологическая
диагностика.
Серо­логический
метод
— в сыворотке, плазме кро­ви с помощью
ИФА определяют: АТ к вирусу (анти-HEV
IgM,
анти-HEV
IgG);
Молекулярно-генетический
метод
— при­меняют ПЦР для определения РНК
вируса (HEV
RNA)
в кале и в сыворотке крови боль­ных
в острой фазе инфекции.

Лечение:
Симптоматическое.
Беременным рекомендуется введение
специфического Ig.

Профилактика:
Неспецифическая — улучшение
санитарно-гигиенических условий и
снабжение качественной питьевой
водой. Созданы неживые цельновирионные
вакцины, раз­рабатываются рекомбинантные
и живые вакцины.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б15

1.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ. МЕТОДЫ ОКРАСКИ.

Бактерии
—
микроорганизмы, не имеющие оформлен­ного
ядра (прокариоты). Они имеют разнообразную
форму и довольно сложную структуру,
определяющую многообразие их
функциональной дея­тельности.

Бактерии
шаровидной формы (кокки)
в зависимости от плоскости деления и
расположения относительно друг друга
от­дельных особей подразделяются
на микрококки (отдельно лежащие),
диплококки (парные), стрептококки
(цепочки), стафилококки (виноградные
грозди), тетракокки (четырех кокка) и
сарцины (паке­ты из 8 или 16 кокков).

Палочковидные
(цилиндрические) бактерии
располагаются в виде оди­ночных
клеток, дипло- или стрептобактерий.

Извитые
формы бактерий
—
вибрионы
и спириллы, спирохеты. Вибрионы имеют
вид слегка изогнутых палочек, спириллы
—
извитую
форму с несколькими спиральными
завит­ками.

Размеры
бактерий
от 0,1 до 10 мкм. Состав бак­териальной
клетки: капсула, клет стенка,
цитоплазматическая мембрана и
цитоплазма (содержатся нуклеоид),
рибосомы и включения. Некоторые
снабжены жгутиками и ворсинками.
Некоторые образуют споры, которые
располагаются терминально,
субтер­минально, центрально; превышая
поперечный раз­мер клетки, споры
придают ей веретенообразную форму.

Методы
окраски.
Окраска
мазка простым методом — окраска
препарата одним красителем; сложным
методом (по Граму, Цилю – Нильсену,
Ауески, Нейссера, Бури-Гинса) включает
последовательное использование
нескольких красителей и имеет
диффе­ренциально-диагностическое
значение. Отношение микроорганиз­мов
к красителям — тинкториальные свойства.
Специальные методы — для выявления
жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида
и разных цитоплазматических включений.

При
простых методах мазок окрашивают
одним красителем, ис­пользуя красители
анилинового ряда (основные или кис­лые).
Если красящий ион (хромофор) — катион,
то краситель обладает основными
свойствами, если хромо­фор — анион,
то краситель имеет кислые свойства.
Кис­лые
красители
— эритрозин, кислый фуксин, эозин.
Ос­новные
красители
— генциановый фиолетовый, кристал­лический
фиолетовый, метиленовый синий, основной
фуксин. Основные
красители более интенсивно
связываются кислыми компонентами
клетки. Из сухих красителей, в виде
порошков, готовят на­сыщенные
спиртовые растворы, а из них —
водно-спирто­вые, которые и служат
для окрашивания микробных кле­ток.
Микроорганизмы окрашивают, наливая
краситель на поверхность мазка на
определенное время. Окраску основным
фуксином ведут в течение 2 мин,
метиленовым синим — 5-7 мин. Затем мазок
промывают водой, высушивают промоканием
фильтровальной бумагой и микроскопируют
в иммерсионной системе. Ес­ли мазок
правильно окрашен и промыт, то поле
зрения совершенно прозрачно, а клетки
окрашены.

Сложные
методы окраски применяют для изуче­ния
структуры клетки и дифференциации
микроорганиз­мов. Окрашенные мазки
микроскопируют в иммерсион­ной
системе. Последовательно нанести на
препа­рат определенные красители,
различающиеся по химическому составу
и цвету, протравы, спирты, кислоту.

2.
РЕАКЦИЯ АНТИГЕН — АНТИТЕЛО.

Специфическое
связывание АГ с соответствующим АТ,
приводящее к образованию иммунного
комплекса. АГ-АТ реакция обусловлена
комплементарностъю взаимодействующих
структур и осуществляется под действием
гидрофобных, водородных, электростатических
связей и сил Ван-дер-Ваальса (АГ при
этом соединяется так называемой АГ
детерминантой, а АТ — активным центром).
Основа формы проявления АГ-АТ реакции
— агглютинация, преципитация,
нейтрализация токсинов, специфическая
опсонизация и иммобилизация бактерий,
цитолитические реакции с участием
комплемента. АГ-АТ реакция — основа
гуморального иммунитета. С неё
начинается обезвреживание токсинов,
устранение болезнетворных микроорганизмов
и собственных клеток с изменённой
поверхностной мембраной. В то же время
образование иммунных комплексов — это
патогенетический механизм анафилаксии,
сывороточной болезни и аутоиммунных
заболеваний. АГ-АТ реакции, проводимые
in vitro, используются в иммунодиагностике
— для выявления возбудителя инфекционных
заболеваний, типирования АГ
гистосовместимости, определения
специфичности и интенсивности иммунного
ответа, для стандартизации
иммунобиологических препаратов.

Серологическая
реакция — исследуется реакция АГ
(микроба, вируса, чужеродного белка)
с АТ сыворотки крови. Серологические
реакции используют при переливании
крови, для определения групп крови,
установления видовой и индивидуальной
специфичности белков.

Основная
задача серологии — разработка методов
получения специфических диагностических
и лечебных сывороток, оценка их
активности и выяснение механизма
действия.

3.
ТУЛЯРЕМИЯ.

Таксономия:
Отдел Gracilicutes
род Francisella.
Возбудитель — F.tularensis.

Морфология:
Мелкие кокковидные полиморфные
палочки, неподвижные, грам-, не образующие
спор, могут образовывать капсулу.

Культуральные
свойства: Факультативный
аэроб, оптим. температура 37С. На простых
питательных средах не растет.
Культивируется на желточных средах,
на средах с добавлением крови и
цистеина. Рост медленный. Образуют
мелкие колонии, круглые с ровным краем,
выпуклые, блестящие.

Биохимические
свойства:
Слабо ферментируют до кислоты без
газа глюкозу, мальтозу, левулезу,
маннозу, образуют H2S.
По вирулентности разделен на подвиды:
голарктическую (не ферментирует
глицерин, цитруллин); неарктическую
(ферментирует глицерин, не ферментирует
цитруллин); среднеазиатскую (ферментирует
глицерин и цитруллин, мало вирулентен).

АГ
свойства:
Содержит соматический О-и поверхностный
Vi—
АГ. Имеют АГ близость с бруцеллами. В
R-форме
теряют Vi-АГ,
а вместе с ним вирулентность и
иммуногенность.

Факторы
патогенности:
Связаны с оболоченным АГ комплексом
и токсическими веществами типа
эндотоксина. Неарктический подвид —
высокая патогенность для человека
при кожном заражении, голарктический
и среднеазиатский подвиды — умеренно
патогенны. Вирулентны S-формы
колоний. Вирулентность обусловлена:
капсулой, угнетающей фагоцитоз;
нейраминидазой, способствующей
адгезии; эндотоксином (интоксикация);
аллергенными свойствами клеточной
стенки;

Эпидемиология:
Природно-очаговое заболевание. Источник
— грызуны. Передача возбудителя через
клещей, комаров.

Резистентность:
В окружающей среде сохраняется долго,
нестоек к высокой температуре,
чувствителен к антибиотикам (тетрациклин,
левомицетин).

Патогенез:
На
месте внедрения возбудителя (кожа,
слизи­стые оболочки глаз, дыхательных
путей, желудочно-кишечного тракта)
развивается первичный воспалительный
очаг, откуда воз­будитель
распространяется по лимфатическим
сосудам и узлам, поражая их с образованием
первичных бубонов; в различных органах
формируются гранулемы.

Клиника:
Инкубационный период 3-7 дней. Начинается
остро, внезапно с повышения темпера­туры
тела. Клинические формы туляремии:
бубонная, язвенно-бубонная, глазо-бубонная,
абдоминальная, легочная и генерализованная
(септи­ческая).

Иммунитет:
Со­храняется длительно; развивается
аллергизация организма к АГ возбудителя.

Микробиологическая
диагностика.
Бактериоскопическое
исследование:
Из
исследуе­мого материала готовят
мазки, окрашивают по Грамму. В чис­той
культуре — мелкие кокки. Преобладают
палочковидные формы. Спор не образуют,
грам-.

Бактериологическое
исследование и биопроба:
Применяются
для выделения чистой культуры бактерий.
Чувствительные животные — мыши и
морские свинки, которые погибают даже
при подкожном введении единичных
бактерий. Выделение бактерий туляремии
проводят на свернутой яично-желточной
среде, глюкозоцистиновом кровяном
агаре. Вирулентные штаммы образуют
S-формы
колоний — мел­кие, гладкие, беловатого
цвета с голубоватым оттенком.

Идентификацию
чистой культуры проводят по морфологии
бактериальных клеток, характеру роста,
биохимическим и АГ свойствам.
Биохимические свойства этих бактерий
вы­являются на специальной плотной
среде с ограниченным содер­жанием
белка.

Серодиагностика:
Реакция
агглютинации с туляремийным
диагностикумом. Позднее появление
агглютининов в крови (на 2й неделе)
затрудняет применение этой реакции
для ранней диагностики, однако их
длительное сохранение делает возможной
ретроспективную диагностику. Обязательно
прослежива­ется нарастание титра
агглютинации. Чувствительный метод
серодиагностики — РПГА.

Для
экспресс-диагностики применяется
кровяно-капельная ре­акция: кровь
из пальца наносят на стекло, добавляют
каплю дистиллированной воды (для
лизиса эритроцитов), вносят каплю
диагностикума и смешивают стеклянной
палочкой. При наличии в крови агглютининов
в диагностическом титре (1:100 и выше) в
капле немедленно на­ступает
агглютинация диагностикума; при титрах
ниже диагно­стических агглютинация
происходит через 2-3 мин.

Лечение:
Антибиотики стрептомицинового и
тетрациклинового ряда. В случае
затяжного течения — комбинированная
антибиотикотерапия с использованием
убитой лечебной сыворотки.

Профилактика:
Специфическая. Туляремийный
диагностикум — взвесь
убитых бактерий туляремии, применяется
в случае постановки реакции агглютинации
при серодиагностике.

Тулярин
—
взвесь туляремийных бактерий (вакцинного
штамма), убитых нагреванием, для
постановки кожно-аллергической пробы.

Туляремийная
живая сухая накожная вакцина — высушенная
живая культура вакцинного штамма, для
профилактики.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б18

1.
МИКРОФЛОРА.

Нормальная
микрофлора — микроорганизмы находится
в равновесии (эубиоз)
друг
с другом и организмом человека.
Микрофлора — стабильное сообщество
микроорганизмов (микробиоценоз).
Место
обитания сообщества микроорга­низмов
— биотоп.
В
норме микроорганизмы отсутству­ют
в легких и матке.

Резидентная
(постоянная) облигатная микрофлора
— микроорганизмы, постоянно присутствующие
в организме.

Транзиторная
(непостоянная) микрофлора
не способна к длительному существованию
в организме.

В
тонкой кишке микроорганизмов больше,
чем в желуд­ке; обнаруживаются
бифидобактерии, клостридии, эубактерии,
лактобациллы, анаэробные кокки.

Наибольшее
количество микроорганизмов накапливается
в толстой кишке. В 1 г фе­калий
содержится до 250 млрд микробных клеток.
95 % всех видов микроорганизмов —
анаэробы. Представители микрофлоры
толстой кишки: грам+ анаэробные палочки
(бифидобактерии, лактобацил­лы,
эубактерии); грам+ спорообразующие
анаэроб­ные палочки (клостридии,
перфрингенс); энтерококки; грам-
анаэробные палочки (бактероиды); грам-
факультативно-анаэробные палочки
(кишечные палоч­ки).

Микро­флора
толстой кишки. Антагонистгнилостной
микрофлоры, т.к. продуцирует молочную,
уксусную кислоты, антибиоти­ки.
Участвует в водно-солевом обмене,
регуляции газового состава кишечника,
обмене белков, углеводов, жирных
кислот, холестерина и нуклеиновых
кислот, продукции биологически активных
соединений — антибиотиков, витаминов,
токсинов.

Морфокинетическая
роль микрофлоры — участие в развитии
органов и систем организма; участие
в физиологическом воспалении сли­зистой
оболочки и смене эпителия, переваривании
и детоксикации экзогенных субстратов
и метаболитов. Нормальная микрофлора
выполняет антимутагенную роль, разрушая
канцерогенные вещества.

Пристеночная
микрофлора кишечника колонизирует
слизис­тую оболочку в виде микроколоний,
образуя био­логическую пленку,
состоящую из микробных тел и
экзополисахаридного матрикса.
Экзополисахариды микроорганизмов
(гликокаликс) защищают микробные
клетки от физико-химических и
биологических воздействий. Слизистая
оболочка кишечника находится под
защитой биологической пленки.

2.
ГЗТ.

Аллергические
реак­ции: ГНТ — реакции, проявляющиеся
че­рез 20-30 мин после повторной встречи
с АГ; ГЗТ — реакции, возникающие через
24-48 ч. ГНТ — вы­работка АТ; ГЗТ —
клеточные реакции.

ГЗТ
— клеточные механизмы с участием
Т-лимфоцитов.

ГЗТ
возникает при сенсибилизации организма:

1.
Микроорганизмами и микробными АГ
(бактериальны­ми, грибковыми,
протозойными, вирусными);
2.
Гельминтами;
3.
Природными и искусственно синтезированными
гаптенами (лекарственные препараты,
красители);
4.
Некоторыми
белками.

ГЗТ
вызывает­ся всеми АГ. Ярко про­является
на введение полисахаридов,
низкомолекулярных пептидов
(малоиммуногенных АГ). Реакцию вызывают
малые дозы АГ при внутрикожном введении.

Механизм
— сен­сибилизация Т-лимфоцитов-хелперов
АГ. Сенсибилизация лимфоцитов вызывает
выделение медиаторов (интерлейкина-2),
которые активируют макрофаги и
вов­лекают их в процесс разрушения
АГ, вызвавшего сенсибилизацию
лимфоцитов. Т-лимфоциты проявляют
цитотоксичность. Роль лимфоцитов в
возникновении аллер­гий клеточного
типа — возможность передачи ал­лергии
от сенсибилизированного животного
несенсибилизированному с помощью
введения лимфоцитов, подавление
реакции при помощи антилимфоцитарной
сыворотки.

Морфологическая
картина — воспалительный характер,
обусловленный реакцией лимфо­цитов
и макрофагов на образующийся комплекс
АГ с сен­сибилизированными лимфоцитами.

Формы
проявления:

Туберкулиновая
реакция
возникает через 5-6 ч после внутрикожного
введения сенсибилизированным
туберкулезной палоч­кой животным
или человеку туберкулина, т.е. АГ
тубер­кулезной палочки. Выражается
реакция в виде покраснения, при­пухлости,
уплотнения на месте введения туберкулина.
Повышение температуры, лимфопения.
Достигает максимума через 24-48 ч.
Туберкули­новая реакция используется
с диагностической целью для вы­явления
заболеваний туберкулезом или контактов
организма с туберкулезной палочкой.

Замедленная
аллергия
возникает при сенсибилизации малы­ми
дозами белковых АГ с адъювантом, а
также конъюгатами белков с гаптенами.
В этих случаях аллергическая реак­ция
возникает через 5 дней и длится 2-3 нед.

Контактная
аллергия
возникает, если АГ являются
низкомолекулярные органические и
неорганические вещества, которые в
организме соединяются с белками,
образуя конъюга-ы. Конъюгированные
соединения, выполняя роль гаптенов,
вы­зывают сенсибилизацию. Возникает
при контакте с химическими веществами
(фармацевтическими препаратами,
красками, косметикой). Прояв­ляется
в виде дерматитов.

Значение:
Механизмы лежат в основе воспаления,
которое способствует локализации
инфекционного агента или АГ в пределах
определённых тканей и формированию
полноценной иммунной реакции защитного
характера.

Аллергопроба —
метод диагностики аллергических
заболеваний. Кожные — количественные
и качественные пробы, прямые и непрямые
пробы, провокационные пробы. Аллерген
(возбудитель заболевания) вводится в
организм пациента и наблюдается
реакция организма пациента на аллерген.
Пробы выполняют в период улучшения
состояния через 2-3 недели после
перенесенной аллергической реакции,
т.к. чувствительность организма к
аллергену в течение этого времени
снижается.

Прямая
кожная проба — аллерген
контактирует с кожей больного при
повреждении (укол, царапина, внутрикожное
введение), либо наносится на неповрежденную
кожу в виде капли или аппликации. При
положительной реакции на месте
внедрения аллергена развивается
покраснение или волдырь. Немедленная
реакция развивается через 20 минут,
замедленная — через 24-48 часов. Степень
чувствительности проб увеличивается:
капельная, аппликационная, укол, через
царапину, внутрикожная.

Непрямая
кожная проба —
человеку внутрикожно вводится сыворотка
крови больного, через 24 часа в то же
место вводят аллерген. По развитию
местной кожной реакции судят о наличии
АТ в сыворотке.

Провокационные
пробы показаны
при несоответствии данных
аллергологического анамнеза и
результатов кожных проб. Основаны на
воспроизведении аллергических реакций
путем введения аллергена в орган или
ткань, поражение которых является
ведущим в картине заболевания. Различают
конъюктивальные (аллергический
конъюнктивит), назальные (аллергический
ринит и поллиноз) и ингаляционные
(бронхиальная астма).

3.
ХОЛЕРА.

Возбудитель
— Vibrio
cholerae,
серогрупп О1 и О139. Токсическое поражение
тонкого кишечника, нарушение
водно-солевого баланса.

Морфологические
и культуральные свойства:
Один
полярно расположенный жгутик. Под
действием пенициллина образуются
L-формы.
Грам-, спор не образуют. Факультативный
анаэроб. Не требователен к питательным
средам. Температурный опти­мум 37C.

На
плотных средах образуют мел­кие
круглые прозрачные S-колонии
с ровными краями. На скошенном агаре
образуется жел­товатый налет. В
непрозрачных R-колониях
бактерии становятся устойчивыми к
действию бактериофагов, антибиотиков
и не агглютинируются О-сыворотками.

Биохимические
свойства:
Сбраживают
до кислоты глк, мальтозу, сахарозу,
маннит, лактозу, крахмал. 6 групп по
отноше­нию к трем сахарам (манноза,
сахароза, арабиноза). 1 — истинные
возбудители холеры, разлагающие
маннозу и сахарозу и не разлагающие
арабинозу: разлагают белки до аммиака
и ин­дола. H2S
не образуют.

АГ
структура:
Термостабильный
О-АГ и термолабильный Н-АГ (общий).

Возбудители
классической холеры и холеры Эль-Тор
объединяются в серогруппу 01. АГ
серогруппы 01 включают в раз­личных
сочетаниях А-, В- и С-субъединицы.
Сочетание субъединиц АВ — серовар
Огава, АС — серовар Инаба, ABC
— Гикошима. R-формы
— нет О-АГ.

Резистентность:
Плохо
переносят высушивание. Сохраняются
в водоемах, пи­щевых продуктах..
Биовар Эль-Тор более устойчив.

Эпидемиология:
Острая
кишечная инфекция. Передача —
фекально-орально. Путь передачи —
водный, пищевой. Источник — больной
или вибрионоситель.

Факторы
патогенности:
Пили
адгезии;
фермент
муциназа, разжижающий слизь и
обеспечивающий доступ к эпите­лию.
Эпителиальные клетки выделяют ще­лочной
секрет, который в сочетании с желчью
является питательной средой для
размножения вибрионов. Экзотоксин
холероген
—
тер­молабильный белок, чувствителен
к протеолитическим ферментам. Холероген
содержит 2 субъединицы: А и В. А
активизиру­ет внутриклеточную
аденилатциклазу, происходит повышение
выхода жидкости в просвет кишечника
(диарея, рвота). Фермент
нейраминидаза
усиливает
связывание холерного экзо­токсина
с эпителием слизистой кишечника.
Эндотоксин
запускает каскад арахидоновой кислоты,
которая запускает синтез простагландинов
(сокращение глад­кой мускулатуры
тонкого кишечника и подав­ление
иммунного ответа).

Клинические
проявления:
Инкубационный
период 2-3 дня. Боль в животе, рвота,
диарея.

Иммунитет:
Гуморально-клеточный.
При выздоровлении возникает напряженный
не­продолжительный иммунитет.

Микробиологическая
диагностика.
Материал
— кал, рвота, вода.
Экспресс-диагностика
— РИФ, ПЦР.

Лечение:
1. Регидратация (восполнение потерь
жид­кости и электролитов введением
изотонических растворов, а также
плазмозаменяющих жидкостей внутривенно;
2.
Антибактериальная терапия (тетрациклины,
фторхинолоны).

Профилактика:
Антибио­тиками
широкого спектра действия,
вакцинопрофилактика. Вакцина —
комплексный препарат, состоящий из
холероген-анатоксина и химического
О-АГ, обоих биоваров и сероваров Огава
и Инаба. Прививка обеспечивает выработку
вибриоцидных АТ и антитоксинов в
высоких титрах.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б21

1.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ
БАКТЕРИЙ. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ.

Бактериальная
петля
— инструмент для посевов. Бактериальная
игла
— для посевов уколом. Металлические
(стеклянные) шпатели
— для посевов на чашках Петри.
Пасте­ровские
и градуированные пипетки
— для посевов жидких материалов.

При
пересеве бактериальной культуры берут
пробирку, пронося её над пламенем
горелки. Набирают посевной ма­териал.
В пробирку со скошенным агаром вносят
петлю с посевным материалом, опуская
ее до конденсата в нижней ча­сти
среды, и зигзагообразным движением
распределяют по скошенной поверхности
агара. Пробирки с посевами подписывают,
указывая дату посева и характер
посевного мате­риала.

Посевы
газоном производят шпателем на
питательный агар в чашке Петри.
Приоткрыв крышку, пет­лей наносят
посевной материал на поверхность
питательного агара. Затем проводят
шпатель через пламя горелки, остужают
его о внутреннюю сторону крышки и
растирают материал по всей поверхности
среды. После инкубации посева появляется
равномерный сплошной рост бактерий.

Ростовые
факторы питательных сред,
которые катализируют метаболические
процессы микробной клетки — витамины
груп­пы В, никотиновая кислота.

Искусственные
среды готовят по рецептам из различных
настоев или отваров животного
про­исхождения с добавлением
неорганических солей, угле­водов и
азотистых веществ.

В
бактериологической практике используют
сухие питательные среды. Для приготовления
используют: кровезаменители (гидролизин
— кислотный гидролизат крови животных,
аминопептид — ферментативный гидролизат
крови); продукты биотехнологии (кормовые
дрожжи, кормовой лизин, виноградная
мука, белколизин).

Консистенция.
Плотные среды готовят до­бавляя к
жидкой среде 1,5-2% агара, полужидкие —
0,3-0,7 % агара. Агар — продукт переработки
морских водорослей, плавится при
80-86С, затвердевает при 40С.

По
целевому назначению. Основные
среды
— триптические гидролизаты мясных
продуктов, крови животных или казеина,
из которых готовят жидкую (питательный
бульон) и плотную (пита­тельный агар)
среды.

Элективные
среды
— для выделения и накопления микробов
определен­ного вида из материалов,
содержа­щих постороннюю микрофлору
(рост стафилококков — при повышенной
концентрации NaCl,
хо­лерного вибриона — в щелочной
среде).

Дифференциально-диагностические
среды
— для разграничения отдельных видов
мик­робов. Разные виды бактерий
различаются между собой по биохи­мической
активности (неодинаковый набор
фермен­тов).

Синтетические
среды
— химически чистые вещества: аминокислоты,
минеральные соли, углеводы, витамины.
Полусинтетические
среды
— пептон, дрожжевой экстракт. Эти среды
применяют при получении антибиотиков,
вакцин.

2.
НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ЗАЩИТЫ.

Механические
факторы. Кожа и слизистые оболочки
ме­ханически препятствуют проникновению
микробов и АГ в организм. АГ могут
попадать в организм при заболеваниях
и повреждениях кожи (травмы, ожоги,
воспалительные заболевания, укусы
насекомых, живот­ных), и через
нормальную кожу и слизистую оболочку,
проникая между клетками или через
клет­ки эпителия (вирусы). Механическую
защиту осуществляет реснитчатый
эпителий верхних дыхательных пу­тей,
т.к. движение ресничек постоянно
удаляет слизь вмес­те с попавшими
в дыхательные пути инородными частицами
и микробами.

Физико-химические
факторы. Антимикробные свой­ства:
уксусная, молочная, муравьиная кис­лоты,
выделяемые потовыми и сальными железами
кожи; соля­ная кислота желудочного
сока; протеолитические ферменты в
жидкостях и тканях организма.

Фермент
лизоцим
— протеолитический
фермент мурамидаза, разрушает клеточную
стенку бактерий и других клеток,
вызывая их гибель и способствуя
фагоцитозу. Лизоцим вырабатывают
макрофаги и нейтрофилы. Содержится
во всех секретах, жидко­стях и тканях
организма (кровь, слюна, слезы, молоко,
кишеч­ная слизь, мозг). Снижение
уровня фермента — возникновение
инфекционных воспалительных
заболе­ваний.

Иммунобиологические
факторы.

Гуморальные
факторы
неспецифической резистентности —
белки, содержащиеся в крови и жид­костях
организма. К ним относятся белки
системы комплемен­та, интерферон,
трансферрин, β-лизины, белок пропердин,
фибронектин.

Белки
системы комплемента неактивны, но
приоб­ретают активность в результате
последовательной активации и
взаимодействия компонентов комплемента.
Интерферон
оказы­вает иммуномодулирующий,
пролиферативный эффект и вызы­вает
в клетке, инфицированной вирусом,
состояние противови­русной
резистентности. β
-Лизины
вырабатываются тромбоцита­ми и
обладают бактерицидным действием.
Трансферрин
конку­рирует с микроорганизмами за
необходимые для них метаболи­ты,
без которых возбудители не могут
размножаться. Пропердин
участвует в активации комплемента и
других реакциях. Сывороточные
ингибиторы
крови (р-липопротеины) инактивируют
многие вирусы в результате неспецифической
блокады их поверхности.

Фибронектин
вместе с АТ взаимодей­ствуют с
поверхностью микроорганизмов,
способствуя их фаго­цитозу, играя
роль опсонинов.

NK-клетки
— популяция лимфоцитоподобных клеток
(большие гранулосодержащие лим­фоциты),
обладающие цитотоксическим действием
против чуже­родных клеток (раковых,
клеток простейших и клеток, поражен­ных
вирусом).

3.
БЕШЕНСТВО.

Таксономия:
РНК-содержащий
вирус, семейство Rhabdoviride,
род Lyssavirus.

Морфология
и АГ свойства:
Форма пули, состоит из сердцевины (РНП
— рибонуклеопротеин) спи­рального
типа и матриксного белка, окру­женной
липопротеиновой оболочкой с
гликопротеиновыми шипами. Гликопротеин
G
отвечает за адсорбцию и внедрение
вируса в клетку, обладает АГ
(типоспецифический АГ) и иммуногенными
свойс­твами. АТ к нему нейтрализуют
вирус и выявляются в РН. РНП состоит
из геномной однонитевой линейной -РНК
и бел­ков: N-белка,
L-белка
и NS-белка.
РНП — группоспецифический АГ; выявляется
в РСК, РИФ, РП.

Вирусы
бешенства:
дикий
— циркулирующий среди животных,
патогенный для человека; фиксированный
— не патогенный для человека.

Культивирование:
Вирус
культивируют путем внутримозгового
заражения животных (мышей) и в культуре
клеток: фибробластов человека, кури­ного
эмбриона. В нейронах головного мозга
заражен­ных животных образуются
цитоплазматические включения,
содержащие АГ виру­са (тела Бабеша-Негри
— эозинофильные включения).

Резистентность:
Неустой­чив
— быстро погибает под действием
солнеч­ных и УФ-лучей, и при нагревании
до 60С. Чувствителен к дезинфицирующим
веществам, жирорастворителям, щелочам
и протеолитическим ферментам.

Эпидемиология:
Источник — волки, грызуны. Накапливается
в слюнных железах больного животного
и выделяется со слюной. Животное
заразно в последние дни инкубационного
периода (2-10 дней до клинических
проявлений). Механизм передачи —
контактный при уку­сах.

Патогенез
и клиника:
Попав
со слюной больного животного в
поврежденные наружные покровы,
реплицируется и персистирует в месте
внедрения. Затем возбудитель
распространяется по аксонам
периферических нервов, достигает
клеток головного и спинного мозга,
где размно­жается. Клетки претерпевают
дистрофические, воспалительные и
дегенеративные изменения. Размножившийся
вирус попадает из мозга по центробежным
нейронам в различные ткани, в том числе
в слюнные железы. Инкубационный период
у человека — от 10 дн до 3 мес. В начале
появляются недомогание, бессонница,
затем развиваются рефлекторная
возбудимость, спазматические сокращения
мышц глотки и гортани.

Иммунитет:
Относительная
ус­тойчивость. Постинфекционный
иммунитет не изучен, так как больной
обычно погибает. Введение людям,
укушенным бешеным животным,
инактивированной антирабической
вакцины вызывает выработку АТ,
интерферонов и активацию клеточного
иммунитета.

Микробиологическая
диагностика.
Постмортальная
диагностика:
Об­наружение телец Бабеша-Негри в
мазках-отпечатках или срезах из ткани
мозга; выделение вируса из моз­га и
подчелюстных слюнных желез. Тельца
Бабеша-Негри выявляют окраской по
Романовскому-Гимзе. Вирусные АГ в
клет­ках обнаруживают с помощью
РИФ.

Выделяют
вирус из патологического мате­риала
путем биопробы на мышах: заражают
интрацеребрально. Идентификацию
вирусов проводят с помо­щью ИФА, а
также в РН на мышах, используя для
нейтрализации вируса антирабический
иммуноглобулин.

Прижизненная
диагностика:
Ис­следование отпечатков роговицы,
биоптатов кожи с помощью РИФ; выделение
вируса из слюны, цереброспинальной и
слезной жидкос­ти путем интрацеребрального
инфицирования мышей.

Лечение:
Симптоматическое; эффективное лечение
отсутствует.

Профилактика:
Иммунизация
антирабической вакциной собак.
Специфическую профилактику проводят
антирабической вакциной и антирабической
сывороткой или иммуноглобулином.
Инактивированная УФ- или гамма лучами
культуральная вакцина. С
лечебно-профилактической целью
иммунизируют людей; формируется
активный иммунитет.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б24

1.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ВИРУСОВ.

Для
культивирования вирусов используют
культуры клеток, куриные эмбрионы и
чувствительных лабораторных животных.
Эти же методы используют и для
культивирования риккетсий и хламидий
— облигатных внутриклеточных бактерий,
которые не растут на искусственных
питательных средах.

Культуры
клеток
— готовят из тканей живот­ных или
человека.

Первичные
(неперевиваемые) культуры
— приготовление в несколько этапов:
измельчение ткани; разъединение клеток
путем трипсинизации; отмывание
получен­ной однородной суспензии
изолированных клеток от трипсина с
последующим суспендированием клеток
в питательной среде, обеспечивающей
их рост, например в среде 199 с добавлением
телячьей сыворотки крови.

Перевиваемые
культуры
— приготов­ляют из злокачественных
и нормальных линий клеток, обладаю­щих
способностью длительно размножаться
in
vitro
в определен­ных условиях. К ним
относятся злокачественные клетки
HeLa,
первоначально выделенные из карциномы
шейки матки, Нер-3 (из лимфоидной
карциномы), а также нормальные клетки
ам­ниона человека, почек обезьяны.

Полуперевиваемые
культуры
— диплоид­ные клетки человека. Они
представляют собой клеточную систе­му,
сохраняющую в процессе 50 пассажей (до
года) диплоидный набор хромосом,
типичный для соматических клеток
использу­емой ткани. Диплоидные
клетки человека не претерпевают
зло­качественного перерождения и
этим выгодно отличаются от опу­холевых.

О
размножении вирусов в культуре клеток
судят по ЦПД, кото­рое может быть
обнаружено микроскопически и
характеризуется морфологическими
изменениями клеток.

Характер
ЦПД вирусов используют как для их
обнаружения (индикации), так и для
ориентировочной идентификации
(определения их видовой принадлежности).

Реакция
гемадсорбции
— метод индикации вирусов основанный
на способности поверхности клеток, в
которых они репродуцируются,
адсорби­ровать эритроциты. Для ее
по­становки в культуру клеток,
зараженных вирусами, добавляют взвесь
эритроцитов и после некоторого времени
контакта клетки промывают изотоническим
раствором NaCl.
На по­верхности пораженных вирусами
клеток остаются прилипшие эритроциты.

Реакция
гемагглютинации
— применяется для обнаружения вирусов
в культуральной жид­кости культуры
клеток либо хорионаллантоисной или
амниотической жидкости куриного
эмбриона.

Количество
вирусных частиц определяют методом
титрования по ЦПД в культуре клеток.
Для этого клетки культуры заражают
десятикратным разведением вируса.
После 6-7-дневной инку­бации их
просматривают на наличие ЦПД. За титр
вируса при­нимают наибольшее
разведение, которое вызывает ЦПД в
50% зараженных культур. Титр вируса
выражают количеством цитопатических
доз.

Метод
бляшек
— точный количественный метод учета
отдельных ви­русных частиц.

Куриные
эмбрионы
— обладают вы­сокой жизнеспособностью
и устойчивостью к различным воздей­ствиям.

Для
получения чистых культур риккетсий,
хламидий и ря­да вирусов в
диагностических целях, а также для
приготов­ления препаратов (вакцины,
диагностикумы) используют 8-12-дневные
куриные эмбрионы. О размножении
микроорганизмов судят по морфологическим
из­менениям, выявляемым после
вскрытия эмбриона на его обо­лочках.

О
репродукции вирусов (грипп, оспа) можно
судить по реакции гемагглютинации с
куриными или другими эритроцитами.

Лабораторные
животные
— видовая
чувствительность живот­ных к
определенному вирусу и их возраст
определяют репродук­тивную способность
вирусов (мыши-сосунки чувствительны
к вирусам Коксаки).

Преимущество
данного метода состоит в воз­можности
выделения тех вирусов, которые плохо
репродуцируются в культуре или
эмбрионе. К его недостаткам относятся
кон­таминация организма подопытных
животных посторонними ви­русами и
микоплазмами, а также необходимость
последующего заражения культуры
клеток для получения чистой линии
данно­го вируса, что удлиняет сроки
исследования.

2.
ФОРМЫ ИНФЕКЦИИ.

Формы
инфекционного процесса зависят от
свойств возбудителя, условий заражения,
иммунологических особенностей
макроорганизма.

При
носительстве
возбудитель размножается, циркулирует
в организме, происходит формирование
иммунитета и очищение организма от
возбудителя, но отсутствуют субъективные
и клинически выявляемые симптомы
болезни (нарушение самочувствия,
лихорадка, интоксикация, признаки
органной патологии). Такое течение
характерно для вирусного гепатита А,
полиомиелита, менингококковой инфекции.
О подобном течении инфекционного
процесса можно судить по наличию
специфических АТ у лиц, не имевших
клинических проявлений данной
инфекционной болезни и не иммунизированных
против нее.

Носительство
конкретных типов возбудителей:
бактерионосительство (бациллоносительство),
вирусоносительство, гельминтоносительство.

Виды
носительства: реконвалесцентное,
иммунное, здоровое, инкубационное,
транзиторное.

При
латентной инфекции
инфекционный процесс длительно не
проявляет себя клинически, но возбудитель
сохраняется в организме, иммунитет
не формируется и на определенном этапе
при достаточно длительном сроке
наблюдения возможно появление
клинических признаков болезни
(туберкулез, сифилис, герпетическая
и цитомегаловирусная инфекции).

Перенесенные
инфекции не всегда гарантируют
иммунитет от повторного заражения,
особенно при генетической
предрасположенности, обусловленной
дефектами в системе специфических и
неспецифических защитных механизмов.

Реинфекция
— повторное заражение и развитие
инфекции, вызванной тем же возбудителем.

Микст-инфекция
— одновременное возникновение двух
инфекционных процессов.

Аутоинфекция
— возникновение инфекционного процесса,
вызванного активацией нормальной
флоры, населяющей кожу и слизистые
оболочки. Развивается при резком
ослаблении защитных механизмов, в
частности приобретенного иммунодефицита
(в результате оперативных вмешательств,
соматических заболеваний, применения
стероидных гормонов, антибиотиков
широкого спектра действия) Проявляется
в виде развития дисбактериоза, лучевых
поражений.

Суперинфекция
— на фоне инфекции, вызванной одним
возбудителем; заражение и развитие
инфекционного процесса, вызванного
другим видом возбудителя.

Экспериментальная
инфекция — используется для изучения
патогенеза инфекции, разработки
методов ее диагностики, лечения и
профилактики.

3.
ШИГЕЛЛЁЗ.

Род
Shigella,
4 вида: S.
dysenteriae
— 12
сероваров, S.flexneri
—
9 сероваров, S.
boydii
—
18 сероваров, S.
sonnei
— 1
серовар.

Морфология:
Неподвижные
палочки. Спор и капсул не образуют.

Культуральные
свойства:
Культи­вируются
на простых питательных средах. На
плотных средах образуют мелкие
глад­кие, блестящие, полупрозрачные
колонии; на жидких — диффузное помутнение.
Жидкой средой обогащения является
селенитовый бу­льон. У S.
sonnei
отмечена
при росте на плот­ных средах S
R-диссоциация.

Биохимическая
активность:
Слабая;
отсутствие газообразования при
фермента­ции глюкозы, отсутствие
продукции сероводорода, отсутствие
ферментации лактозы.

Резистентность:
Неустойчив
во внешней среде S.
dysenteriae.
Переносят
высушивание, низкие темпе­ратуры,
быстро погибают при нагревании. S.
sonnei
в
молоке способны размножаться. У S.
dysenteriae
отмечен
переход в некультивируемую форму.

АГ
структура:
Соматический
О-АГ, в зависи­мости от строения
которого происходит их подразделение
на серовары, a
S.
flexneri
внут­ри
сероваров подразделяется на подсеровары.
S.
sonnei
обладает
АГ 1й фазы, кото­рый является К-АГ.

Факторы
патогенности:
Способность
вызывать инвазию с пос­ледующим
межклеточным распространением и
размножением в эпителии слизистой
толстого кишечника. Функци­онирование
крупной плазмиды инвазии, кото­рая
имеется у всех 4 видов шигелл. Плазмида
инвазии детерминирует синтез белков,
входящих в состав наружной мембраны,
которые обеспечивают процесс ин­вазии
слизистой. Продуцируют шига и
шигаподобные белковые токсины.
Эндотоксин защищает шигеллы от
дейс­твия низких значений рН и желчи.

Эпидемиология:
Шигеллезы — антропонозы с фекально-оральным
механизмом переда­чи. Заболевание,
вызываемое S.
dysenteriae,
имеет
контактно-бытовой путь передачи. S.
flexneri
—
водный, a
S.
sonnei
—
алиментар­ный.

Патогенез
и клиника:
Инфекционные
заболева­ния, характеризующиеся
поражением толсто­го кишечника, с
развитием колита и интокси­кацией.
При
гибели шигелл происходит выделение
шига токсинов, действие которых
приводит к появлению крови в испражнениях.

Иммунитет:
Секреторные IgA,
пре­дотвращающие адгезию, и
цитотоксическая антителозависимая
активность лимфоцитов.

Микробиологическая
диагностика.
Бактериологи­ческий:
Материал
— испражнения. Для посева отбираются
гнойно-кровяные образования из кала,
которые при диагностике заболевания
высеваются на лактозосодержащие
дифференциальные питательные плотные
среды. В случае выявления бактерионосителей
посев испражнений проводится в
селенитовый бульон с выделением
возбудителя на плотных лактозосодержащих
дифференциаль­ных питательных
средах. Среди выросших на этих средах
отбирают лактозонегативные ко­лонии,
которые идентифицируют до вида и
се­ровара, а выделенные культуры S.
flexneri
—
до подсероваров, S.
sonnei
— до
хемоваров. В качестве вспомогательного
используют сероло­гический
метод
с постановкой РНГА.

Лечение
и профилактика:
Для
лечения — бактериофаг орального
применения, ан­тибиотики после
определения антибиотикограммы; в
случае возникновения дисбактерио­за
— препараты пробиотиков для коррекции
микрофлоры. Не специфическая
профилак­тика.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б27

1.
БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОКИСЛЕНИЕ.

Дыхание
микроорганизмов — биологический
процесс переноса электронов через
дыхательную цепь от доноров к акцепторам
с образованием АТФ. В зависимости от
конечного
акцептора электронов
дыхание — аэробное — молекулярный
кислород (О2), анаэробное — связанный
кислород (NO3,
SO4,
SO3).

Микроорганизмы
по типу дыхания:

1.
Облигатные (строгие) аэробы — необходим
молекулярный О2 для дыхания.

2.
Микроаэрофилы нуждаются в уменьшенной
концентрации (низком парциальном
давлении) свободного О2. Для создания
этих условий в газовую смесь для
культивирования добавляют CO2
(до 10% концентрации).

3.
Факультативные анаэробы — потребляют
глк и размножаются в аэробных и
анаэробных условиях. Среди них
микроорганизмы, толерантные к высоким
концентрациям молекулярного О2
(аэротолерантные), и микроорганизмы
которые способны в определенных
условиях переключаться с анаэробного
на аэробное дыхание.

4.
Строгие анаэробы — размножаются при
низких концентрациях молекулярного
О2, который в больших концентрациях
для них губителен. Биохимически
анаэробное дыхание протекает по типу
бродильных процессов, молекулярный
О2 при этом не используется.

Аэробное
дыхание энергетически более эффективно
(синтезируется большее количество
АТФ).

В
процессе аэробного дыхания образуются
токсические продукты окисления
(перекись водорода, свободные О2
радикалы), от которых защищают
специфические ферменты, прежде всего
каталаза, пероксидаза, пероксиддисмутаза.
У анаэробов эти ферменты отсутствуют,
также как и система регуляции
окислительно-восстановительного
потенциала (rH2).

2.
ИНФЕКЦИЯ —

Совокупность
всех биологических явлений и процессов,
возникающих в организме при внедрении
и размножении в нем микроорганизмов.

Инфекционный
процесс — взаимоотношения между макро-
и микроорганизмами в виде адаптационных
и патологических процессов в организме.

Инфекционная
болезнь
—
выраженная форма инфекционного
процесса.

Симбиоз
(сожительство) — взаимоотношения микро-
и макроорганизмов.

Формы
симбиоза:

Мутуализм
—
взаимовыгодные
отношения (нормальная микрофлора).

Комменсализм
—
выгоду извлекает один партнер (микроб),
не причиняя вреда другому. При любом
типе взаимоотношений микроорганизм
может проявить свои патогенные свойства
(условно-патогенные микробы — комменсалы
в иммунодефицитном хозяине).

Паразитизм
— микроорганизм питается за счет
хозяина, т.е. извлекает выгоду, нанося
вред хозяину. В процессе перехода от
свободноживущего к паразитическому
типу жизнедеятельности микроорганизмы
теряют ряд ферментных систем, необходимых
для существования во внешней среде,
но приобретают ряд свойств, обеспечивающих
возможность паразитизма.

Этапы
инфекционного процесса:

1.
Адгезия — прикрепление микроорганизма
к соответствующим клеткам хозяина.

2.
Колонизация — закрепление микроорганизмов
в соответствующем участке.

3.
Размножение — увеличение количества,
мультипликация.

4.
Пенетрация — проникновение в нижележащие
слои и распространение инфекта.

5.
Повреждение клеток и тканей (связано
с размножением, пенетрацией и
распространением инфекта).

Инфекционный
процесс:

По
длительности:

Острая
циклическая
инфекция заканчивается удалением
возбудителя или смертью больного. При
хронической
инфекции
возбудитель сохраняется в организме
(персистенция). Механизмы для
персистенции: Внутриклеточная
локализация (укрываются в клетке);
переход в не имеющие клеточной стенки
L—
формы; АГ мимикрия (совпадение по
химическому составу АГ детерминант
микроба и клеток хозяина ); укрытие в
локальных очагах и забарьерных органах
(головной мозг). Факторы персистенции
для вирусов: Интеграция генома вируса
с хромосомой клетки-мишени; недоступность
действию АТ; наличие дефектных вирусных
частиц; слабая индукция иммунного
ответа. Персистенция
в организме и периодическая смена
хозяина
— механизмы поддержания микробных
популяций.

По
степени распространения:

Локальный
—
возбудитель сосредоточен в определенном
очаге, не выходя за его пределы, что
сдерживает механизмы защиты. Если
микроорганизм способен распространяться
по организму, возникает генерализованный
процесс.
Пути распространения — лимфогенный
(по лимфатической системе) и гематогенный
(по кровяным сосудам).

По
выраженности:

Манифестный
(ярко выраженный) — инфекционная болезнь
— типичная, атипичная, хроническая.
Инаппарантный
(бессимптомный)
— характерен для латентной инфекции.
Размножение возбудителя в организме
не сопровождается клиническими
проявлениями, а только иммунными
реакциями.

Инфекционные
заболевания отличаются от соматических:
Наличием возбудителя, заразностью,
цикличностью течения.

3.
СТРЕПТОКОККИ ПНЕВМОНИИ.

Таксономия.
Семейство Streptococaceae,
род:1)Streptococcus,
2)Enterococcus,
3)Aerococcus,
4)Leuconostoc,
5)Pediococcus,
6)Lactococcus.
Наиболее важны 1) и 2).

Морфологические
и культуральные свойства.
Пневмококки-Род Streptococcus. Мелкие 1 мкм
овальные клетки, располагающиеся
парами,каждая из которых окружена
толстой капсулой; грамположительные,
спор не образуют, неподвижные. При
росте на простых средах образует
капсулу, состоящую из гиалуроновой
кислоты. Клеточная стенка содержит
белки (М-, Т- и R-антигены), углеводы
(группоспецифические) и пептидогликаны.
Легко переходят в L-формы.

Культуральные
свойства:
Возбудители растут на средах, обогащенных
углеводами, кровью, сывороткой,
асцитической жидкостью. На плотных
средах обычно образуют мелкие
полупрозрачные колонии. Капсульные
штаммы стрептококков группы А образуют
слизистые колонии. На жидких средах
равномерное помутнение и хлопьевидный
осадок.Капнофилы. По характеру роста
на кровяном агаре они делятся на
культуральные варианты: а-гемолитические
(зеленящие), в-гемолитические (полный
гемолиз) и негемолитические.Растут
при температуре 37 градусов,рН-7,8

Резистентность.
Чувствительны к физическим и химическим
факторам окружающей среды, могут
длительно сохранять жизнеспособность
при низких температурах. Устойчивость
к антибиотикам приобретается медленно.

Патогенность.
На основе полисахаридного антигена
делятся на серогруппы (А, В, С…О).
Стрептококки группы А вырабатывают
более 20 веществ, обладающих антигенностью
и агрессивностью. На поверхности
клетки имеется белковый антиген М,
который тесно связан с вирулентностью
(препятствует фагоцитозу). Этот белок
определяет типовую принадлежность
стрептококков. Кофакторам патогенности
относят стрептокиназу (фибринолизин),
ДНКазу, гиалуронидазу, эритрогенин.
Наиболее патогенны для человека
гемолитические стрептококки группы
А, называемые S. pyogenes. Этот вид вызывает
у человека многие болезни: скарлатину,
рожу, ангину, острый эндокардит,
послеродовой сепсис, хронический
тонзиллит, ревматизм.

Эпидемиология:Представители
норм.микрофлоры. Часто развивается
на фоне вторичных иммунодефицитов.

Клиника:
пневмококковая пневмания начинается
внезапно,подъем температуры
тела,продуктивный кашель,боли в
груди,долевые или очаговые поражения
легких.

Источник
инфекции-больные люди, бактерионосители.
Клиника:Поражения различных органов
и тканей.

Иммунитет:
постинфекционный нестойкий,
ненапряженный.

Микробиологическая
диагностика.
Материал для исследования – гной,
моча, кровь, мокрота.

Бактериоскопический
метод: окраска по Граму мазков из
патологического материала. При
положительном результате обнаруживают
цепочки грам «+» кокков.

Бактериологический
метод: Исследуемый материал засевают
на кровяной агар в чашку Петри. После
инкубации при 37 °С в течение 24 ч отмечают
характер колоний и наличие вокруг них
зон гемолиза. Из части материала,
взятого из колоний, готовят мазок,
окрашивают по Граму и микроскопируют.
Для получения чистой культуры 1—3
подозрительные колонии пересевают в
пробирки со скошенным кровяным агаром
и сахарным бульоном. На кровяном агаре
Streptococcus pyogenes образует мелкие мутноватые
круглые колонии. В бульоне стрептококк
дает придонно-пристеночный рост в
виде хлопьев, оставляя среду прозрачной.
По характеру гемолиза на кровяном
агаре стрептококки делятся на три
группы: 1) негемолитические; 2)
а-гемолитиче-ские 3) ?-гемолитические,
образующие вокруг колонии полностью
прозрачную зону гемолиза. Заключительным
этапом бактериологического исследования
является идентификация выделенной
культуры по антигенным свойствам. По
данному признаку все стрептококки
делят на серологические группы (А, В,
С, D и т. д.). Серогруппу определяют в
реакции преципитации с полисахаридным
преципитиногеном С. Серовар определяют
в реакции агглютинации. Выявленную
культуру стрептококка проверяют на
чувствительность к антибиотикам
методом дисков.

Серодиагностика:
устанавливают наличие специфических
антигенов в крови больного с помощью
РСК или реакции преципитации. Антитела
к О-стрептолизину определяют для
подтверждения диагноза ревматизма.

Лечение:
Антибиотики широкого спектра действия
(пенициллины, устойчивые к в-лактамазе).При
выделении стрептококка А – пенициллин.
Химиотерапия антибиотиками, к которым
выявлена чувствительность микроба –
левомицетин, рифампицин.

Профилактика:
специфической – нет. Неспецифическая
— выявление, лечение больных; проведение
планового обследования медперсонала,
вакцинация стрептококковый
бактериофаг(жидкий) – фильтрат
фаголизата стрептококка. Применятся
наружно, внутрикожно, в/м., О-стрептолизин
сухой (лиофильно высушенный фильтрат
бульонной культуры стрептококка –
активного продуцента О-стрептолизина.
Применяется для постановки серологических
реакций – определения анти-О-стрептолизина
в сыворотке крови больных).

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б30

1.
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ
КЛЕТКИ И ВИРУСА. РЕПРОДУКЦИЯ ВИРУСА.

Типы
взаимодействия вируса с клеткой:

Продуктивный
тип
—
завершается обра­зованием нового
поколения вирионов и ги­белью
зараженных клеток (цитолитическая
форма). Некоторые вирусы выходят из
клеток, не разрушая их (нецитолитическая
форма).

Абортивный
тип
—
не завершается обра­зованием новых
вирионов, т.к. инфек­ционный процесс
в клетке прерывается на одном из
этапов.

Интегративный
тип (вирогения)
— характеризуется встраиванием вирусной
ДНК в виде провируса в хромосому клетки
и их совместным сосуществованием.

Репродукция
вирусов:

Адсорбция.
Прикрепление
вирусов к поверхности клетки.
Адсорбирует­ся на участках клет
мембраны (рецепторах). Природа клет
рецепторов — белки, углеводные
ком­поненты белков и липидов, липиды.

Проникновение
в клетку. Виропексис
или слияние вирусной оболочки с
клеточной мембраной. При виропексисе
после адсорб­ции вирусов происходят
впячивание участка кле­т мембраны
и образование внутриклеточной вакуоли,
ко­торая содержит вирусную частицу.
Вакуоль с вирусом может транспортироваться
в разные участки цитоплаз­мы или
ядро клетки.

Раздевание.
Удаление
защитных вирусных оболочек и освобождение
внутреннего ком­понента вируса,
способного вызвать инфекционный
процесс. Происходит в определенных
участках цитоплазмы или ядра клетки,
для чего клетка использует набор
специальных ферментов. В случае
проникновения вируса путем слияния
вирусной оболочки с кле­точной
мембраной процесс проникновения
вируса в клетку со­четается с первым
этапом его раздевания. Конечные
продук­ты раздевания — нуклеокапсид
или нуклеиновая кислота вируса.

Биосинтез
компонентов вируса. Проникшая
в клетку вирусная нуклеиновая кислота
несет генетическую информацию, которая
конкурирует с генетической информацией
клетки. Дезорганизует работу клеточных
систем, подавляет собственный метаболизм
клетки и заставляет ее синтезировать
новые вирус­ные белки и нуклеиновые
кислоты, идущие на построение ви­русного
потомства.

Формирование
вирусов. Синтезированные
вирусные нуклеиновые кислоты и белки
обладают способностью специфи­чески
узнавать друг друга и при достаточной
их концентра­ции самопроизвольно
соединяются в результате гидрофобных,
со­левых и водородных связей.

Выход
вирусов из клетки. Взрывной
тип
— одновременный выход большого
количества вирусов. Клетка быстро
погибает. Присущ вирусам, не имеющих
суперкапсидной оболочки. Тип
почкование
— присущ вирусам, имеющим суперкапсидную
оболочку. На заключительном этапе
сборки нук­леокапсиды сложно
устроенных вирусов фиксируются на
клеточ­ной плазматической мембране,
модифицированной вирусными белками,
и постепенно выпячивают ее.

2.
КОМПЛИМЕНТ.

Фак­тор
гуморального иммунитета, защищающий
организм от АГ. Комплемент — сложный
комплекс белков сыворотки крови,
находящийся в неактивном состоянии
и активирующийся при соединении АГ с
АТ или при агрега­ции АГ. В состав
комплемента входят 20 взаимодействующих
между собой белков, девять из них
основные ком­поненты комплемента
(С1, С2, СЗ… С9). Важную роль играют
факторы В, D,
пропердин. Белки комплемента относятся
к глобулинам и отличаются между собой
по ряду физико-химических свойств.
Они различаются по молекулярной массе,
имеют сложный субъединичный состав:
Cl—Clq,
Clr,
Cls;
СЗ-СЗа, СЗЬ; С5-С5а, С5b.
Компоненты комплемента составляют
5-10% от всех белков крови, часть из них
образуют фагоциты.

Функции
комплемента:
1. Лизис микробных клеток (цитотоксическое
действие); 2. Хемотаксическая активность;
3. Принимает учас­тие в анафилаксии;
4. Фагоцитоз. Комплемент
является компонен­том иммунологических
реакций, направ­ленных на освобождение
организма от микробов и АГ (опухолевых
клеток, трансплантата).

Механизм
активации комплемента:

Классический
путь. Активирует­ся
комплексом АГ+АТ. Достаточно участия
в связывании АГ одной молекулы IgM
или двух молекул IgG.
Процесс начинается с присоединения
к ком­плексу АГ+АТ компонента С1,
который рас­падается на субъединицы
Clq,
Clr
и СIs.
Далее в реакции участвуют последовательно
активированные ранние компоненты
комплемента в такой последовательности:
С4, С2, СЗ. Эта реакция имеет характер
усиливающе­гося каскада, т.е. когда
одна молекула пре­дыдущего компонента
активирует несколько молекул
последующего. Ранний компонент
комплемента С3 активирует компонент
С5, который обладает свойством
прикрепляться к мембране клетки. На
компоненте С5 путем последовательного
присоединения поздних компонентов
С6, С7, С8, С9 образуется литический или
мембраноатакующий комплекс который
нарушает целостность мембраны, и
клетка погибает в результате
осмотического лизиса.

Альтернативный
путь.
Проходит без участия АТ. Характерен
для защиты от грам- микробов. Каскадная
цепная реакция при аль­тернативном
пути начинается с взаимодействия АГ
(полисахарида) с протеи­нами В, D
и пропердином с последующей активацией
компонента СЗ. Далее по классическому
пути, образу­ется мембраноатакующий
комплекс.

Лектиновыи
путь.
Происходит без участия АТ. Он
ини­циируется маннозосвязывающим
белком сыворотки
крови, который после взаимодейс­твия
с остатками маннозы на поверхности
мик­робных клеток катализирует С4.
Далее по классическому пути.

В
процессе активации комплемента
обра­зуются продукты протеолиза
его компонен­тов — субъединицы СЗа
и СЗb,
С5а и С5b,
которые обладают биологической
активностью. СЗа и С5а принимают участие
в анафилактических реакциях
(хемоаттрактантами); СЗb
— роль в опсонизации объектов фагоцитоза.
Сложная каскадная реакция комплемента
происходит с участием ионов Са и Mg.

3.
ИЕРСИНЕОЗ.

Род
включает 11 видов. Y.pestis
— чума, Y.pseudotuberculesis
— псевдотуберкулез, Y.enterocolitica
— (кишечный) иерсиниоз. Ряд видов не
патогенны или условно- патогенны для
человека.

Морфология:
Овоидная (кокко-бациллярная) форма,
окрашиваются биполярно, полиморфны.
Подвижны при температуре ниже 30С
(имеют перитрихиальные жгутики), грам-,
имеют капсульное вещество. Y.pestis
неподвижны, имеют капсулу.

Культуральные
и биохимические свойства:
Факультативные анаэробы. Температурный
оптимум от 25 до 28С, pH
— близкая к нейтральной. Хорошо
культивируются на простых питательных
средах. Ферментируют большинство
углеводов без образования газа.
Иерсинии способны менять свой метаболизм
в зависимости от температуры и
размножаться при низких температурах.
Вирулентные штаммы образуют шероховатые
(R)
колонии, переходные (RS)
и сероватые слизистые гладкие (S)
формы.

Молодые
микроколонии с неровными краями
(стадия битого стекла) в дальнейшем
сливаются, образуя нежные плоские
образования с фестончатыми краями
(стадия кружевных платочков). Зрелые
колонии крупные, с бурым зернистым
центром и неровными краями (ромашки).
Штаммы способны восстанавливать
красители с обесцвечиванием сред
(метиленовый синий, индиго). На скошенном
агаре через 2 суток при 28С образуют
серовато-белый налет, врастающий в
среду, на бульоне — нежную поверхностную
пленку и хлопковидный осадок. Температура
37С — селективная для образования
капсулы у Y.pestis.

Культуры
Y.pseudotuberculosis
и Y.enterocolitica
не имеют стадии битого стекла, вначале
мелкие блестящие, выпуклые, затем
может отмечаться сливной рост с
образованием выпуклых бугристых
колоний, схожих с колониями Y.pestis.
Растут на универсальных питательных
средах (среда Эндо, агар Мак Конки,
среда Серова) в сочетании с методами
накопления в холодовых условиях.

АГ
структура:
О-АГ (эндотоксин) то-сичный для человека.
Липополисахаридно-белковые комплексы
О-АГ разделяют на S
(гладкие) и R
(шероховатые), последние — общие для
Y.pestis
и Y.pseudotuberculosis.
Y.enterocolitica
имеет поверхностный АГ, общий с другими
энтеробактериями.

Возбудитель
псевдотуберкулеза по О- и Н-АГ
подразделены на 13 сероваров (чаще
встречаются серовары I,
III,
IV);
иерсиниоза — по О-АГ на 34 серовара (чаще
встречаются серовары О3, О9). Чумной
микроб выделяет бактериоцины
(пестицины), оказывающие бактерицидное
действие на псевдотуберкулезный
микроб и штаммы кишечной палочки.

Патогенные
свойства:
Подавляет функции фагоцитарной системы
(подавляет окислительный взрыв в
фагоцитах и в них размножается). Факторы
патогенности контролируются плазмидами.
Три стадии патогенеза: Лимфогенный
занос; бактеремия; генерализованная
септицемия.

Возбудители
псевдотуберкулеза и иерсиниоза имеют
адгезины и инвазины, низкомолекулярные
протеины (ингибируют бактерицидные
факторы), энтеротоксин.

Клинические
особенности:
Чума протекает в бубонной, легочной
(наиболее опасна), кишечной формах.

Иерсиниоз
и псевдотуберкулез — кишечные инфекции.
Клиника — региональная лимфоаденопатия
(имитирует аппендицит), энтероколиты,
реактивные артриты, анкилозирующий
спондилит, скарлатиноподобная
лихорадка.

Эпидемиологические
особенности:
Чума — классический природноочаговый
зооноз. Носители — сурки, суслики,
песчанки, пищухи, крысы.

Микробиологическая
диагностика.
Методы экспресс-выявления АГ — МФА,
РПГА с эритроцитарным дагностикумом,
сенсибилизированным моноклональными
АТ к капсульному АГ, ИФА, РНАТ.

При
бактериологической диагностике,
материал предварительно забирают в
забуференный физиологический раствор
и сохраняют в холодильнике с
периодическими высевами на среды
Эндо, Плоскирева, Серова. Подозрительные
колонии пересевают для получения
чистых культур, изучают их по
биохимическим свойствам и идентифицируют
в РА с диагностическими сыворотками.

Для
серологической диагностики используют
ИФА, РА и РНГА (на псевдотуберкулез —
с I
сероваром, на иерсиниоз — с сероварами
О3 и О9) с исследованием взятых в динамике
инфекционного процесса парных
сывороток.

Специфическая
профилактика:
Используется живая ослабленная вакцина
из штамма EV.
Имеется сухая таблетированная вакцина
для перорального применения. Для
оценки иммунитета к чуме (естественного
постинфекционного и вакцинального)
применяется внутрикожная аллергическая
проба с пестином.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б33

1.
АНТИБИОТИКИ —

Вещества,
которые получаются из микроорганизмов,
растений, животных тканей и синтетическим
путем. Тормозят рост и размножение
микроорганизмов (бактериостатическое
действие) или убивают их (бактерицидное
действие).

По
происхождению: Бактериальные
(полимиксин, грамицидин); актиномицетные
(стрептомицин, левомицетин, эритромицин);
грибковые (пенициллин); растительные
(рафанин, фитонциды); животного
происхождения (интерфероны, лизоцим).

По
спектру действия: Действующие на грам+
флору (пенициллин, эритромицин);
действующие на грам- флору (полимиксин);
действующие на грам+ и грам- флору
(стрептомицин, неомицин); противогрибковые
(нистатин, амфотеррицин, леварин,
низорал); противотуберкулезные
(стрептомицин, канамицин); противоопухолевые
(рифампицин); противовирусные
(интерферон, зовиракс, ацикловир).

По
механизму действия:

—
Ингибиторы синтеза пептикогликана
клеточной стенки (пенициллин,
цефалоспорин, ванкомицин, ристомицин).
Действуют на имеющих клеточную стенку
растущие бактерии, не действуют на L-
формы, покоящиеся формы бактерий;

—
ингибиторы синтеза белка (стрептомицин,
левомицетин, тетрациклин);

—
ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот,
пуринов, аминокислот (налидиксовая
кислота, рифампицин);

—
ингибиторы синтеза мембраны и
цитоплазматической мембраны грибов
(нистатин, полимиксин).

Побочное
действие антибиотиков.

Для
макроорганизма: Токсическое действие;
дисбактериозы; аллергические реакции;
иммунодепрессивное действие;
эндотоксический шок.

Для
микроорганизмов: Формирование атипичных
форм микробов; формирование
антибиотикорезистентных и
антибиотикозависимых форм микроорганизмов.

2.
ВАКЦИНЫ.

Ассоциированные
вакцины — препараты, включающие
несколько разнородных АГ и позволяющие
проводить иммунизацию против нескольких
инфекций. Поливакцина — в препарат
входят однородные АГ. Комбинированная
вакцина — препарат состоит из разнородных
АГ.

Вакцинопрофилактика
— основная роль в специфической
профилактике инфекционных заболеваний.

Типы
вакцин:

1.
Убитые (инактивированные) вакцины —
препараты, не содержащие живых
микроорганизмов. Вакцины могут
содержать цельные микробы (корпускулы)
(против чумы, гриппа, полиомиелитная
вакцина Солка), а также отдельные
компоненты (полисахаридная пневмококковая
вакцина) или иммунологически активные
фракции (вирусагепатита В).

Различают
вакцины, содержащие АГ одного возбудителя
(моновалентные) или нескольких
возбудителей (поливалентные). Убитые
вакцины менее иммуногенны, чем живые,
реактогенны, могут вызывать сенсибилизацию
организма.

2.
Ослабленные (аттенуированные) вакцины.
Полностью сохраняют АГ набор
микроорганизма и обеспечивают
длительное состояние специфической
невосприимчивости. Живые вакцины
применяют для профилактики полиомиелита,
туляремии, бруцеллеза, кори, желтой
лихорадки, эпидемического паротита.
Недостатки — наличие не только нужных
(протективных), но и вредных для
организма АГ комплексов (в том числе
перекрестно реагирующих с тканями
человека), сенсибилизация организма,
большая АГ нагрузка на иммунную
систему.

3.
Компонентные (субъединичные) вакцины
состоят из способных обеспечить
протективный иммунитет, главных АГ
компонентов:

—
компоненты
структур клетки
(АГ клеточной стенки, Н- и Vi-АГ,
рибосомальные АГ);

—
анатоксины
— препараты, содержащие модифицированные
хим путем экзотоксины, лишенные
токсических свойств, но сохранившие
высокую антигенность и иммуногенность.
Обеспечивают выработку антитоксического
иммунитета (антитоксических АТ —
антитоксинов). АКДС — ассоциированная
коклюшно- дифтерийно-столбнячная
вакцина. Полученные хим путем вакцинные
препараты (анатоксины, получаемые
обработкой экзотоксинов формалином)
— химические вакцины;

—
конъюгированные
вакцины
— комплекс малоиммуногенных полисахаридов
и высокоиммуногенных анатоксинов
(сочетание АГ Haemophilus influenzae и обеспечивающего
иммуногенность вакцины дифтерийного
анатоксина);

—
субъединичные
вакцины.
Вакцину против вируса гепатита В
готовят из поверхностных белков
(субъединиц) вирусных частиц (HBs АГ).

4.
Рекомбинантные вакцины. С помощью
методов генной инженерии гены,
контролирующие синтез наиболее
значимых иммуногенных детерминант,
встраивают в самореплицирующиеся
генетические структуры (плазмиды,
вирусы). Если носитель вирус осповакцины,
то данная вакцина будет в организме
индуцировать иммунитет не только
против оспы, но и против того возбудителя,
чей ген был встроен в его геном (если
ген HBs АГ — против вируса гепатита В).

Если
носитель плазмида, то при размножении
рекомбинантного клона микроорганизма
(дрожжей) нарабатывается необходимый
АГ, который используется для производства
вакцин.

5.
Синтетические олигопептидные вакцины.
Принципы их конструирования включают
синтез пептидных последовательностей,
образующих эпитопы, распознаваемые
нейтрализующими АТ.

6.
Кассетные или экспозиционные вакцины.
В качестве носителя используют белковую
структуру, на поверхности которой
экспонируют (располагают) введенные
хим или генно-инженерным путем
соответствующие определенные АГ
детерминанты. В качестве носителей
при создании искусственных вакцин
могут использовать синтетические
полимеры — полиэлектролиты.

7.
Липосомальные вакцины. Представляют
собой комплексы, состоящие из АГ и
липофильных носителей (фосфолипиды).
Иммуногенные липосомы более эффективно
стимулируют выработку АТ, пролиферацию
Т- лимфоцитов и секрецию ими ИЛ-2.

8.
Антиидиопатические вакцины.
Антиидиотипические АТ содержат
внутренний специфический портрет АГ
детерминанты. Получают моноклональные
антиидиотипические АТ, содержащие
внутренний образ протективного АГ.
Для оптимальных результатов (защиты
в отношении возбудителя) необходимо
иметь набор МКА против различных АГ
детерминант возбудителя.

3.
ВИРУС ПРОСТОГО ГЕРПЕСА
(ВПГ) —

Вызывает
герпетическую инфекцию, характеризующуюся
везикулезными высыпаниями на коже,
слизистых оболочках, поражением ЦНС
и внутренних органов, и пожизненным
носительством (персистенцией)
и
рецидивами болезни.

Таксономия:
Семейс­тво
Herpesviridae
род
Simplexvirus.

Структура:
Геном ВПГ кодирует 80 белков, необходимых
для репродукции вируса и взаимодействия
его с клетками организма и иммунным
ответом. ВПГ кодирует 11 гликопротеинов,
являющихся прикрепительными белка­ми
(gB,
gC,
gD,
gH),
белками слияния (gB),
структурными белками, иммунными
белками уклонения (gC,
gE,
gl).

ВПГ
вызывает литические ин­фекции
фибробластов, эпителиальных клеток
и латентные инфекции нейронов.

Культивирование:
Применяют куриный эмбрион (на оболочке
образуются мелкие плотные бляшки) и
культуру клеток (вызывает цитопатический
эф­фект в виде появления гигантских
многоядер­ных клеток с внутриядерными
включениями).

АГ
структура:
Содержит АГ, связанные с внутренними
белками, и с гликопротеидами наружной
оболочки (основные иммуногены,
индуцирущие выработку АТ и клеточный
иммунитет). Серотипы: ВПГ-1, ВПГ-2.

Резистентность:
Нестоек,
чувствителен к солнечным и УФ-лучам.

Эпидемиология:
Источник
— больной.

ВПГ-1
и ВПГ-2 передаются контактным путем
(с везикулярной жидкостью, со слюной,
по­ловых контактах), через предметы
обихода, воз­душно-капельным путем,
через плаценту, при рождении ребенка.

Оба
типа вирусов могут вызывать оральный
и генитальный герпес. ВПГ-1 поражает
слизистые оболочки ротовой полости
и глот­ки, вызывает энцефалиты; ВПГ-2
— генита­лии.

Патогенез:
Первичная
инфекция.
Везикула
— проявление ВПГ с деге­нерацией
эпителиальных клеток. Основа везикулы
— многоядерные клет­ки. Пораженные
ядра клеток содержат эозинофильные
включения. Верхушка везикулы вскрывается,
и формируется язвочка, кото­рая
покрывается струпом с образо­ванием
корочки.

Минуя
входные ворота эпителия, виру­сы
проходят через чувствительные нервные
окончания с дальнейшим передвижением
нуклеокапсидов вдоль аксона к телу
нейро­на в чувствительных ганглиях.
Репродукция вируса в нейроне
заканчивается его гибелью. 70-90 % людей
пожизненные носители виру­са, который
сохраняется в ганглиях, вызы­вая в
нейронах латентную персистирующую
инфекцию.

Латентная
инфекция
чувствительных
ней­ронов является характерной
особенностью нейротропных герпесвирусов
ВПГ. В латентно инфицированных нейронах
около 1 % клеток в пораженном ганглии
несет вирусный геном.

Клиника:
Инкубационный
период 2-12 дн. ВПГ по­ражает кожу
(везикулы, экзема), слизистые оболочки
рта, глотки (стоматит) и кишеч­ника,
печень (гепатиты), глаза (кератит) и
ЦНС (энцефалит). Рецидивирующий герпес
обусловлен реактивацией вируса,
сохранившегося в ганглиях.

Генитальная
инфекция
— результа­т аутоинокуляции из других
пораженных участков тела; половой
путь заражения.

Иммунитет:
Основной
иммунитет — клеточный. Развивается
ГЗТ. NK-клетки
играют важную роль в ранней
противомикробной защите. Организм
пора­женного реагирует на гликопротеины
вируса, продуцируя цитотоксические
Т-лимфоциты, и Т-хелперы, активирую­щие
В-лимфоциты с последующей продукци­ей
специфических АТ.

Микробиологическая
диагностика.
Материал — содержимое
гер­петических везикул, слюна,
соскобы с роговой оболочки глаз, кровь,
спинномозговая жидкость. В окрашенных
мазках наблюдают гигантские многоядерные
клетки, клетки с увеличенной цитоплазмой
и внутриядер­ными включениями.

Для
выделения вируса исследуемым материалом
заражают клетки HeLa,
Нер-2, человеческие эмбриональные
фибробласты.

Рост
в культуре кле­ток проявляется
округлением клеток с последующим
про­грессирующим поражением всей
культуры клеток. Заражают куриные
эмбрионы, у которых после внутримозгового
заражения развивается энце­фалит.
Выделенный вирус идентифицируют в
РИФ и ИФА с использованием моноклональных
АТ.

Серодиагностику
проводят с помощью РСК, РИФ, ИФА и РН
по нарастанию титра АТ больного. ИБ
способен выявлять типоспецифические
АТ.

При
экспресс-диагностике
в мазках-от­печатках из высыпаний,
окрашенных по Романовскому-Гимзе,
выявляются гига­нтские многоядерные
клетки с внутриядер­ными включениями.
Для идентификации вируса используют
также амплификацию ге­нов вирусной
ДНК в реакции ПЦР.

Лечение:
Применяют
препа­раты интерферона, индукторы
интерферона и противовирусные
химиотерапевтические препараты
(ацикловир, видарабин).

Профилактика:
Специфическая
профи­лактика рецидивирующего
герпеса осущест­вляется в период
ремиссии многократным введением
инактивированной культуральной
герпетической вакцины.

—

—

—

Б36

1.
АНТИБИОТИКИ —

Вещества,
которые получаются из микроорганизмов,
растений, животных тканей и синтетическим
путем. Тормозят рост и размножение
микроорганизмов (бактериостатическое
действие) или убивают их (бактерицидное
действие).

По
происхождению: Бактериальные
(полимиксин, грамицидин); актиномицетные
(стрептомицин, левомицетин, эритромицин);
грибковые (пенициллин); растительные
(рафанин, фитонциды); животного
происхождения (интерфероны, лизоцим).

По
спектру действия: Действующие на грам+
флору (пенициллин, эритромицин);
действующие на грам- флору (полимиксин);
действующие на грам+ и грам- флору
(стрептомицин, неомицин); противогрибковые
(нистатин, амфотеррицин, леварин,
низорал); противотуберкулезные
(стрептомицин, канамицин); противоопухолевые
(рифампицин); противовирусные
(интерферон, зовиракс, ацикловир).

По
механизму действия:

—
Ингибиторы синтеза пептикогликана
клеточной стенки (пенициллин,
цефалоспорин, ванкомицин, ристомицин).
Действуют на имеющих клеточную стенку
растущие бактерии, не действуют на L-
формы, покоящиеся формы бактерий;

—
ингибиторы синтеза белка (стрептомицин,
левомицетин, тетрациклин);

—
ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот,
пуринов, аминокислот (налидиксовая
кислота, рифампицин);

—
ингибиторы синтеза мембраны и
цитоплазматической мембраны грибов
(нистатин, полимиксин).

Побочное
действие антибиотиков.

Для
макроорганизма: Токсическое действие;
дисбактериозы; аллергические реакции;
иммунодепрессивное действие;
эндотоксический шок.

Для
микроорганизмов: Формирование атипичных
форм микробов; формирование
антибиотикорезистентных и
антибиотикозависимых форм микроорганизмов.

2.
РЕАКЦИЯ
ПРЕЦИПИТАЦИИ (РП) —

Формирова­ние
и осаждение комплекса растворимого
молекулярного АГ с АТ в виде помутнения,
называемого преципитатом. Он образуется
при смешивании АГ и АТ в эквивалентных
количес­твах; избыток одного из них
снижает уровень образования иммунного
комплекса.

РП
ставят в пробирках (реакция
кольцепреципитации), в гелях, питательных
средах. Широкое распространение
получили разновидности РП в полужидком
геле агара или агарозы: двойная
иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная
иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез.

Механизм.
Проводится
с прозрачными коллоид­ными растворимыми
АГ, добытых из патологического
материала, объектов внешней среды или
чистых культур бактерий. В реакции
используют прозрачные диагности­ческие
преципитирующие сыворотки с высокими
титрами АТ. За титр преципитирующей
сыворотки принимают то наибольшее
разведение АГ, которое при взаимодействии
с иммун­ной сывороткой вызывает
образование видимого преципитата —
помутнение.

Реакция
кольцепреципитации ставится
в узких пробирках (диаметр 0,5 см), в
которые вносят по 0,2-0,3 мл преципитирующей
сыворотки. Затем пастеровской пипеткой
наслаивают 0,1-0,2 мл раствора АГ. Пробирки
переводят в вертикальное положение.
Учет реакции производят через 1-2 мин.
В случае положительной реакции на
границе между сывороткой и исследуемым
АГ появляется пре­ципитат в виде
белого кольца. В контрольных пробирках
преци­питат не образуется.

3.
ОНКОГЕННЫЕ ВИРУСЫ.

РНК-содержащие:
семейство Retroviridae
(включает 7 родов).

ДНК-содержащие:
семейства Papillomaviridae,
Polyomaviridae,
Adenoviridae
12, 18, 31, Hepadnaviridae,
Herpesviridae,
Poxviridae

Онковирусы
— сложноорганизованные вирусы. Вирионы
построены из сердцевины, окружен­ной
липопротеиновой оболочкой с шипами.
Размеры и формы шипов, и локализа­ция
сердцевины служат основой для
подраз­деления вирусов на 4
морфологических типа (А, В, С, D),
и вирус бычьего лейкоза.

Капсид
онковирусов построен по кубичес­кому
типу симметрии. В него заключены
нуклеопротеин и фермент ревертаза.
Ревертаза обладает способностью
транскрибировать ДНК. Геном — 2 идентичные
цепи РНК.

Культивирование:
Не культивируются на куриных эмбрионах,
культивируются в организме чувствительных
животных, в культурах клеток.

Репродукция:
Проникают в клетку путем эндоцитоза.
3 этапа: синтез ДНК, на матрице РНК;
ферментативное расщепление матричной
РНК; синтез комплементарной нити ДНК
на матрице первой нити ДНК.

К
семейству Retroviridae
относится
150 видов вирусов, вызывающих развитие
опухолей у животных, и 4 вида вызы­вают
опухоли у человека: HTLV-1,
HTLV-2,
ВИЧ-1,ВИЧ-2.

Вирусы
Т-клеточного лейкоза человека.

К
семейству Retroviridae
роду
Deltaretrovirus
относятся
вирусы, поражающие CD4
Т-лимфоциты, роль в развитии опухолевого
процесса у людей: HTLV-1
и HTLV-2

Вирус
HTLV-1
— возбудитель
Т-клеточного лимфолейкоза взрослых.
Является экзогенным онковирусом,
который имеет два допол­нительных
структурных гена: tax
и rех.

Продукт
tax-гена
действует на терминаль­ные повторы
LTR,
стимулируя синтез вирус­ной иРНК,
а также образование ИЛ-2 рецеп­торов
на поверхности зараженной клетки.
Продукт rex-гена
определяет очередность трансляции
вирусных иРНК.

HTLV-2
был изолирован от больного
во­лосисто-клеточным лейкозом.

Оба
вируса передаются половым, трансфузионным
и трансплацентарным путями.

Семейство
Papillomaviridae
—
вирус папилломы человека, собак.
Вызывают инфекцию в клетках плоского
эпителия. Доброкачественные папилломы
в области половых органов, на коже, на
слизистых дыхательных путей.

Семейство
Polyomaviridae
— вакуолизирующий
вирус обезьян SV-40.
Вирус полиомы человека.

Семейство
Adenoviridae
— аденовирусы
(серотипы 12, 18, 31) — индуцируют саркомы
и трансформируют культуры клеток.

Семейство
Poxviridae
— вирусы
фибромы-миксомы кролика, вирус Ябы,
вызывающий развитие опухолей, вирус
контагиозного моллюска.

Семейство
Herpesviridae
— лимфомы,
карциномы. Онкогенез у человека связан
с вирусом простого герпеса 2 типа и
вирусом Эпштейна-Барр.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б39

1.
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ
БАКТЕРИЙ. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ.

Бактериальная
петля
— инструмент для посевов. Бактериальная
игла
— для посевов уколом. Металлические
(стеклянные) шпатели
— для посевов на чашках Петри.
Пасте­ровские
и градуированные пипетки
— для посевов жидких материалов.

При
пересеве бактериальной культуры берут
пробирку, пронося её над пламенем
горелки. Набирают посевной ма­териал.
В пробирку со скошенным агаром вносят
петлю с посевным материалом, опуская
ее до конденсата в нижней ча­сти
среды, и зигзагообразным движением
распределяют по скошенной поверхности
агара. Пробирки с посевами подписывают,
указывая дату посева и характер
посевного мате­риала.

Посевы
газоном производят шпателем на
питательный агар в чашке Петри.
Приоткрыв крышку, пет­лей наносят
посевной материал на поверхность
питательного агара. Затем проводят
шпатель через пламя горелки, остужают
его о внутреннюю сторону крышки и
растирают материал по всей поверхности
среды. После инкубации посева появляется
равномерный сплошной рост бактерий.

Ростовые
факторы питательных сред,
которые катализируют метаболические
процессы микробной клетки — витамины
груп­пы В, никотиновая кислота.

Искусственные
среды готовят по рецептам из различных
настоев или отваров животного
про­исхождения с добавлением
неорганических солей, угле­водов и
азотистых веществ.

В
бактериологической практике используют
сухие питательные среды. Для приготовления
используют: кровезаменители (гидролизин
— кислотный гидролизат крови животных,
аминопептид — ферментативный гидролизат
крови); продукты биотехнологии (кормовые
дрожжи, кормовой лизин, виноградная
мука, белколизин).

Консистенция.
Плотные среды готовят до­бавляя к
жидкой среде 1,5-2% агара, полужидкие —
0,3-0,7 % агара. Агар — продукт переработки
морских водорослей, плавится при
80-86С, затвердевает при 40С.

По
целевому назначению. Основные
среды
— триптические гидролизаты мясных
продуктов, крови животных или казеина,
из которых готовят жидкую (питательный
бульон) и плотную (пита­тельный агар)
среды.

Элективные
среды
— для выделения и накопления микробов
определен­ного вида из материалов,
содержа­щих постороннюю микрофлору
(рост стафилококков — при повышенной
концентрации NaCl,
хо­лерного вибриона — в щелочной
среде).

Дифференциально-диагностические
среды
— для разграничения отдельных видов
мик­робов. Разные виды бактерий
различаются между собой по биохи­мической
активности (неодинаковый набор
фермен­тов).

Синтетические
среды
— химически чистые вещества: аминокислоты,
минеральные соли, углеводы, витамины.
Полусинтетические
среды
— пептон, дрожжевой экстракт. Эти среды
применяют при получении антибиотиков,
вакцин.

2.
ИММУННЫЙ
СТАТУС.

Иммунный
статус определяет эффективность и
согласованность работы всех систем
и звеньев иммунитета — макрофагов,
комплемента, интерферонов, Т- и В-
лимфоцитов, главной системы
гистосовместимости. Клинической
иммунологией
-изучает патологию человека в аспекте
нарушений функций иммунной системы.

Для
постановки диагноза иммунопатологического
состояния проводят сбор иммунологического
анамнеза и постановку иммунологических
тестов. Могут также осуществляться
тесты in
vivo
(кожные тесты), рентгенологическое
исследование лимфоидных органов
(тимуса).

Иммунопатологические
синдромы:
инфекционный; аллергический;
аутоиммунный; иммунопролиферативный;
первичный иммунодефицит; вторичный
иммунодефицит.

Для
оценки общего
иммунного статуса
используют показатели, отражающие
суммарную эффективность работы всех
систем иммунитета, для изучения
уязвимого
звена
— специфичные для каждой системы
дифференциальные тесты. Изучение
иммунного статуса проводится в два
этапа:

На
первом этапе
с помощью простых ориентировочных
методов
выявляют “грубые” дефекты фагоцитоза,
клеточного и гуморального иммунитета.
К
тестам первого уровня относят :

—
опред. абсолютного и относительного
содержания лимфоцитов в периферической
крови;

—
опред. количества Т- и В- лимфоцитов;

—
опред. уровня иммуноглобулинов основных
классов (IgG,
IgM,
IgA);

—
опред. фагоцитарной активности
лейкоцитов;

—
опред. титра комплемента.

Методы
исследования главных компонентов
иммунной системы — скрининговые
и развернутые.

При
оценке В- системы иммунитета
к скрининговым тестам относятся :
определение количества CD19+
и CD20+
клеток, IgG,
IgM
и IgA,
а также IgG1,2,3,4,
к развернутым- бласттрансформацию на
митоген лаконоса и S.aureus,
пповерхностных маркеров В- лимфоцитов.

При
оценке Т- системы иммунитета
к скрининговым методам можно отнести
кожные тесты на бактериальные АГ,
определение поверхностных маркеров
Т- лимфоцитов CD3,
CD4,
CD8,
бласттрансформацию на фитогемагглютинин,
к развернутым — изучение продукции
цитокинов, активационных маркеров,
Т- клеточных рецепторов.

При
оценке фагоцитоза
к скрининговым тестам относят
определение количества нейтрофилов,
изучение их морфологии и образования
активных форм кислорода, к развернутым
— определение киллинга микробов,
лизосомальных ферментов, цитокинов.

Методы
исследования лимфоцитов
— изучение
поверхностных маркеров и функциональные
тесты.

Изучение
поверхностных СД антигенов
основывается на:

—
методах розеткообразования;

—
методах иммунофлюоресценции;

—
иммуноферментном анализе.

3.
КЛЕБСИЕЛЛА.

Род
Klebsiella семейство энтеробактерий.
Особенность — способность образовывать
капсулу. Основной вид — K.pneumoniae (с
подвидами pneumoniae, ozaenae, rhinoscleromatis).
Определенную роль в патологии имеют
также K.oxytoca, K.planticola, K.terrigena. Вызывают
оппортунистические поражения —
госпитальные пневмонии, инфекции
мочевыводящих путей, диареи у
новорожденных. Клебсиеллы вызывают
маститы, септицемии и пневмонии у
животных, постоянно обнаруживаются
на коже и слизистых оболочках человека.

Морфология:
Прямые неподвижные палочки различных
размеров. Факультативные анаэробы.
Оксидаза-отрицательны, каталаза-положительны.

Культуральные
свойства:
Хорошо растут на простых питательных
средах. Оптимум рН — 7,2-7,4, t
— от 35 до 37C.
На плотных средах образуют мутные
слизистые колонии, на жидких — равномерное
помутнение, иногда со слизистой пленкой
на поверхности.

АГ
структура:
К-АГ (капсульные) и О-АГ (соматические).
Для серотипирования в РА используют
К-АГ (безкапсульные варианты в РА не
выявляют) с антиК-сыворотками. Некоторые
К-АГ родственны К-АГ стрептококков,
эшерихий и сальмонелл.

Факторы
патогенности:
Полисахаридная капсула (К-АГ), эндотоксин,
фимбрии, сидерофорная система (связывает
ионы 2х валентного железа и снижает
их содержание в тканях), термолабильные
и термостабильные экзотоксины.

Клинические
проявления:
Для K.pneumoniae характерны госпитальные
бронхиты и бронхопневмонии, долевые
пневмонии, инфекции мочевыводящих
путей, поражения мозговых оболочек,
суставов, позвоночника, глаз, а также
бактеремии и септикопиемии. Подвид
ozaenae вызывает форму хронического
атрофического ринита — озену, подвид
rhinoscleromatis — хроническое гранулематозное
поражение дыхательных путей.

Лабораторная
диагностика.
Основной метод — бактериологический.
Чаще используют дифференциально-диагностическую
среду К-2 (с мочевиной, рафинозой,
бромтимоловым синим), на которой через
сутки вырастают крупные блестящие
слизистые колонии. Колонии окрашенные
(желтые или зеленые). Идентификация
культур — по биохимическим свойствам
и в РА с К-сыворотками (определение
серогруппы).

Лечение:
Антибиотики применяют при генерализованных
и вялотекущих хронических формах
клебсиеллезов в сочетании с препаратами,
стимулирующими иммунитет. Препараты
— аминогликозиды и бета- лактамовые
антибиотики широкого спектра действия.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б42

1.
БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОКИСЛЕНИЕ.

Дыхание
микроорганизмов — биологический
процесс переноса электронов через
дыхательную цепь от доноров к акцепторам
с образованием АТФ. В зависимости от
конечного
акцептора электронов
дыхание — аэробное — молекулярный
кислород (О2), анаэробное — связанный
кислород (NO3,
SO4,
SO3).

Микроорганизмы
по типу дыхания:

1.
Облигатные (строгие) аэробы — необходим
молекулярный О2 для дыхания.

2.
Микроаэрофилы нуждаются в уменьшенной
концентрации (низком парциальном
давлении) свободного О2. Для создания
этих условий в газовую смесь для
культивирования добавляют CO2
(до 10% концентрации).

3.
Факультативные анаэробы — потребляют
глк и размножаются в аэробных и
анаэробных условиях. Среди них
микроорганизмы, толерантные к высоким
концентрациям молекулярного О2
(аэротолерантные), и микроорганизмы
которые способны в определенных
условиях переключаться с анаэробного
на аэробное дыхание.

4.
Строгие анаэробы — размножаются при
низких концентрациях молекулярного
О2, который в больших концентрациях
для них губителен. Биохимически
анаэробное дыхание протекает по типу
бродильных процессов, молекулярный
О2 при этом не используется.

Аэробное
дыхание энергетически более эффективно
(синтезируется большее количество
АТФ).

В
процессе аэробного дыхания образуются
токсические продукты окисления
(перекись водорода, свободные О2
радикалы), от которых защищают
специфические ферменты, прежде всего
каталаза, пероксидаза, пероксиддисмутаза.
У анаэробов эти ферменты отсутствуют,
также как и система регуляции
окислительно-восстановительного
потенциала (rH2).

2.
ПРЕПАРАТЫ ИЗ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ (Ig).

Применение
комплексной терапии, включающей
препараты, стимулирующие выработку
АТ, и Ig
препараты, содержащие готовые АТ (к
кишечной палочке, стафилококкам,
вирусу простого герпеса).

Природа
Ig.
В
ответ на введение АГ иммунная систе­ма
вырабатывает АТ — белки, способные
специфически со­единяться с АГ,
вызвавшим их образование, и таким
образом участвовать в иммунологических
реакциях.

Первичная
функция — взаимодсйствие их активных
центров с комплементарными им
детерминантами АГ. Вторичная функция
способность:

• связывать
АГ с целью его нейтрализации и элиминации
из организма;

• участвовать
в распознавании чужого АГ;

• обеспечивать
кооперацию иммунокомпетентных клеток
(мак­рофагов, Т- и В-лимфоцитов);

• участвовать
в формах иммунного ответа (фагоци­тоз,
киллерная функция, ГНТ, ГЗТ,
иммунологическая толерантность,
иммунологическая память).

Структура
АТ. Белки
Ig
по хим составу — гликопротеиды (состоят
из проте­ина и сахаров); построены
из 18 аминокислот. Молекулы имеют
цилиндрическую форму. 80 %
Ig
имеют константу седиментации 7S;
устойчивы к слабым кисло­там, щелочам,
нагреванию до 60С.

Препараты
иммуноглобулинов. Получение, показания
к применению.

Нативные
иммунные сыворотки содержат ненужные
белки (альбумин), из этих сывороток
выделяют и подвергают очистке
специфические белки-Ig.

Ig,
иммунные сыворотки подразделяют на:

1.Антитоксические
— содержащие в качестве АТ антитоксины,
которые нейтрализуют специфические
токсины (против дифтерии, столбняка,
ботулизма, газовой гангрены);

2.Антибактериальные
— содержащие агглютинины, преципитины,
комплементсвязывающие АТ к возбудителям
брюшного тифа, дизентерии, чумы,
коклюша.

3.Противовирусные
— содержащие вируснейтрализующие,
комплементсвязывающие противовирусные
АТ
(коревая,
гриппозная, антирабическая).

Методы
очистки: Осаждение спиртом, ацетоном
на холоде, обработка ферментами,
аффинная хроматография, ультрафильтрация.
Эти методы используют в производстве
иммунобиологических препаратов.

Активность
Ig
выражают в антитоксических единицах,
в титрах вируснейтрализующей,
гемагглютинирующей, агглютинирующей
активности, т.е. тем наименьшим
количеством АТ, которое вызывает
видимую реакцию с определенным
количеством специфического АГ.

Ig
создают пассивный специфический
иммунитет сразу после введения.
Применяют для лечения токсинемических
инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия,
газовая гангрена), и для лечения
бактериальных и вирусных инфекций
(корь, краснуха, чума, сибирская язва).

Профилактически:
в/м лицам, имевшим контакт с больным,
для создания пассивного иммунитета.

3.
КОРОНАВИРУСЫ.

Coronaviridae
— род вирусов, объединяющий РНК-содержащие
плеоморфные вирусы средней величины.
Вирусы размножаются в цитоплазме
инфицированных клеток. Во внешней
среде нестойки, разрушается при t
56С за 10-15 мин.

Семейство
включает два рода — коронавирусы и
торовирусы.

Род
коронавирусы
включает многие важные патогенные
вирусы млекопитающих и птиц, вызывающие
респираторные болезни, энтериты,
полисерозиты, миокардиты, гепатиты,
нефриты и иммунопатологию. У человека
коронавирусы вызывают синдром обычной
простуды.

Род
торовирусы
включает два вируса, выделенных от
лошадей и КРС — вирус Берне и вирус
Бреда.

Коронавирусы
— вирионы округлой формы диаметром
80-220 нм. Вирионы состоят из нуклеокапсида
спиральной симметрии и гликопротеиновой
оболочки, на поверхности которой
имеются булавовидные выступы длиной
20 нм.

Структурные
белки:
Нуклеокапсидный белок N взаимодействует
с геномной РНК, формируя нуклеокапсид
вируса. Пепломерный гликопротеин S
образует большие выступы на поверхности
вирионов. Разделён на большой наружный,
трансмембранный и цитоплазматический
сегменты. Большой наружный сегмент
состоит из двух субдоменов S1 и S2.
Мутации в S1 сегменте связаны с изменением
антигенности и вирулентности вируса.
Расщепление S белка зависит от клеточной
системы. S белок ответственен за слияние
вирусной оболочки с мембраной клетки.

Трансмембранные
гликопротеины М и Е. М гликопротеин
отличается коротким доменом,
экспонированным на оболочке вириона.
Моноклональные АТ против этого домена
нейтрализуют вирус только в присутствии
комплемента. Небольшой Е белок находится
в оболочке вириона. М и Е белки участвуют
в формировании вириона и выходе его
из клетки почкованием.

Торовирусы
— полиморфные оболочечные частицы,
окруженные пепломерами. Диаметр
вирионов 120-140 нм, плотность 1,16-1,18 г/мл.
Форма вирионов — двояковогнутый диск
или почкообразная. Они содержат
удлиненный тубулярный нуклеокапсид
спиральной симметрии, имеющий
тороидальную форму.

Структурные
белки:
Фосфопротеин нуклеокапсида — белок
N, мембранный гликопротеин М, мелкий
мембранный белок Е, пепломерный
гликопротеин S.

Зрелый
пепломерный белок состоит из двух
субъединиц и в процессе созревания
in vivo подвергается протеолитической
активизации. Пепломеры длиной 9-20 нм
имеют детерминанты нейтрализации и
гемагглютинации.

Два
серотипа торовируса КРС — Бреда-вирус
1 и Бреда-вирус 2.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

Б45

1.
ХИМИОТЕРАПИЯ.

Специфическое
антимикробное, антипаразитар­ное
лечение при помощи хим веществ. Свойства
этих веществ — избирательность действия
против болезнетворных микроорганизмов
в условиях макроорганизма.

Основоположник
химиотерапии — Эрлих, установил, что
хим вещества, содержащие мышьяк,
губительно действу­ют на спирохеты
и трипаносомы, и получил первый
химиотерапевтический препарат —
сальварсан (соединение мы­шьяка,
убивающее возбудителя, но безвредное
для микроорга­низма).

Домагк
обнаружил среди анилиновых красителей
вещество — пронтозил, спасавший
экспериментальных животных от
стрепто­кокковой инфекции, но не
действующий на эти бактерии вне
организма. В организме происхо­дит
распад пронтозила с образованием
сульфаниламида, обла­дающего
антибактериальной активностью.

Вудс
установил, что суль­фаниламиды
являются структурными аналогами
парааминобензойной кислоты (ПАБК),
участвующей в биосинтезе фолиевой
кислоты, необходимой для жизнедеятельности
бактерий. Бакте­рии, используя
сульфаниламид вместо ПАБК, погибают.

Противовирусные
препараты.

Вирулоцидные
препараты, действующие на внеклеточные
вирионы: Оксолин действующий на
риновирусы, герпесвирусы, миксовирусы;
тетрофеин действующий на аденовирусы,
герпесвирусы.

Препараты,
блокирующие адсорбцию вируса на
рецепторах клетки хозяина: На этой
стадии используют фальшивые рецепторы
— структурные аналоги вирусных
рецепторов, которые адсорбируясь на
рецепторах (лигандах) клеток, препятствуют
адсорбции вируса. Аналог рецептору
CD4, на котором адсорбируется ВИЧ.

Препараты,
нарушающие процесс раздевания вирусов:
Ремантадин, активный против вируса
гриппа А.

Препараты,
ингибирующие стадию сборки вирионов:
Производные тиосемикарбазона. Метисазон
(марборан) ингибитор вируса оспы.

Препараты
— ингибиторы репликации — аналоги
азотистых оснований, которые, встраиваясь
в молекулу ДНК или РНК, блокируют
работу полимераз: Видарабин — действует
на ДНК-зависимую ДНК-полимеразу вируса
герпеса. Препарат токсичен, используется
только при тяжелых формах заболеваний.
Ациклавир имеет тот же механизм
действия. Наиболее широко используется
при инфекциях, вызванных вирусом
герпеса Эпштейна-Барр и герпесвирусами
6 и 7 типов.

Азидотимидин
— аналог тимина, действует на обратную
транскриптазу ретровирусов, в частности
ВИЧ. Дидезоксицитадин — аналог
азидотимидина. Оба препарата токсичны.
К ингибиторам репликации относятся
также аналоги фосфоновой кислоты,
которые, необратимо связываясь с
пирофосфатом, блокируют функцию
ДНК-полимеразы.

2.
ИНФЕКЦИЯ —

Совокупность
всех биологических явлений и процессов,
возникающих в организме при внедрении
и размножении в нем микроорганизмов.

Инфекционный
процесс — взаимоотношения между макро-
и микроорганизмами в виде адаптационных
и патологических процессов в организме.

Инфекционная
болезнь
—
выраженная форма инфекционного
процесса.

Симбиоз
(сожительство) — взаимоотношения микро-
и макроорганизмов.

Формы
симбиоза:

Мутуализм
—
взаимовыгодные
отношения (нормальная микрофлора).

Комменсализм
—
выгоду извлекает один партнер (микроб),
не причиняя вреда другому. При любом
типе взаимоотношений микроорганизм
может проявить свои патогенные свойства
(условно-патогенные микробы — комменсалы
в иммунодефицитном хозяине).

Паразитизм
— микроорганизм питается за счет
хозяина, т.е. извлекает выгоду, нанося
вред хозяину. В процессе перехода от
свободноживущего к паразитическому
типу жизнедеятельности микроорганизмы
теряют ряд ферментных систем, необходимых
для существования во внешней среде,
но приобретают ряд свойств, обеспечивающих
возможность паразитизма.

Этапы
инфекционного процесса:

1.
Адгезия — прикрепление микроорганизма
к соответствующим клеткам хозяина.

2.
Колонизация — закрепление микроорганизмов
в соответствующем участке.

3.
Размножение — увеличение количества,
мультипликация.

4.
Пенетрация — проникновение в нижележащие
слои и распространение инфекта.

5.
Повреждение клеток и тканей (связано
с размножением, пенетрацией и
распространением инфекта).

Инфекционный
процесс:

По
длительности:

Острая
циклическая
инфекция заканчивается удалением
возбудителя или смертью больного. При
хронической
инфекции
возбудитель сохраняется в организме
(персистенция). Механизмы для
персистенции: Внутриклеточная
локализация (укрываются в клетке);
переход в не имеющие клеточной стенки
L—
формы; АГ мимикрия (совпадение по
химическому составу АГ детерминант
микроба и клеток хозяина ); укрытие в
локальных очагах и забарьерных органах
(головной мозг). Факторы персистенции
для вирусов: Интеграция генома вируса
с хромосомой клетки-мишени; недоступность
действию АТ; наличие дефектных вирусных
частиц; слабая индукция иммунного
ответа. Персистенция
в организме и периодическая смена
хозяина
— механизмы поддержания микробных
популяций.

По
степени распространения:

Локальный
—
возбудитель сосредоточен в определенном
очаге, не выходя за его пределы, что
сдерживает механизмы защиты. Если
микроорганизм способен распространяться
по организму, возникает генерализованный
процесс.
Пути распространения — лимфогенный
(по лимфатической системе) и гематогенный
(по кровяным сосудам).

По
выраженности:

Манифестный
(ярко выраженный) — инфекционная болезнь
— типичная, атипичная, хроническая.
Инаппарантный
(бессимптомный)
— характерен для латентной инфекции.
Размножение возбудителя в организме
не сопровождается клиническими
проявлениями, а только иммунными
реакциями.

Инфекционные
заболевания отличаются от соматических:
Наличием возбудителя, заразностью,
цикличностью течения.

3.
КОКЛЮШ.

Коклюш
— возбудитель Bordetella pertussis. Острая
инфекционная болезнь, харак­теризующаяся
поражением верхних дыхательных путей,
приступами спазматического кашля.
Антропоноз.

Таксономия:
Отдел Gracilicutes
род Bordetella.

Морфологические
и тинкториальные свойства:
Мелкая овоидная грам- палочка с
закругленными концами. Спор и жгутиков
не имеет, образует микрокапсулу, пили.

Культуральные
и биохимические свойства:
Строгий аэроб. Оптимальная t
культивирования 37С. Медленно растет
на среде Борде-Жангу (картофельно-глицериновый
агар с добавлением крови), образуя
колонии, похожие на капельки ртути.
Характерна R—S-трансформация.
Расщепляют глк и лактозу до кислоты
без газа.

АГ
структура:
О-АГ термостабильный продоспецифический.
14 поверхностных термолабильных
капсульных К-АГ. Имеет 6 сероваров.
К-АГ выявляют в РА.

Факторы
патогенности:
Термостабильный эн­дотоксин,
вызывающий лихорадку; белковый токсин,
обладающий антифагоцитарной активностью
и стимулирующий лимфоцитоз; ферменты
агрессии, повышающие сосудистую
прони­цаемость, обладающие
гистаминсенсибилизирующим действием,
адгезивными свойствами и вызывающие
гибель эпителиальных клеток. В адгезии
бактерий участвуют гемагглютинин,
пили, белки наружной мембраны.

Резистентность:
Разрушается под действием дезинфектантов.

Эпидемиология:
Источник — больные. Путь передачи
воздушно-капельный.

Патогенез:
Неинвазивные микробы. Входные ворота
инфекции — верхние дыхательные пути.
Адсорбируются на ресничках эпителия,
размножают­ся, выделяют токсины и
ферменты агрессии. Развиваются
вос­паление, отек слизистой оболочки,
часть эпителиаль­ных клеток погибает.
В результате постоянного раздражения
токсинами рецепторов дыхательных
путей появляется кашель.

Клиника:
Инкубационный период 2-14 дн. Недомогание,
невысокая t
тела, кашель, насморк. Позже начинаются
при­ступы спазматического кашля,
заканчивающиеся выделением мокроты.

Иммунитет:
Стой­кий, сохраняется на протяжении
всей жизни. Видоспецифический (АТ
против В.pertussis
не защищают от заболеваний, вызванных
В.parapertussis
— паракоклюш).

Микробиологическая
диагностика.
Материал — слизь из верхних дыхательных
путей, используют метод кашлевых
пластинок (во время приступа кашля ко
рту подставляют чашку Петри с питательной
средой). Основной метод — бактериологический.
Позволяет отдифференцировать
возбудителя коклюша от паракоклюша.
Посев на плотные питательные среды с
антибиотиками. Для идентификации
возбудителя — РА на стекле с К-сыворотками.
Для ускоренной диаг­ностики применяют
прямую РИФ со специфической флуоресцентной
сывороткой и материалом из зева.
Серологический метод — обнаружение
IgG
и IgA
против феламентозного гемаггютинина
и против токсина В.pertussis.

Лечение:
Антимикробные препараты — эритромицин,
ампициллин (кроме пенициллина). При
тяжелых формах применяют нормальный
человеческий Ig.

Профилактика:
Адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная
вакцина. В ее со­став входит убитая
культура В. pertussis
I
фазы, коклюшный токсин, агглютиногены,
капсул АГ.

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—